Безопасность и иммуногенность вакцины-кандидата против анкилостомоза с дополнительным адъювантом или без него у взрослых в Бразилии

Анкилостомоз человека — это гельминтозная инфекция, передающаяся через почву, вызываемая паразитами-нематодами Necator americanus и Ancylostoma duodenale. Это одна из самых распространенных хронических инфекций человека, поражающая до 740 миллионов человек в развивающихся странах тропиков. Наибольшее число случаев заболевания происходит в бедных сельских районах Африки к югу от Сахары, Юго-Восточной Азии, Китая и тропических регионов Америки. Приблизительно 3,2 миллиарда человек в этих районах подвержены риску заражения анкилостомозом. N. americanus является наиболее распространенным анкилостомозом во всем мире, тогда как A. duodenale более ограничен географически.

Основным подходом к борьбе с анкилостомозом во всем мире было частое и периодическое массовое введение бензимидазольных антигельминтных средств детям школьного возраста, проживающим в районах с высокой распространенностью. В 2001 г. Всемирная ассамблея здравоохранения приняла Резолюцию 54.19, в которой содержится настоятельный призыв к государствам-членам обеспечить регулярное лечение антигельминтными средствами групп высокого риска с целью регулярного лечения не менее 75% всех детей школьного возраста из группы риска. Тем не менее, показатели излечения от однократной дозы бензимидазола варьируются от 61% (400 мг) и 67% (800 мг) для альбендазола и 19% (однократная доза) и 45% (повторная доза) для мебендазола. сообщил. Эти опасения вызвали интерес к разработке альтернативных средств борьбы с анкилостомами. Вакцинация для предотвращения анемии, связанной с анкилостомозом средней и тяжелой степени тяжести, могла бы смягчить недостатки медикаментозного лечения для общественного здравоохранения.

Текущая стратегия разработки вакцин-кандидатов от анкилостомы человека сосредоточена на антигенах, экспрессируемых на взрослой стадии жизненного цикла анкилостомы, которые играют роль в переваривании гемоглобина хозяина, используемого гельминтом в качестве источника энергии. Эти антигены относительно скрыты от иммунной системы человека во время естественной инфекции и, следовательно, имеют низкую вероятность индукции антиген-специфических IgE у подвергшихся воздействию/инфицированных лиц, что снижает вероятность аллергической реакции после вакцинации.

Пищевые и метаболические потребности взрослых анкилостом, живущих в кишечнике человека, зависят от деградации гемоглобина хозяина, который был проглочен червем. Выживание анкилостомы N. americanus зависит от гемоглобина хозяина. После гемолиза взрослые анкилостомы используют упорядоченный каскад гемоглобиназ для расщепления гемоглобина на более мелкие молекулы. После переваривания гемоглобина освобожденный гем генерирует токсичные кислородные радикалы, которые могут быть связаны и обезврежены молекулами, такими как глутатион-S-трансфераза-1 (GST-1). GST-1 N. americanus (Na-GST-1) является критическим ферментом, который играет роль в питании паразита кровью; Исследователи предполагают, что при использовании в качестве вакцины антиген будет индуцировать антиферментные нейтрализующие антитела, которые будут мешать питанию паразита кровью и вызывать гибель паразита или снижать плодовитость червей.

После его выбора в качестве антигена-кандидата Na-GST-1 был успешно изготовлен и испытан в лаборатории и на животных как с Alhydrogel® (суспензия гидроксида алюминия), так и с Alhydrogel® плюс водная композиция глюко-пиранозилфосфолипида A (GLA-AF). . Было показано, что Na-GST-1 является чистым, мощным и стабильным при введении в виде любого из этих двух составов.

Вакцинные составы Na-GST-1, подлежащие тестированию в этом исследовании, состоят из рекомбинантного белка Na-GST-1 с молекулярной массой 24 кДа, адсорбированного на Alhydrogel® либо с добавлением GLA-AF, либо без него. Для состава Na-GST-1/GLA-AF GLA-AF будет добавлен к составу Alhydrogel® непосредственно перед иммунизацией. Активным ингредиентом обоих составов вакцин является рекомбинантный белок Na-GST-1, полученный путем ферментации клеток дрожжей Pichia pastoris, генетически сконструированных для экспрессии Na-GST-1.

В этом первом исследовании на людях оценка безопасности и иммуногенности составов Na-GST-1 и Na-GST-1/GLA-AF будет проводиться в два этапа. Во-первых, в городском центре Белу-Оризонти, Бразилия, будут зарегистрированы здоровые взрослые, которые не были заражены анкилостомозом и не подвергались воздействию анкилостомы. Анкилостомоз в Бразилии - это в первую очередь сельская болезнь, которая редко встречается в развитых городских районах, таких как Белу-Оризонти. Если у этих добровольцев не будет обнаружено серьезных проблем с безопасностью, исследование будет продолжено для включения и вакцинации здоровых взрослых в эндемичном по анкилостомам регионе штата Минас-Жерайс, Бразилия. Вакцинные составы будут тестироваться в обеих популяциях (т. е. в неэндемичных и эндемичных районах), учитывая возможность того, что профиль безопасности вакцинных составов может отличаться в популяции, которая подвергалась хроническому воздействию антигена, содержащегося в этих вакцинах.

В части I исследования 36 добровольцев будут включены в одну из шести групп. В первой группе 6 человек получат дозу 10 мкг Na-GST-1/Alhydrogel®; во второй группе 6 человек получат дозу 10 мкг Na-GST-1/Alhydrogel®/GLA-AF; в третьей и четвертой группах по 6 добровольцев получат по 30 мкг Na-GST-1/Alhydrogel® и Na-GST-1/Alhydrogel®/GLA-AF соответственно; в то время как в пятой и шестой когортах по 6 добровольцев получат по 100 мкг Na-GST-1/Alhydrogel® и Na-GST-1/Alhydrogel®/GLA-AF соответственно. Зачисление этих когорт будет происходить в шахматном порядке с интервалом в одну неделю: когорты 2 и 3 будут зачислены и начнут вакцинацию через 1 неделю после когорты 1, когорты 4 и 5 будут вакцинированы через 1 неделю после когорт 2 и 3, а когорта 6 будет вакцинирована. 1 неделя после групп 4 и 5.

В Части II исследования 66 добровольцев будут постепенно включены в одну из групп с шестью дозами. В первой, третьей и пятой когортах добровольцы будут рандомизированы для получения Na-GST-1/Alhydrogel® (n=8) или Бутанга® (n=2), а во второй, четвертой и шестой когортах добровольцы будут быть рандомизированы для получения либо Na-GST-1/Alhydrogel® (n=2), либо Na-GST-1/Alhydrogel®/GLA-AF (n=10). Добровольцы, рандомизированные для получения Na-GST-1, получат дозу 10 мкг, 30 мкг или 100 мкг. Чтобы гарантировать, что вакцинные составы будут оцениваться у лиц, недавно инфицированных анкилостомозом, по крайней мере 4 человека будут включены в каждую из когорт Части II, которые были инфицированы анкилостомозом, на основании анализа кала, проведенного во время скрининга для исследования. или кто имел документально подтвержденную инфекцию в течение 3 месяцев от даты, запланированной для первой вакцинации для участника.

Исследователи выбрали вакцину Butang® против гепатита B (Instituto Butantan, Сан-Паулу, Бразилия) в качестве вакцины сравнения по пяти основным причинам: (1) она, вероятно, принесет некоторую пользу участникам, получающим ее, (2) она обладает установленный показатель безопасности, (3) это рекомбинантный белок, полученный из дрожжей, адсорбированный на алюминийсодержащем иммуностимуляторе, (4) он имеет такой же внешний вид, как и иммуностимулятор Na-GST-1, иммуностимулированный альгидрогелем, и (5) его режим дозирования позволяет простота включения в дизайн исследования. Кроме того, вакцина Бутанг® является наиболее широко используемой вакциной против гепатита В в Бразилии: ежегодно распределяется более 15 миллионов доз.

Каждый участник получит 3 дозы назначенного исследуемого агента с интервалом в 56 дней (т. День 0, День 56 и День 112). Ожидается, что судебный процесс продлится в общей сложности 24 месяца. За каждым участником будут наблюдать в течение 16 месяцев с момента первой инъекции.

Параметры безопасности будут контролироваться на протяжении обеих частей исследования. Первичной иммунологической конечной точкой для обеих частей будет измерение антиген-специфического гуморального ответа.