Эффекты инстилляции бронхиального сегментарного эндотоксина у людей

Определение механизмов, ограничивающих повреждение тканей при остром воспалении, может стать основой для предотвращения вторичной дисфункции органов при серьезных инфекциях. Мы планируем использовать модель заражения легких эндотоксином человека для изучения механизмов, связанных с инициацией и разрешением воспаления легких.

Эндотоксин (ЛПС), компонент внешней мембраны грамотрицательных бактерий, является основным микробным фактором, опосредующим воспаление, связанное с серьезными инфекциями. На протяжении более пятидесяти лет эндотоксин вводили людям в качестве контрольного агента, чтобы понять основные механизмы воспаления, чтобы обеспечить доказательство принципа фармакологических вмешательств (например, антицитокины, кортикостероиды) или в качестве адъюванта для иммунотерапии. злокачественные новообразования.

Ранее мы разработали человеческую модель для изучения возникновения и разрешения воспаления в сегменте легкого после инстилляции эндотоксина в бронхи. Воспалительный ответ был ограничен пораженным сегментом и имел минимальные сопутствующие системные ответы. После прямой инстилляции в сегмент легкого эндотоксин вызывает воспалительную реакцию, характеризующуюся локальной продукцией медиаторов воспаления, белков и увеличением клеточности. Преобладающие виды клеток, обнаруживаемые в бронхоальвеолярном лаваже (БАЛ) зараженного сегмента, изменяются от притока нейтрофилов через 2-6 часов до притока моноцитов и лимфоцитов через 24 и 48 часов после воздействия эндотоксина. Через 6 часов провоспалительная активность БАЛ (т.е. биоактивность фактора некроза опухоли и индукция молекулы межклеточной адгезии-1 на репортерных клетках) присутствует и отсутствует через 24 и 48 часов после введения эндотоксина. Кроме того, во время этой воспалительной реакции в легких присутствуют уникальные подмножества лимфоцитов.

Недавно мы показали, что неклеточные микроРНК (миРНК) присутствуют в заархивированном БАЛ из дыхательных путей здоровых добровольцев и по-разному экспрессируются через 6 часов после острого воспаления легких, вызванного эндотоксином. miRNA представляют собой одноцепочечные некодирующие РНК, которые опосредуют посттранскрипционную регуляцию экспрессии генов. Некоторые виды внеклеточных микроРНК могут модулировать локальные и отдаленные клеточные процессы. миРНК могут активировать Toll-подобные рецепторы (TLR) и были описаны как биомаркеры крови различных болезненных состояний. Однако специфическая роль внеклеточных или секретируемых miRNAs в легких плохо определена. Наш план исследования предназначен для изучения роли миРНК в остром воспалении легких путем изучения изменений в сигнатурах миРНК, обнаруженных в БАЛ и клетках легких у здоровых добровольцев на исходном уровне и через 6, 24 или 48 часов после сегментарного заражения эндотоксином легких. Панель маркеров клеточной поверхности проточной цитометрии будет выполняться на клетках крови и БАЛ, а внутриклеточная и секретируемая миРНК будет выделена из определенных видов клеток (т.е. нейтрофилов, моноцитов, макрофагов и лимфоцитов). Мы предполагаем, что miRNA будет играть роль в модуляции инициации и разрешения воспаления.