Клинические испытания «Pre-Proof of Concept (Pre-POC)» для оптимизации прототипов продуктов для прикорма, ориентированных на свинцовую микробиоту (MDCF), на предмет их способности восстанавливать незрелость микробиоты и устанавливать их органолептическую приемлемость (MDCF)

Исследователи проведут 3 исследования Pre-POC среди детей в возрасте 12-18 месяцев с MAM (WLZ <-2 до -3) и задержкой роста (LAZ <-2 до -3) в течение приблизительно двух лет.

Дизайн исследования: рандомизированное контролируемое вмешательство.

Место исследования: Это исследование будет проводиться в Бауниабаде, Мирпур в городе Дакка, который представляет собой пригородный район трущоб.

Участники исследования: Участниками исследования будут дети в возрасте 12-18 месяцев обоего пола с MAM (WLZ: <-2 до -3) и задержкой роста (LAZ: <-2 до -3).

Первоначальный скрининг и зачисление: дети будут проверены и зачислены с помощью обследования домохозяйств в секции 11 Mirpur помощниками полевых исследований (FRA) в соответствии с заранее определенными критериями включения. При выполнении критериев зачисления и после получения согласия на участие в исследовании от родителей или законных опекунов дети с соответствующей матерью/опекуном будут зачислены и случайным образом распределены в одну из четырех групп в соответствии с сгенерированными компьютером случайными числами с использованием переставленных блоков различной длины от четырех до двенадцати для исследования 1. Точно так же дети и мать/опекун будут зачислены и случайным образом распределены в одну из трех групп в соответствии со случайными числами, сгенерированными компьютером, с использованием переставленных блоков длиной блока три и девять для исследования 2 и 3 соответственно. Код назначенного типа MDCF будет храниться в закрытых непрозрачных конвертах до тех пор, пока он не будет присвоен зарегистрированному ребенку.

Сеансы кормления: детям и матерям/опекунам будет предложено прийти в центр питания, созданный в сообществе в Мирпуре, желательно с 9 до 11 утра и с 15 до 17 часов в первый день. Матерям будет предложено не давать/разрешать любую пищу и грудное молоко в течение предшествующих 2 часов наблюдаемого времени приема пищи в день наблюдаемого кормления. В тот же день в центре питания ребенку будет предложено 25 граммов (в два приема пищи, предпочтительно между 9-11 и 15-17 часами) MDCF в зависимости от случайного распределения. Во время кормления матерей попросят ложкой кормить своих детей соответствующей предварительно взвешенной пищей до тех пор, пока они не откажутся от дальнейшего приема пищи, как описано ниже. После двухминутной паузы та же диета будет предложена второй раз, пока он снова не откажется. После второй двухминутной паузы диету предложат в третий раз, пока снова не откажут. После этого третьего отказа эпизод кормления будет считаться «прекращенным».7 Продолжительность кормления (за исключением промежуточных «периодов отдыха») будет фиксироваться секундомером, и будет отмечена общая продолжительность кормления. Если ребенок потребует больше после того, как съест всю еду, ему будет предложено то количество, которое было предложено в начале. Этот эпизод кормления будет длиться максимум 60 минут. Также будут даны измеренные объемы простой воды, и будет измерено количество воды, выпитой в течение этого 60-минутного периода приема пищи. Эпизод кормления будет проходить под непосредственным наблюдением обученного исследовательского персонала. Считается, что дети отказываются от дальнейшего приема пищи, если они отодвигают голову от еды, плачут, зажимают рот или стискивают зубы, становятся возбужденными, выплевывают пищу или отказываются глотать8. Фактически проглоченное количество MDCF будет рассчитано путем вычитания остатка из предложенного количества. Будут предоставлены предварительно взвешенные салфетки; любая еда, которую отрыгнули, вырвали или пролили, будет взята мазком, взвешена и вычтена из предложенного количества.

Приемлемость будет классифицироваться как «принято с удовольствием», если они ели пищу с готовностью, не поднимали суеты, не выплевывали, не рвали и не плакали во время наблюдаемого приема пищи. Дети будут классифицированы как «принятые, но не охотно», если они съели предложенную еду, но либо подняли шум, выплюнули, их вырвало или заплакали во время наблюдаемого приема пищи. Третьей категорией станут дети, которые вообще не будут употреблять предложенную еду9.

Будет проанализировано количество потребляемой пищи (г), калорийность (ккал) и категория приемлемости. Зачисленные дети будут контролироваться посредством ежедневных посещений на дому обученными ассистентами полевых полевых исследований на предмет любых возможных побочных эффектов/нежелательных явлений (например, сыпь, крапивница из-за пищевой аллергии или любые существенные изменения клинического состояния) в течение недели. Если наблюдаются какие-либо побочные эффекты / нежелательные явления, их будут лечить в соответствии со стандартным лечением, предоставленным в больнице Дакки icddr,b. Восприятие и оценка органолептических характеристик назначенных MDCF соответствующей матерью/опекуном также будет оцениваться с использованием 7-балльной гедонистической шкалы. Более высокое значение, то есть 7, будет оцениваться как «очень нравится», а самое низкое значение 1 будет оцениваться как «крайне не нравится».10

В начале исследования будет запрашиваться информация о демографических характеристиках (богатство семьи, уровень жилищных условий, структура семьи и характеристики родителей и т. д.), и обученные FRA будут регистрировать вес обнаженных детей, используя цифровые весы с точностью до 2 г. (Seca, модель 728, Германия), длину (с использованием инфантометра, Seca, модель 416, Германия) и среднюю окружность плеча с точностью до миллиметра (с использованием нерастяжимой липкой ленты). Антропометрия будет проводиться в соответствии со стандартными процедурами, и все измерения будут проводиться трижды, а среднее из них будет записано. Все вмешательства в каждом исследовании будут проводиться у детей в клинике Mirpur. Матерям/основным опекунам будет рекомендовано сохранить текущую практику питания и грудного вскармливания своего ребенка.

Каждое из исследований Pre-POC 1 и 2 будет длиться 8 недель и будет состоять из 4 и 3 групп соответственно, по 12–15 детей в каждой группе, при этом минимум 10 детей в каждой группе завершат исследование. Предстоит 2-недельный подготовительный период для определения MAZ до лечения, и, кроме того, бремя энтеропатогенов будет оцениваться с помощью ПЦР-измерения широкого спектра желудочно-кишечных патогенов в тех же образцах кала, которые использовались для расчета показателей MAZ (они будут не использоваться в качестве инструментов скрининга для последующего лечения). Дети будут случайным образом распределены в одну из трех групп. Будут предприняты усилия, чтобы сбалансировать группы по полу и стратифицировать рандомизацию по возрасту (например, 2 уровня; 12-15 месяцев и >15-18 месяцев). Фаза лечения будет длиться 4 недели, в течение которых каждый тестируемый продукт будет вводиться в испытательный центр два раза в день с интервалом не менее 6 часов. Будет 2-недельный этап после вмешательства, на котором будут взяты 2 дополнительных образца кала (в конце 7 и 8 недель) для оценки изменений в микробиоте, которые происходят после прекращения лечения.

Pre-POC Study 3 будет иметь 3 группы. Он проверит ведущий MDCF, определенный в исследовании 2, и оценит его эффективность при восстановлении незрелости микробиоты по сравнению с текущим стандартом лечения RUSF в течение 4-недельного периода вмешательства. Мы изучим влияние 1-кратного и 2-кратного приема ведущего MDCF в день на эффективность в этом исследовании, а также включим 4-недельный период после вмешательства (с отбором проб кала в конце 7, 8, 9 и 10 недель) для оценить стойкость изменений зрелости микробиоты после прекращения вмешательства и возвращения к домашнему рациону.

Сбор образцов фекалий Еженедельные образцы фекалий (1-2 г) будут собираться в течение 30 минут после производства (дома и доставляться обратно в icddr,b) с использованием СОП для сбора образцов сухого грузоотправителя N2, использованной в недавнем исследовании местных RUTF для лечения SAM (см. Приложение А). Образцы будут храниться при температуре -80 ◦ C перед отправкой в ​​лабораторию Гордона в конце каждого исследования для экспресс-анализа зрелости микробиоты (измеряется до, во время и после прекращения лечения каждым прототипом MDCF) и оценки энтеропатогена на основе ПЦР. бремя в образцах кала (измерено до и после лечения MDCF). Относительная численность каждого из бактериальных штаммов, которые были специально нацелены на MDCF следующего поколения, будет определяться путем анализа наборов данных 16S рРНК (выполненного в лаборатории Гордона и финансируемого за счет основного гранта BMMI Project POC Phase).

Предлагаемые предварительные исследования

Исследование 1. Испытание 3 прототипов MDCF и текущего стандарта лечения MAM с рисом и чечевицей для определения размера эффекта каждого из них на восстановление MAZ при 4-недельном вмешательстве 2 раза в день с 2-недельной фазой после вмешательства для оценки долговечности MAM. Изменения в микробиоте, вызванные MDCF:

Группа 1 — Текущий RUSF, используемый для MAM, вводится 2 раза в день в течение 4 недель Группа 2 — Прототип MDCF1, вводится 2 раза в день в течение 4 недель Группа 3 — Прототип MDCF2, вводится 2 раза в день в течение 4 недель Группа 4 — Прототип MDCF3 вводится 2 раза /день в течение 4 недель

Группа 1 — RUSF на основе риса и чечевицы (обоснование: эталонный стандарт лечения MAM; не разработан на основе знаний о его влиянии на микробиоту кишечника или незрелость микробиоты).

Группа 2 — прототип MDCF с четырьмя дополнительными пищевыми ингредиентами плюс сухое молоко (обоснование: привести данные доклинических гнотобиотических моделей восстановления незрелости микробиоты и положительного влияния на рост).

Группа 3 — прототип MDCF с четырьмя дополнительными пищевыми ингредиентами без сухого молока (обоснование: определить, влияет ли отказ от молока на эффекты четырех комбинаций дополнительных пищевых ингредиентов на микробиоту и биомаркеры хозяина).

Группа 4 - прототип MDCF с двумя дополнительными пищевыми ингредиентами (нут и соевая мука) без сухого молока (обоснование: сравните эффективность этого состава с эффективностью состава MDCF, содержащего четыре дополнительных пищевых ингредиента, который вводят группе 3).

Сбор образцов кала:

Образцы кала будут собираться у каждого ребенка при зачислении, через 1 неделю после зачисления, при рандомизации (2 недели) и еженедельно на этапах вмешательства и после вмешательства.

-Предполагая, что в исследовании 15 участников / группа и 4 группы, в исследовании 1 будет собрано в общей сложности 540 образцов кала.

Сбор проб крови:

У каждого ребенка будет взято по 2 мл образцов крови до вмешательства и сразу после его завершения.

-Предполагая, что в исследовании 15 участников/групп, в исследовании 1 будет собрано в общей сложности 120 образцов крови.

Исследование 2: Выберите наиболее эффективный MDCF из исследования 1 и сравните с двумя дополнительными прототипами MDCF, использующими тот же дизайн, что и в исследовании 1:

Группа 1 — «Победитель» из исследования 2, вводимый 2 раза в день в течение 4 недель Группа 2 — Прототип MDCF4, вводимый 2 раза в день в течение 4 недель Группа 3 — Прототип MDCF5, вводимый 2 раза в день в течение 4 недель

Сбор образцов кала:

Образцы кала будут собираться у каждого ребенка при зачислении, через 1 неделю после зачисления, при рандомизации (2 недели) и еженедельно на этапах вмешательства и после вмешательства.

-При условии, что в исследовании 15 участников / группа и 3 группы, в исследовании 2 будет собрано в общей сложности 405 образцов кала.

Сбор проб крови:

У каждого ребенка будет взято по 2 мл образцов крови до вмешательства и сразу после его завершения.

- 15 участников исследования/руки, всего в исследовании 2 будет собрано 90 образцов крови.

Исследование 3:

Выберите ведущий MDCF из исследований 1, 2 и проведите окончательный «отборочный тест» по сравнению с текущим RUSF, а также изучите влияние однократного и двукратного введения в день с 4-недельным периодом после вмешательства, чтобы получить дополнительную информацию о долговечности спонсируемого MDCF изменения микробиоты:

Группа 1 — Текущий RUSF используется для MAM 2 раза в день в течение 4 недель с последующей 4-недельной постинтервенционной фазой Группа 2 — Ведущий MDCF, определенный в исследовании 2, 2 раза в день в течение 4 недель с последующей 4-недельной постинтервенционной фазой Группа 3 - Ведущий MDCF, определенный в исследовании 2, 1 раз в день в течение 4 недель с последующей 4-недельной постинтервенционной фазой.

Сбор образцов кала:

Фекалии собирали еженедельно у каждого участника исследования в течение 8-недельного курса, включая 2 недели до лечения, четыре недели во время лечения и две недели после прекращения лечения (11 образцов на ребенка).

-При условии, что в исследовании 15 участников / группа и 3 группы, в исследовании 3 будет собрано в общей сложности 495 образцов кала.

Предполагая продолжительность исследования 8 недель (исследования 1 и 2) и 8 недель для отправки образцов фекалий в Вашингтонский университет, выделения ДНК, ПЦР-амплификации области V4 бактериальных генов 16S рРНК, секвенирования этих ампликонов и анализа данных, Ожидается, что каждый цикл обучения от завершения регистрации до завершения анализа данных будет составлять 16 недель. С таким временем цикла мы ожидаем, что сможем оценить кандидаты MDCF к концу июня 2017 года и завершить все 5 к концу апреля 2018 года, после чего ведущий MDCF будет номинирован для исследования POC.

Собранная информация будет использована для отбора образцов человеческих фекалий для трансплантации стерильным животным; эти животные, которых будут кормить донорами человеческой микробиоты, будут использоваться для дальнейшей характеристики механизмов, связывающих прототипы MDCF, кишечную микробиоту и физиологию/метаболизм хозяина.

Целевая ультраэффективная жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (UPLC-MS) и газовая хроматография-масс-спектрометрия (GC-MS) будут использоваться для профилирования представляющих особый интерес аналитов в образцах плазмы и/или кала, включая желчные кислоты и короткоцепочечные жирные кислоты (SCFAs). ); маркеры митохондриальной функции (например, β-гидроксибутират, ацилкарнитины/ацил-КоА, промежуточные продукты цикла ТСА); аминокислоты в образцах фекалий [аминокислоты с разветвленной цепью, триптофан и метаболиты триптофана, связанные с ростом и воспалительным статусом, в том числе продуцируемые бактериальным метаболизмом триптофана (например, производные индолуксусной кислоты)].

Сбор проб крови:

У каждого ребенка будет взято по 2 мл образцов крови до вмешательства и сразу после завершения вмешательства.15 участников исследования / группа и 3 группы, в исследовании 3 будет собрано в общей сложности 90 образцов крови.

Чтобы создать библиотеку кишечной микробиоты здоровых растущих детей из того же сообщества, у 30 детей в возрасте от 12 до 18 лет будет взят один образец кала (1–2 г) и образец крови (2 мл). месяцев любого пола, имеющих WLZ и LAZ: >-1. Это будет сделано только после получения согласия от участников исследования.

Благодаря нашей первоначальной лабораторной работе, а также более ранним исследованиям, проведенным на гнотобиотических животных в Центре геномных наук Вашингтонского университета, мы предположили, что комбинация пищевых ингредиентов (нут, соевая мука, арахис и зеленый банан) с сухим молоком или без него будет полезной. стоит изучить влияние диеты на стимулирование размножения микробиоты, дискриминирующей рост, а также стоимость и устойчивость.

Участников исследования попросят ежедневно приходить в назначенный центр питания для лечебного питания, чтобы избежать проблемы совместного питания. Им будет предоставлен номер телефона, чтобы связаться с персоналом клиники, и один из сотрудников может посетить дом семьи для непосредственного наблюдения за нутритивной терапией с предварительной договоренностью, если это необходимо.

Анкеты по частоте приема пищи за пять дней будут заполняться при зачислении, до рандомизации и еженедельно в течение всего периода исследования.

Приготовление различных MDCF:

Приготовление продуктов прикорма для клинических исследований Pre-POC:

На основе совместимых комбинаций пищевых ингредиентов для прикорма, определенных в доклинических исследованиях, описанных выше, исследователи разработают и произведут 5 прототипов MDCF в лаборатории пищевой промышленности icddr,b в количествах, достаточных для клинических исследований (3 прототипа MDCF для исследования 1, 2 прототипа MDCF для Исследование 2 и квалифицированный MDCF из Исследования 2 для Исследования 3). Эти рецептуры будут соответствовать по энергетической плотности и содержанию микронутриентов готовым к употреблению прикорму (RUSF), используемому для MAM в Бангладеш и других странах, и будут отвечать всем другим местным требованиям к прикорму/добавке для детей в возрасте 12–18 месяцев. детей с МАМ и задержкой роста. Лаборатория пищевой промышленности icddr,b также будет производить текущий стандарт медицинской помощи RUSF с рисом и чечевицей, используемый для лечения этих детей, для использования в исследованиях 1 и 3.

Разработка продукта

1. Идентификация пищевых ингредиентов: местные пищевые ингредиенты, в том числе идентифицированные в доклинических исследованиях колебаний диеты (например, нут, соевая мука, арахис, сырой банан, соевое масло, сахар, с сухим молоком и без него) будут использоваться для производства прототипов MDCF.

   MDCF будут обогащены премиксом витаминов и минералов, чтобы удовлетворить потребности в микроэлементах для пищевых добавок в Бангладеш (см. ниже).

2. Эксперименты по разработке рецептов: Теоретическая формулировка компонентов MDCF должна быть сделана на основе линейного программирования для определения комбинаций ингредиентов, которые приведут к наиболее питательным рецептам. Энергетическая плотность MDCF составляет примерно 5 ккал/г, а распределение калорий должно составлять 45-50 процентов от жира и 8-12 процентов от белка. Основываясь на мнении экспертов и консенсусе внутри исследовательской группы, содержание микронутриентов должно покрывать 70 процентов потребностей детей без SAM в возрасте 12-18 месяцев. Эксперименты по разработке рецептур и подготовке образцов будут проводиться в лаборатории пищевой промышленности icddr,b в соответствии со стандартизированной производственной процедурой для контроля качества MDCF из каждой производственной партии и обеспечения отсутствия неожиданного загрязнения и потери питательных веществ во время обработки. Все ингредиенты будут очищены и отсортированы. Потенциальные рецепты должны производиться небольшими партиями после (приготовление / приготовление на пару / запекание в зависимости от каждого из ингредиентов) и путем смешивания всех ингредиентов в электрическом блендере. При необходимости корректируют консистенцию рецептов, варьируя количество сухих ингредиентов и соевого масла. Кроме того, сочетание минералов и витаминов должно быть скорректировано, если есть какой-либо неприятный вкус для добавления высокой дозы (доз) микронутриентов. В рецептуру необходимо добавить небольшое количество (1 процент) соевого лецитина для улучшения консистенции и предотвращения отделения масла.
3. Оценка органолептических свойств рецептов: Новые рецепты будут оцениваться по внешнему виду, вкусу, консистенции рациона и общей степени симпатии с использованием 7-балльной гедонистической шкалы. Более высокое значение, то есть 7, будет оцениваться как «очень нравится», а наименьшее значение 1 будет оцениваться как «больше всего не нравится».
4. Изучение вопросов безопасности пищевых продуктов и срока годности. Исследователи будут оценивать стабильность продукта, включая микробиологическое качество, чтобы получить ключевую информацию, необходимую для установления начальной даты «годен до», и оценить стабильность содержания витаминов и минералов и потенциал окисления. Стандартные микробиологические тесты (общее количество жизнеспособных микроорганизмов, дрожжи, плесень, колиформы, Escherichia coli, Bacillus cereus, стафилококки, Listeria monocytogenes, Cronobacter sakazaki) будут проводиться в лаборатории безопасности пищевых продуктов icddr,b.
5. Завершение работы над 5 прототипами MDCF для клинических испытаний до POC: на основании всех вышеупомянутых критериев наша команда исследователей выберет 5 MDCF для испытаний на приемлемость. исследователи также оценят стоимость/кг ингредиентов кандидатов MDCF.

Обучение полевого персонала Обучение будет предоставлено всем членам полевой группы по различным процедурам сбора образцов стула. Обучение будет проводиться основной группой инструкторов, а также исследователями исследования.

Антропометрия:

Возраст ребенка будет проверен по документам (свидетельство о рождении или карта прививок, если таковые имеются) или отчету опекуна о дате рождения ребенка. Длину измеряют с помощью инфантометра с точностью до 0,1 см (SECA, модель №. 4161721009, Гамбург, Германия). Массу тела измеряют с помощью весов, чувствительных к 2 г (SECA 7281321009, Гамбург, Германия). Z-показатели длины тела к возрасту (LAZ), массы тела к длине тела (WLZ) и массы тела к возрасту (WAZ) будут рассчитаны в соответствии со стандартами роста ВОЗ 11 Многоцентрового эталонного исследования роста (MGRS). Отек исследуют, нажимая на верхнюю часть обеих стоп в течение 3 секунд. Окружность середины плеча (MUAC) будет измеряться с помощью ленты TALC MUAC (Великобритания). Стандартизация измерительного оборудования: будет проводиться регулярная стандартизация весов для взвешивания ребенка и доски для измерения длины/длины с известным весом и длиной.

Анализы образцов плазмы и кала

Образцы плазмы, собранные в этом предварительном предварительном исследовании, будут отправлены в лабораторию Джеффри Гордона, расположенную в Центре геномных наук и системной биологии Вашингтонского университета в Сент-Луисе. Передовые методы, основанные на масс-спектроскопии и иммуноанализе, будут использоваться для получения новых знаний о роли незрелости кишечной микробиоты и влиянии попыток экстренного восстановления этой незрелости с помощью прототипов продуктов для прикорма, направленных на свинцовую микробиоту (MDCF), на биомаркеры и медиаторы здорового образа жизни. рост.

Этот первоначальный тест влияния MDCF на незрелость микробиоты и реакцию хозяина на диетическое вмешательство предоставит ключевые наборы данных, которые позволят рассчитать мощность для нашего запланированного исследования доказательства концепции в большей популяции. В текущем предварительном предварительном тестировании каждый ребенок в каждой группе из 12-15 участников исследования будет служить своим собственным контролем. Дополнительные сравнения будут проведены внутри и между четырьмя группами лечения (т. е. теми, кто принимает эталонный стандарт RUSF и один из трех различных составов MDCF).

Фекалии собирали еженедельно у каждого участника исследования в течение 8-недельного исследования, включая 2 недели до лечения, четыре недели во время лечения и две недели после прекращения лечения. Кроме того, образец крови объемом 2 мл будет получен непосредственно перед началом 4-недельного вмешательства MDCF и сразу после завершения 4-недельного вмешательства.

Целевая ультраэффективная жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (UPLC-MS) и газовая хроматография-масс-спектрометрия (GC-MS) будут использоваться для профилирования представляющих особый интерес аналитов в образцах плазмы и/или кала, включая желчные кислоты и короткоцепочечные жирные кислоты (SCFAs). ); маркеры митохондриальной функции (например, β-гидроксибутират, ацилкарнитины/ацил-КоА, промежуточные продукты цикла ТСА); аминокислоты в сыворотке плюс образцы кала [аминокислоты с разветвленной цепью, триптофан и метаболиты триптофана, связанные с ростом и воспалительным статусом, в том числе продуцируемые бактериальным метаболизмом триптофана (например, производные индолуксусной кислоты)].

Кроме того, ключевые медиаторы/биомаркеры линейного роста (например, гормон роста и ИФР-1), использования энергии (инсулин, лептин) и биологии кости [ИЛ-6, остеопротегерин, С-концевой пептид коллагена I типа (CTX , маркер активности остеокластов/резорбции кости), и амино-концевой пропептид проколлагена типа 1 (P1NP, маркер активности остеобластов/костного образования)], а системное воспаление (CRP, AGP) будет количественно определено с использованием установленного ELISA/ Анализы Люминекс.

Собранная информация будет использована для отбора образцов человеческих фекалий для трансплантации стерильным животным; эти животные, которых будут кормить донорами человеческой микробиоты, будут использоваться для дальнейшей характеристики механизмов, связывающих прототипы MDCF, кишечную микробиоту и физиологию/метаболизм хозяина. Кроме того, эти плазменные и фекальные биомаркеры будут использоваться для определения особенностей наших доклинических моделей, которые лучше всего коррелируют с ответами у детей; эти знания помогут разработать прототипы MDCF следующего поколения с превосходной эффективностью в отношении результатов роста.

Расчет размера выборки:

Первичным результатом этого исследования будет изменение показателя микробиоты для возраста Z (ΔMAZ) после 4 недель вмешательства. Наша предыдущая работа5 показала, что средний показатель MAZ у 18-месячных детей с MAM составлял -1,60+. 0,36 (SEM), в то время как для здоровых детей того же возраста среднее значение MAZ составило -0,52+0,22, с разницей между средними 1,08+0,41. Использование функции R power.t.test для парного t-теста (т.е. совмещение образцов от ребенка до и после вмешательства), при предполагаемом стандартном отклонении 1 и односторонней гипотезе, 15 детей в каждой группе позволят нам зафиксировать улучшение MAZ >0,7 с мощностью 80% и порогом значимости 0,05. Таким образом, исследователи ожидают, что у них будет достаточно возможностей, чтобы уверенно обнаружить изменение MAZ такой величины, которая отличала микробиоту здоровых детей от микробиоты детей с MAM в нашем предыдущем исследовании.

Анализ данных :

Анализ данных будет проводиться с использованием того же подхода, который использовался для расчета зрелости микробиоты и применения этих инструментов в предыдущем интервенционном исследовании RUTF, посвященном лечению детей с SAM на icddr,b5.

Первичным показателем результата в каждом исследовании является среднее вызванное лечением изменение показателя MAZ по сравнению с исходным уровнем для каждой группы исследования. Различия (95% ДИ) между группами лечения будут оцениваться с использованием однофакторного дисперсионного анализа с последующим HSD Тьюки или аналогичным апостериорным тестом (при необходимости). Прототип MDCF с наибольшей средней величиной эффекта в этих исследованиях до ПК и приемлемыми органолептическими свойствами будет выбран для последующего клинического испытания ПК для изучения клинических исходов у детей с МАМ после SAM.