Мезенхимальные стволовые клетки при остеохондрозе поясничного отдела позвоночника

Процедура аспирации костного мозга и культивирования клеток

Под рентгеноскопическим контролем коаксиальная игла будет продвигаться в пространство костного мозга. Внутреннюю часть удаляют и аспирируют 10-20 мл костного мозга.

МСК будут выделены и культивированы в Национальном центре регенеративной медицины Университета Кейс Вестерн Резерв / Лаборатории клеточной терапии онкологического центра Сейдмана с использованием стандартных операционных процедур, установленных в рамках текущего IND, как указано выше.

Процедура доставки/трансплантации МСК

Используя рентгеноскопический контроль, иглу продвигают к внешнему кольцу пораженного диска (дисков). Через коаксиальный анкер иглу продвигают к средней 1/3 диска и закрепляют в двух плоскостях (переднезадней и боковой).

В день инфузии МСК будут доставлены из лаборатории клеточной терапии в ИК-кабинет в сертифицированном сухом транспортном средстве. МСК размораживают на водяной бане при 37ºC и набирают в шприцы на 1 мл. Перед доставкой аликвоту инфузированного продукта проверяют на жизнеспособность (исключение трипанового синего). Жизнеспособность должна быть> 70% для трансплантации клеток. Первая группа лечения получит инъекцию 1-2 мл раствора MSC с концентрацией 2 x 106/мл, а группа лечения 2 получит 1-2 мл раствора MSC с концентрацией 4 x 106/мл. Обе группы лечения будут получать инъекции под прерывистым флюороскопическим наблюдением. Манометр будет использоваться для контроля давления в диске, особенно во время закачки MSC, поддерживая давление ниже 100 фунтов на квадратный дюйм. В частности, объем инъецируемого вещества будет определяться на основе трех динамических факторов: визуализации в реальном времени содержащегося объема контраста во время дискографии, psi, измеренного во время инъекции (< 100), и симптомов пациента (если боль пациента превышает исходный уровень, инъекция будет остановлена). ) - до объема 2мл заданной концентрации.

Аликвота настоянного продукта будет отправлена ​​в лабораторию микробиологии медицинского центра Университетской больницы Кливленда для проверки на микробиологическое загрязнение. В случае положительного микробного теста после введения клеточного продукта: 1) Главный исследователь и его/ее назначенное лицо будут уведомлены и уведомят участника, 2) Контаминант будет идентифицирован до уровня вида и определена чувствительность к антибиотикам, 3 ) Медицинский директор Лаборатории клеточной терапии и/или главный исследователь определят наилучший план действий в зависимости от клинической ситуации. Это может включать посев крови, профилактическое введение антибиотиков и повторное посев клеточного продукта. 4) Будет проведено расследование для определения источника загрязнения, и будут предприняты соответствующие корректирующие меры. Наконец, о нежелательном явлении будет сообщено IRB и FDA на основании соответствующих федеральных и институциональных требований к отчетности, а также утвержденного устава совета по мониторингу безопасности данных.

МРТ/Количественная МРТ процедура

Обычные изображения поясничного отдела позвоночника (сагиттальные и аксиальные Т1- и Т2-взвешенные изображения) будут получены с целью: Мониторинга потенциальных альтернативных эффектов клеток, включая образование остеофитов, а также любых неожиданных местных результатов. Кроме того, количественная МРТ, включая дактилоскопию. Магнитно-резонансная дактилоскопия (MRF) позволяет быстро и одновременно определить время релаксации T1 и T2. Последовательность MRF основана на изменении нескольких параметров получения MR [например, угол поворота (FA) и время повторения (TR)] псевдослучайным образом, так что уникальные эволюции сигнала, называемые «отпечатками пальцев», генерируются для каждой комбинации свойств ткани. Эти отпечатки пальцев сравниваются со словарем смоделированных отпечатков пальцев, сгенерированных для этой последовательности в процессе сопоставления с образцом. После совпадения шаблона значения T1 и T2, используемые для создания этой словарной записи, назначаются этому вокселу и используются для создания карт T1 и T2, которые идеально анатомически совпадают.

Для позвоночника предлагаемая последовательность MRF основана на многослойной быстрой визуализации с устойчивой прецессией (FISP). Сканирование будет выполняться как в сагиттальной, так и в аксиальной плоскостях с использованием многосрезового сканирования. Параметры сканирования следующие:

FOV: 400 мм, матрица 400 x 400 мм, TR/TE: 13-15 мс, разрешение в плоскости 1 x 1 мм, толщина среза 5 мм, угол поворота 5-75 градусов, время сбора данных ~ 39 секунд на срез, с ~ 4 минуты сканирования сагиттального изображения из 5 срезов. В аксиальной плоскости диск будет покрыт на каждом межпозвонковом уровне 4-5 поперечными срезами, и каждое аксиальное сканирование займет ~ 3 минуты.

Карты MRF будут генерироваться напрямую как изображения DICOM с использованием онлайн-реконструкции Gadgetron. Анализ изображения будет выполняться с использованием программного обеспечения для просмотра DICOM, чтобы нарисовать области интереса (ROI) на пульпозном ядре для прямого количественного определения времени релаксации. Существует возможность генерировать карты MRF из необработанных данных в Matlab, которые также можно использовать для рисования ROI для одновременного количественного определения времени релаксации T1 и T2.

Эти значения будут рассчитаны на МРТ до и после лечения.