Исследование биомаркеров PDR001 в сочетании с MCS110 при раке желудка

<Фон>

1. Текущее состояние вариантов лечения распространенного рака желудка.

2. Современное состояние развития иммунотерапии рака желудка

   • Использование иммунной системы для борьбы с раковыми клетками является одной из основных стратегий разработки новых лекарств практически для всех видов солидных опухолей, включая рак желудка.
   • При раке желудка, экспрессирующем PD L1, монотерапия антителом против PD1 (пембролизумаб) демонстрирует противоопухолевую эффективность. (Банг Ю.Дж. и др., 2015 г.)
   • Антитело против PDL1 (авелумаб), используемое в качестве поддерживающей терапии первой или второй линии при неселектированном раке желудка с биомаркером, также демонстрирует многообещающую противоопухолевую эффективность (Chung HC et al. ECCO/ESMO 2015, Oh DY et al. АСКО ГИ 2016)
   • Существует множество клинических испытаний с использованием иммуноонкологических (ИО) агентов в условиях 1-й линии, условиях 2-й линии, условиях 3-й линии и рефрактерных условиях. Используется несколько стратегий, то есть монотерапия внутрикостным введением в популяции, выбранной с помощью биомаркеров, комбинация внутрикостного введения + внутрикостное введение, внутрикостное введение + цитотоксическая химиотерапия и внутрикостное введение + другие таргетные агенты для повышения эффективности использования иммунной системы.
   • Тем не менее, мы не знаем точного биомаркера этих агентов IO при раке желудка. Не все пациенты получают пользу от этих агентов.

3. Значение микроокружения опухоли

   • С точки зрения иммунотерапии, для успешной иммунотерапии следует учитывать микроокружение опухоли (TME).
   • В TME существует множество компонентов, работающих на противоопухолевый иммунитет и внутриопухолевую иммуносупрессию. (Питт Дж. М. и др., 2016 г.)
   • Наиболее важный и непосредственный контроль над опухолевыми клетками осуществляют CD4+ Т-хелперы и CD8+ цитотоксические Т-лимфоциты (ЦТЛ). Ответ Th1, характеризующийся продукцией Т-клетками IFN-ɣ, TNF-α, IL-2, считается важным подмножеством для отторжения опухоли. Однако ответ Th1 также способствует ускользанию опухоли за счет IFN-α-опосредованной экспрессии молекул ингибиторной контрольной точки PDL1 или за счет отбора устойчивых клонов посредством иммуноредактирования опухоли.
   • Длительное воздействие опухолевого антигена индуцирует клетки Th1 и другие Т-клетки, у которых отсутствует типичный полифункциональный фенотип и которые экспрессируют ингибирующие рецепторы, такие как PDL1. ЛАГ-3 и ТИМ-3.
   • Другие субпопуляции CD4+T-клеток ингибируют противоопухолевый иммунный ответ. Примером могут служить CD4+Treg. Treg ингибируют противоопухолевую активность ЦТЛ и NK-клеток либо прямо, либо опосредованно через АПК. Помимо Treg, клетки Th2 также могут блокировать отторжение опухоли, индуцированное T-клетками.
   • TME также может непосредственно нарушать пролиферацию внутриопухолевых Т-клеток, действуя как еще один механизм уклонения опухоли от иммунного надзора. Примером может служить производство IDO в TME. IDO, продуцируемый миелоидными и раковыми клетками, катаболизирует триптофан с образованием кинуренина, который вместе способствует превращению наивных Т-клеток в Treg, ингибирует перепрограммирование Treg в потенциально противоопухолевые Th-клетки и увеличивает функции MDSC за счет усиления экспрессии IL-6.

4. Роль поляризованных макрофагов в ТМЭ

   • Макрофаги являются одним из основных компонентов TME, рекрутируются хемокинами, такими как M-CSF и лиганд 2 мотива хемокина C-C, и продуцируются в основном опухолевыми клетками (Wiktor-Jedrzejczak W, et al., 1996).
   • Макрофаги — это динамичные клетки, которые могут выполнять различные функциональные программы в ответ на сигналы микросреды (Мантовани А. и др., 2004).
   • Бактериальные стимулы, IFN-ɣ и GM-CSF способствуют провоспалительному M1-поляризованному фенотипу, тогда как M-CSF, IL-4 и IL-13 способствуют образованию b-позитивных фолатных рецепторов, продуцирующих IL-10, иммуносупрессивных, M2-поляризованных макрофаги. (Мюррей П.Дж. и др., 2011). Макрофаги M1 также усиливают ответы TH1, обеспечивая петлю положительной обратной связи в противоопухолевом ответе.
   • Макрофаги, которые инфильтрируют опухолевые ткани, также называемые опухолеассоциированными макрофагами (ТАМ), могут под действием цитокинов опухоли и Т-клеток приобретать такой поляризованный фенотип и играть ключевую роль в подрыве адаптивного иммунитета и воспалительных цепях. которые способствуют росту и прогрессированию опухоли. (Мантовани А. и др., 2002 г.)
   • Полностью поляризованные макрофаги M1 и M2 представляют собой крайности континуума функциональных состояний; в отличие от этого бинарного определения M1/M2, существует несколько других отдельных популяций, которые имеют общие черты обоих типов. Оялво Л.С. и соавт. 2009)
   • М2-поляризованные макрофаги способствуют прогрессированию опухоли и метастазированию путем активации цепей, которые регулируют рост опухоли, адаптивный иммунитет, образование стромы и ангиогенез, и могут использоваться в качестве прогностических индикаторов. (Балквилл Ф. и др., 2001 г.)

5. Роль поляризованных макрофагов при раке желудка

   • При раке желудка инфильтрация поляризованными ТАМ является независимым прогностическим фактором. (Чжан и др., 2015 г.)
   • Количество перитонеальных макрофагов с фенотипом М2 (CD68+CD163+ или CD68+CD204+) было достоверно выше у больных раком желудка с перитонеальной диссеминацией, чем у больных без перитонеальной диссеминации. (Ямагучи и др., 2015 г.)
   • Подтверждены более высокая экспрессия М2-связанной матричной РНК (ИЛ-10, VEGF-A, VEGF-С, ММП-1, амфирегулин), более низкая экспрессия М1-связанной матричной РНК (TNF-am CD80, CD86, IL-12p40). в ТАМ рака желудка.
   • Интересно, что совместное культивирование макрофагов с клетками рака желудка преобразовало фенотип M1 в фенотип M2. Более того, сосуществование клеток MKN45 с макрофагами М2 приводило к пролиферации раковых клеток и ускорению роста опухоли в модели ксенотрансплантата.
   • В нашей больнице мы исследовали прогностическое значение ТАМ при раке желудка с высоким MSI с использованием IHC. (Kim et al. 2015) CD68 и CD163 использовались в качестве маркеров для всех инфильтрирующих макрофагов и М2-поляризованных макрофагов соответственно. Плотность CD68+ или CD163+ ТАМ в четырех различных областях (эпителиальный и стромальный компартменты как центра опухоли, так и инвазивного фронта) была проанализирована в 143 случаях распространенного рака желудка с высоким MSI.

   В многомерном анализе выживаемости CD163+ ТАМ в четырех комбинированных областях, стромальных и эпителиальных компартментах как центра опухоли, так и инвазивного фронта были независимым прогностическим показателем при раке желудка с высоким MSI.

   • Также сообщалось, что поляризованный ТАМ CD163+ связан с повышенным ангиогенезом и экспрессией CXCL12 при раке желудка (Park et al. 2015).
   • Мы исследовали роль цитокинов и ангиогенных факторов при раке желудка (Ock et al., 2015, Ock et al., 2016). Высокий уровень M-CSF в сыворотке крови связан с плохой выживаемостью больных раком желудка, получавших стандартную химиотерапию 1-й линии.

6. Возможности комбинации ингибитора PD1 и ингибитора CSF-1

   • Блокада колониестимулирующего фактора-1 (CSF-1) ограничивает инфильтрацию макрофагов и улучшает реакцию рака молочной железы на химиотерапию. (Руффелл Б и др. Раковая клетка 2014)
   • В модели меланомы с мутацией BRAF ингибитор CSF1R (PLX3397) снижал рекрутирование CD11bC Gr1lo и CD11bC Gr1int M2-подобных макрофагов, но это сопровождалось накоплением клеток CD11bC Gr1hi. Экспрессия PDL1 на оставшихся миелоидных клетках потенциально ослабляла противоопухолевую эффективность ингибитора BRAF (PLX3397) и PLX4720 в комбинации, поскольку блокада оси PD1/PDL1 улучшала исход. (Нгиов С.Ф. и др., 2015 г.)
   • В модели рака поджелудочной железы ингибирование передачи сигнала рецептором миелоидного фактора роста CSF1R может функционально перепрограммировать ответы макрофагов, которые усиливают презентацию антигена и продуктивные противоопухолевые Т-клеточные ответы. (Zhu Y et al. 2014). Однако блокада CSF1R также активировала молекулы контрольных точек Т-клеток, включая PDL1 и CTLA4, тем самым ограничивая полезные терапевтические эффекты.
   • В этих случаях комбинация блокады CSF1R и ингибитора PD1 или CTLA4 значительно замедляла прогрессирование опухоли.

<Проект и план испытания> Каждый интервал дозирования будет составлять 3 недели.

1. Перед 1-й дозой MCS110 будет сделана 1-я биопсия свежей опухоли.
2. После 1-й дозы монотерапии MCS110 будет проведена 2-я биопсия свежей опухоли.
3. Затем будет инициировано объединение MCS110 с PDR001.
4. После 1-й дозы комбинации MCS110/PDR001 будет проведена 3-я биопсия свежей опухоли.
5. После этого комбинация MCS110/PDR001 будет доставляться пациентам до прогрессирования заболевания, непереносимой токсичности или отзыва согласия пациента.
6. Во время прогрессирования заболевания по возможности будет получена свежая опухолевая ткань (необязательно).
7. В каждый момент времени биопсии опухоли будет сопровождаться забор крови.
8. Оценка реакции опухоли будет проводиться каждые 2 цикла комбинированного лечения MCS110/PDR001.

Трансляционное исследование, которое будет выполнено. Описание изменений биомаркеров будет главной целью этого исследования биомаркеров. Таким образом, трансляционное исследование является основным интересом данного исследования.

Биомаркеры-кандидаты, как показано ниже, были взяты из клинического испытания MCS110Z2102. Тем не менее, точные элементы анализа будут выбраны в зависимости от количества опухолевой ткани и развития науки в течение периода исследования. Основное внимание будет уделено PDL1, TAM, TIL.