Забор проб периферической и воротной вен PDAC

Аденокарцинома протоков поджелудочной железы (PDAC) представляет неотложную медицинскую необходимость. Ежегодно в Соединенном Королевстве (Великобритания) диагностируется около 9000 новых случаев рака поджелудочной железы, и, по прогнозам, к 2030 году во всем мире он станет второй по частоте причиной смерти от рака. В настоящее время диагностический путь начинается с компьютерной томографии (КТ) поджелудочной железы, которая демонстрирует чувствительность 90% и специфичность 99% в диагностике рака поджелудочной железы. Магнитно-резонансная томография (МРТ) и позитронно-эмиссионная томография (ПЭТ) могут помочь с неоднозначными массами. Несмотря на высокую чувствительность и специфичность методов визуализации, окончательный диагноз обычно ставится только с помощью тонкоигольной аспирационной аспирации (ТАБ) под контролем эндоскопического ультразвука (ЭУЗИ). Во время этой процедуры в среднем требуется четыре «прохода» (биопсии), чтобы получить достаточное количество ткани для постановки диагноза.

Пациенты обычно имеют местно-распространенное или метастатическое заболевание, и им предлагается стандартная химиотерапия, которая оказывает лишь ограниченное влияние на общую выживаемость. Следовательно, 5-летняя общая выживаемость (ОВ) составляет всего 2% без существенного улучшения за последние 40 лет. Приблизительно только 20% пациентов имеют право на хирургическую резекцию с последующей адъювантной химиотерапией. Однако у 66% этих пациентов будет местный или отдаленный рецидив, что приведет к медиане общей выживаемости в диапазоне 28 месяцев. Таким образом, улучшенная стратификация пациентов для существующих методов лечения может помочь избежать ненужного чрезмерного лечения и связанных с ним побочных эффектов для улучшения качества жизни; и наоборот, это также может способствовать выбору более подходящего лечения.

Существенной причиной отсутствия прогресса в борьбе с метастатическим заболеванием является плохое понимание биологии и патофизиологии метастазирования. Изучение биологии метастазирования PDAC затруднено тем, что трудно получить ткань из первичного и метастатического очагов. Кроме того, серийные биопсии после прогрессирования во время лечения в значительной степени невозможны, что еще больше затрудняет понимание механизмов развития резистентности к лечению. Единственным легкодоступным переносимым кровью биомаркером, который в настоящее время используется в клинике, является сывороточный маркер углеводного антигена (СА) 19-9. Однако его клиническое использование ограничено, во-первых, тем фактом, что 5-10% населения имеют отрицательную группу крови по Льюису и не экспрессируют СА19-9. Кроме того, он повышен при незлокачественных заболеваниях поджелудочной железы и экстрапанкреатических заболеваниях. Наконец, CA19-9 не может предоставить информацию о генетическом ландшафте, который вызывает метастазирование PDAC.

Метастатическое распространение в основном гематогенное, при котором опухолевые клетки попадают в кровоток и метастазируют в основном в печень и легкие. Было показано, что такие опухолевые клетки перемещаются либо как отдельные циркулирующие опухолевые клетки (ЦОК), либо как группы клеток, называемые циркулирующими опухолевыми микроэмболами (ЦТМ). Гетерогенные CTM, состоящие из клеток, экспрессирующих либо эпителиальные, либо мезенхимальные маркеры, были выделены у пациентов с раком поджелудочной железы с использованием основанного на фильтрации метода, платформы выделения эпителиальных опухолевых клеток по размеру (ISET) в исследовании, проведенном Christie NHS Foundation Trust. Таким образом, выделение и характеристика ЦОК и ЦТМ даст новое представление об основных биологических зависимостях метастазирующих опухолевых клеток и, таким образом, может предоставить возможности для разработки более качественных и точных диагностических и прогностических анализов, а также возможности для лечения метастатического заболевания.

Обнаружение и изоляция ЦОК и ЦТМ ограничены тем фактом, что они представляют собой очень редкие явления по сравнению с другими клеточными элементами в кровотоке. С этой целью для преодоления этого препятствия были разработаны методы, использующие характеристики, которые отличают ЦОК от клеток крови. Эти рабочие процессы CTC обычно начинаются с обогащения CTC из образца крови с использованием либо поверхностных маркеров, присутствующих исключительно на CTC, либо их уникальных физических свойств, таких как размер, инерция, диэлектрический заряд и плотность. После обогащения ЦОК изолируют и могут быть просто подсчитаны, или они используются для более продвинутого последующего анализа, включая геномный, транскриптомный и протеомный анализ, а также применения in vivo в клеточных культурах и мышиных моделях с целью получения информации об их функциях. метастатические семена и развитие биомаркеров.

В клинических условиях ЦОК можно использовать для помощи в принятии решений. Действительно, подсчет ЦОК, обнаруженных платформой CellSearch, был одобрен FDA для прогнозирования и мониторинга метастатического рака молочной железы, колоректального рака и рака предстательной железы. Однако выделение и подсчет ЦОК при раке поджелудочной железы дали противоречивые результаты между исследованиями относительно того, можно ли использовать ЦОК в качестве прогностических биомаркеров. В этих исследованиях анализировали ЦОК, выделенные из периферической крови. Однако, поскольку основной венозный отток поджелудочной железы осуществляется через воротную вену в печень, можно предположить, что ЦОК могут фильтроваться и удаляться при прохождении через капилляры печени. Следовательно, чтобы определить биологическую и прогностическую роль ЦОК при аденокарциноме поджелудочной железы, крайне важно начать исследования с кровью, выделенной из воротной вены, чтобы избежать смешанных эффектов. Действительно, Bissolati et al. недавно сообщили об обнаружении ЦОК в крови воротной вены (PV), полученной во время операции. Путем одновременного получения образцов периферических вен это исследование подтвердило, что количество ЦОК было больше в портальной вене по сравнению с периферическими образцами, а также продемонстрировало значительную корреляцию между положительностью ЦОК в образцах воротной вены и частотой метастазов в печени. Однако достоверной корреляции с общей выживаемостью или безрецидивной выживаемостью (DFS) выявлено не было. Отбор проб PV был выполнен безопасно; в декабре 2015 г. Catenacci et al. сообщили о сборе крови PV у 18 пациентов с панкреатобилиарным раком с помощью EUS-FNA без осложнений во время процедуры. Ранее также сообщалось о пункции ЛВ для трансплантации островковых клеток у пациентов с сахарным диабетом 1 типа. Эта процедура имеет низкую заболеваемость, а также о потенциальных осложнениях, таких как тромбоз воротной вены, перипеченочное или внутрипаренхиматозное печеночное кровотечение и гемоторакс, сообщается с низкой частотой.

Во время EUS-FNA криволинейный эхоэндоскоп продвигают к дистальному отделу желудка или луковице двенадцатиперстной кишки, чтобы обеспечить окно доступа к ветви ЛВ. После подтверждения венозного кровотока с помощью допплеровского сигнала игла EUS-FNA 19-го калибра продвигается чреспеченочно в ветвь воротной вены. Когда игла находится в воротной вене, стилет извлекается и для аспирации крови применяется отсос с отрицательным давлением. Чреспеченочный доступ для доступа к ветви воротной вены является абсолютным требованием этой техники, чтобы свести к минимуму риск кровотечения. Место пункции контролируют под ЭУЗИ на наличие осложнений. Поскольку опухолевая ткань будет получена одновременно, потенциальным риском является попадание раковых клеток в кровоток при извлечении иглы из опухоли. Однако этот риск можно обойти, поскольку путь иглы в воротную вену позволяет избежать первичного образования.

Основной причиной неэффективности лекарств при PDAC является неспособность определить прогностические биомаркеры для ответа на лечение, что позволило бы обогащать подгруппы пациентов, которые, скорее всего, получат пользу от индивидуальной терапии. Это отличается от других основных типов рака, при которых успехи в разработке новых противоопухолевых препаратов и, как следствие, улучшение показателей выживаемости в основном связаны с использованием прогностических биомаркеров для выбора пациентов, которые получат различную пользу от конкретного терапевтического агента. Трастузумаб при раке молочной железы со сверхэкспрессией HER-2, цетуксимаб при колоректальном раке дикого типа KRAS, а также гефитиниб и эрлотиниб при немелкоклеточном раке легкого с мутацией рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) лучше всего иллюстрируют эту терапевтическую парадигму. Предоставляя большее количество CTCs и CTM, анализ образцов PV позволит изучить их биологию, а также разработать клеточные линии и модели CDX, которые позволят идентифицировать новые биомаркеры и мишени для новых методов лечения.

Принимая во внимание текущие пробелы в знаниях о биологии опухолей PDAC и отсутствие прогресса в терапии, существует острая клиническая необходимость в разработке исследовательской стратегии, которая позволит обнаружить и проверить новые биомаркеры у этой группы пациентов, а также информировать о биомаркерах. направленные клинические испытания, чтобы в конечном итоге улучшить выживаемость. Чтобы инициировать такую ​​исследовательскую стратегию, необходим систематический проспективный сбор и анализ образцов крови, полученных из периферической и воротной вен, для выявления переносимых кровью суррогатных опухолевых маркеров, которые позволят врачам получать соответствующую информацию для принятия персонализированных терапевтических решений. малоинвазивным способом.