PDAC 주변 및 문맥 샘플링

췌장관 선암종(PDAC)은 긴급한 의학적 필요성을 나타냅니다. 매년 영국에서 약 9000건의 새로운 췌장암 사례가 진단되며 전 세계적으로 2030년까지 암 관련 사망의 두 번째로 흔한 원인이 될 것으로 예상됩니다. 현재 진단 경로는 췌장암 진단에서 90%의 민감도와 99%의 특이도를 보여주는 췌장 프로토콜 컴퓨터 단층 촬영(CT) 스캔으로 시작합니다. 자기 공명 영상(MRI) 및 양전자 방출 단층 촬영(PET)은 모호한 덩어리를 도울 수 있습니다. 이미징 방식의 높은 민감도와 특이성에도 불구하고 최종 진단은 내시경 초음파(EUS) 유도 미세침 흡인(FNA)에 의해서만 일상적으로 얻어집니다. 이 절차 동안 진단을 위한 충분한 조직을 얻기 위해서는 평균 4회의 "통과"(생검)가 필요합니다.

환자는 일반적으로 국소 진행성 또는 전이성 질환을 앓고 있으며 전체 생존에 미치는 영향이 제한적인 표준 치료 화학 요법을 제공받습니다. 결과적으로 5년 전체 생존(OS)은 지난 40년 동안 유의미한 개선 없이 단 2%에 불과합니다. 약 20%의 환자만이 수술적 절제에 적격이며 보조 화학 요법이 뒤따릅니다. 그러나 이들 환자의 66%는 국소 재발 또는 원격 재발을 경험할 것이며 전체 생존 기간 중앙값은 28개월 범위입니다. 따라서 기존 치료에 대한 환자의 개선된 계층화는 삶의 질을 향상시키기 위해 불필요한 과잉 치료 및 관련 부작용을 피할 수 있습니다. 반대로 더 적절한 치료를 위한 선택을 가능하게 할 수도 있습니다.

전이성 질환을 다루는 데 진전이 없는 중요한 이유는 전이의 생물학 및 병태생리학에 대한 이해가 부족하기 때문입니다. PDAC 전이의 생물학을 연구하는 것은 원발성 및 전이성 부위에서 조직을 얻는 것이 어렵다는 사실에 의해 방해를 받습니다. 더욱이, 치료 중 진행에 따른 일련의 생검은 대체로 실현 가능하지 않아 치료 저항성 발생 메커니즘에 대한 통찰력을 더욱 방해합니다. 현재 임상에서 사용되는 쉽게 접근할 수 있는 유일한 혈액 매개 바이오마커는 혈청 마커 탄수화물 항원(CA) 19-9입니다. 그러나 그것의 임상적 사용은 인구의 5-10%가 루이스 혈액형 음성이고 CA19-9를 발현하지 않는다는 사실에 의해 첫째로 제한됩니다. 또한 비악성 췌장 및 췌장 외 질환에서 증가합니다. 마지막으로 CA19-9는 PDAC 전이를 유발하는 유전적 환경에 대한 정보를 제공할 수 없습니다.

전이성 전이는 주로 조혈성이므로 종양 세포가 순환계로 들어가 주로 간과 폐로 전이됩니다. 이러한 종양 세포는 단일 순환 종양 세포(CTC) 또는 순환 종양 미세색전(CTM)이라고 하는 세포 그룹으로 이동하는 것으로 나타났습니다. 상피 또는 중간엽 마커를 발현하는 세포로 구성된 이종 CTM은 Christie NHS Foundation Trust에서 수행된 연구에서 여과 기반 방법인 ISET(Isolation by Size of Epithelial Tumor 세포 플랫폼)를 사용하여 췌장암 환자로부터 분리되었습니다. 이와 같이 CTC 및 CTM의 분리 및 특성화는 전이성 종양 세포의 근본적인 생물학적 의존성에 대한 새로운 통찰력을 제공할 것이며 따라서 전이성 질환을 치료할 수 있는 기회뿐만 아니라 보다 정확하고 정확한 진단 및 예후 분석법을 개발할 수 있는 기회를 제공할 수 있습니다.

CTC 및 CTM의 검출 및 격리는 순환계의 다른 세포 요소에 비해 매우 드문 사건을 나타낸다는 사실에 의해 제한됩니다. 이를 위해 CTC를 혈액 세포와 구별하는 특성을 이용하는 방법이 이러한 장애를 극복하기 위해 개발되었습니다. 이러한 CTC 워크플로는 일반적으로 CTC에만 존재하는 표면 마커 또는 크기, 관성, 유전 전하 및 밀도와 같은 고유한 물리적 속성을 활용하여 혈액 샘플에서 CTC를 강화하는 것으로 시작합니다. 농축 후, CTC는 분리되고 간단히 열거될 수 있거나 게놈, 전사체 및 단백질체 분석뿐만 아니라 세포 배양 및 마우스 모델의 생체 내 응용을 포함한 고급 다운스트림 분석에 사용되어 기능에 대한 통찰력을 얻을 수 있습니다. 전이성 종자 및 바이오마커 개발.

임상 환경에서 CTC는 의사 결정을 지원하는 데 사용할 수 있습니다. 실제로, CellSearch 플랫폼에 의해 검출된 CTC의 열거는 전이성 유방암, 대장암 및 전립선암의 예후 및 모니터링을 위해 FDA 승인을 받았습니다. 그러나 췌장암에서 CTC의 분리 및 열거는 CTC가 예후 바이오마커로 사용될 수 있는지 여부에 대한 연구 간에 일관성 없는 결과를 제공했습니다. 이 연구는 말초 혈액에서 분리된 CTC를 분석했습니다. 그러나 췌장의 주요 정맥 배수는 간문맥을 통해 이루어지기 때문에 CTC가 간 모세혈관을 통과할 때 걸러지고 제거될 수 있다는 가설을 세울 수 있습니다. 따라서 췌장 선암종에서 CTC의 생물학적 및 예후적 역할을 정의하기 위해서는 교란 효과를 우회하기 위해 문맥에서 분리된 혈액으로 연구를 시작하는 것이 중요합니다. 실제로 수술 시 획득한 문맥(PV) 혈액에서 CTC의 검출은 최근 Bissolati 등에 의해 보고되었습니다. 본 연구에서는 말초정맥 검체를 동시에 채취하여 말초검체에 비해 문맥에서 CTC 수가 더 많은 것을 확인하였으며, 간문맥 검체에서 CTC 양성도와 간전이 빈도 사이에 유의한 상관관계가 있음을 확인하였다. 그러나 OS나 DFS(Disease Free Survival)와는 유의한 상관관계를 보이지 않았다. PV 샘플링이 안전하게 수행되었습니다. 2015년 12월 Catenacci et al. 시술 중 합병증 없이 EUS-FNA에 의해 췌장담도암 환자 18명으로부터 PV 혈액 수집을 보고했습니다. 제1형 진성 당뇨병 환자의 섬 세포 이식에 대해 PV 천자도 이전에 보고되었습니다. 이 시술은 이환율이 낮고 문맥 혈전증, 간주위 또는 실질내 간출혈 및 혈흉과 같은 잠재적인 합병증이 낮은 비율로 보고됩니다.

EUS-FNA 동안 곡선형 초음파 내시경을 말단 위 또는 십이지장 전구로 전진시켜 PV의 가지에 접근할 수 있는 창을 제공합니다. 도플러 신호로 정맥 흐름을 확인한 후 19게이지 EUS-FNA 바늘을 간문맥 가지로 경간 전진시킨다. 바늘이 문맥에 있는 상태에서 탐침을 제거하고 음압 흡인을 적용하여 혈액을 흡인합니다. 간문맥 가지 접근을 위한 간경유 접근법은 출혈의 위험을 최소화하기 위해 이 기술의 절대적인 요구 사항입니다. 천자 부위는 합병증에 대해 EUS로 모니터링됩니다. 동시에 종양 조직을 채취하므로 종양에서 바늘을 뽑을 때 암세포가 순환계로 유입될 위험이 있습니다. 그러나 바늘이 문맥으로 들어가는 경로가 일차 종괴를 피할 것이기 때문에 이 위험은 우회됩니다.

PDAC에서 약물 실패의 주된 이유는 개별 치료로부터 가장 혜택을 받을 가능성이 있는 환자 하위 그룹의 강화를 허용할 치료 반응에 대한 예측 바이오마커를 식별하지 못하기 때문입니다. 이것은 새로운 암 치료제 개발의 발전과 그에 따른 생존 결과의 개선이 주로 특정 치료제로부터 차별화된 혜택을 얻을 환자를 선택하기 위한 예측 바이오마커의 사용으로 인한 다른 주요 암 유형과 대조적입니다. HER-2를 과발현하는 유방암의 트라스투주맙, KRAS 야생형 결장직장암의 세툭시맙, 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 돌연변이 비소세포 폐암의 제피티닙 및 에를로티닙이 이러한 치료 패러다임을 가장 잘 보여줍니다. 더 많은 수의 CTC 및 CTM을 제공함으로써 PV 샘플 분석은 생물학적 연구뿐만 아니라 세포주 및 CDX 모델의 개발을 가능하게 하여 새로운 바이오마커 및 새로운 치료법의 표적을 식별할 수 있게 합니다.

PDAC의 종양 생물학에 대한 지식의 현재 격차와 치료법의 발전 부족을 고려할 때, 이 환자 그룹에서 새로운 바이오마커의 발견 및 검증을 허용하고 바이오마커- 궁극적으로 생존율을 향상시키기 위해 지시된 임상 시험. 이러한 연구 전략을 시작하려면 의사가 개인화된 치료 결정을 내리기 위한 관련 정보를 얻을 수 있도록 하는 혈액 매개 대리 종양 마커를 식별하기 위해 말초 및 문맥 순환에서 얻은 혈액 샘플의 체계적이고 전향적인 수집 및 분석이 필요합니다. 최소 침습적 방법으로.