Идентификация новых биомаркеров экологической энтеропатии у детей с использованием доказательного подхода (EE)

Название протокола:

Идентификация новых биомаркеров экологической энтеропатии у детей с использованием доказательного подхода

Фон

Недоедание в детском возрасте является серьезной проблемой в странах третьего мира. Одним из основных механизмов недоедания у детей является то, что потребление некачественной пищи и частые желудочно-кишечные (ЖКТ) инфекции повреждают слизистую оболочку кишечника у детей. Таким образом, кишечник не в состоянии поглощать доступные питательные вещества, а также не может функционировать в качестве эффективного барьера против транслокации желудочно-кишечной флоры в системный кровоток. Ограниченные энергетические ресурсы, доступные ребенку, отвлекаются на преодоление этих воспалительных проблем за счет нормального роста. Это расстройство кишечника (энтеропатия) называется экологической энтеропатией (ЭЭ). Поскольку считается, что ЭЭ является предшественником хронического недоедания, раннее выявление ЭЭ с использованием биомаркеров в крови, моче или стуле позволит нам на ранней стадии прогнозировать хроническое недоедание у детей. Целью данного исследования является выявление биомаркеров ЭЭ.

Цели

1. Тестировать новые биомаркеры-кандидаты ЭЭ в когорте детей в возрасте 6-15 месяцев в сельском районе Пакистана.
2. Изучить гистопатологические характеристики слизистой оболочки тонкой кишки у детей с умеренной и тяжелой недостаточностью питания в исследуемой когорте А и сопоставить результаты с биомаркерами, изученными в цели 1.
3. Изучить гистопатологические характеристики слизистой оболочки тонкой кишки у детей (хорошо питающихся или недоедающих), которым проводится эндоскопия UGI по любому клиническому показанию, например. извлечение инородного тела, оценка кровотечения из верхних отделов желудочно-кишечного тракта и т. д. (группа B) и корреляция результатов с биомаркерами крови, мочи и стула, изученными в цели 1.
4. Идентифицировать новые биомаркеры-кандидаты для ЭЭ путем изучения экспрессии мРНК в слизистой оболочке тонкой кишки у детей с ЭЭ и без нее для широкого спектра белков, участвующих в воспалении, гормональной дисфункции, структуре и функции иммунной системы и плотных соединений.

Методы

В когорте детей, за которыми уже наблюдали рост и инфекции с рождения в рамках исследования RESPAK в Матиари, Синд (группа A), исследователи будут собирать кровь, мочу и стул в возрасте 6 и 9 месяцев и тестировать на биомаркеры, включая GLP-2. , клаудин 3, CRP, Reg 1, профиль цитокинов сыворотки, профиль аминокислот плазмы, неоптерин и миелопероксидаза. Эти биомаркеры будут коррелировать с клиническими суррогатами ЭЭ, включая Z-оценку роста для возраста (HAZ) и Z-оценку массы тела для возраста (WAZ) у детей в возрасте 6, 9, 12 и 15 месяцев, а также изменение HAZ и WAZ. баллы между 6, 9, 12 и 15 месяцами. Исследователи выявят 20-30 детей в когорте А, страдающих от умеренной или тяжелой недостаточности питания и имеющих в анамнезе частую или продолжительную диарею в возрасте 10-11 месяцев, диагноз которых остается неизвестным, несмотря на всестороннее неинвазивное обследование и которые не реагируют на первую линию нутритивных вмешательств. Этим детям будет проведена эндоскопия верхних отделов желудочно-кишечного тракта в Университете Ага Хана в соответствии с рекомендациями Американского общества гастроэнтерологов (ASGE) по оценке детей с FTT и связанной с ними частой или продолжительной диареей (1). Биоптаты двенадцатиперстной кишки, полученные с помощью эндоскопии, будут использоваться для окрашивания H&E (стандарт лечения для диагностики целиакии, других воспалительных и аутоиммунных причин энтеропатии), а также для исследования ЭЭ, включая изучение воспаления, гормональной дисфункции и дисфункции плотных соединений в AKU, Чикагский университет и Университет Вирджинии.

В отдельной группе детей (группа B) в возрасте от 6 до 24 месяцев, которые обращаются к нашим сотрудничающим детским гастроэнтерологам в Университете Ага Хана или в Детской больнице Лахора для эндоскопии UGI по любому соответствующему показанию, дополнительных биопсий двенадцатиперстной кишки и образцов крови / мочи / кала. будут собраны после информированного согласия. Обработка этих детей будет такой, как описано выше.

РНК будет извлечена из всего полученного образца биопсии, и будут идентифицированы мишени мРНК, которые по-разному экспрессируются у детей с ЭЭ и без ЭЭ, поэтому их нижележащие белки можно будет идентифицировать и протестировать в качестве биомаркеров-кандидатов на ЭЭ в будущем.

Побочные эффекты

Получение крови, мочи и кала у ребенка в возрасте 6 и 9 месяцев вызовет дискомфорт у ребенка, хотя какие-либо серьезные побочные эффекты в результате этих процедур маловероятны. Для субъектов, не отвечающих на пищевую реабилитацию, и у которых первая линия диагностического обследования не показывает результатов, будет предложено расширенное обследование в соответствии с рекомендациями ASGE, которые в отдельных случаях включают эндоскопию UGI. Несмотря на редкость, риски эндоскопии включают осложнения, связанные с общей анестезией, перфорацию, кровотечение и инфекцию.

Этические вопросы

Помимо проблемы вторжения в частную жизнь и сбора крови, мочи и стула, основной этической проблемой в когорте А является проведение эндоскопии UGI у некоторых детей, у которых причина недоедания неясна, несмотря на первоочередные исследования и вмешательства. Исследователи считают, что эти эндоскопии в интересах этих детей, поскольку ASGE рекомендует их как часть обследования детей, которые плохо развиваются и имеют желудочно-кишечные симптомы, такие как хроническая или рецидивирующая диарея. Эндоскопия может помочь выявить поддающиеся лечению воспалительные, инфекционные или аутоиммунные причины задержки развития у этих детей.

Следователи собирают дополнительные биопсии для исследования во время эндоскопии. Риски, связанные с эндоскопией, в первую очередь связаны с анестезией и процедурой. Взятие дополнительных биопсий относительно безопасно, так как слизистая ЖКТ является одним из наиболее быстро заживающих органов тела, и практически не остается никаких остаточных признаков биопсии через 24 часа после процедуры. Эндоскопию в AKU и Детской больнице будут проводить опытные детские гастроэнтерологи. Тем не менее, следователи хорошо оснащены, чтобы справиться с любыми осложнениями, которые могут возникнуть.

В когорте B исследователи берут дополнительные биопсии у детей, которые уже проходят эндоскопию UGI по соответствующему показанию, не связанному с этим исследованием. Единственный дополнительный риск для субъектов в когорте B связан с дополнительными биопсиями, которые должны быть минимальными, как объяснялось выше.