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哮喘嗜酸性粒细胞亚型的非编码 RNA 分析

2020年9月7日 更新者:Kestutis Malakauskas、Lithuanian University of Health Sciences

富含嗜酸性粒细胞的慢性气道炎症是哮喘的一个重要特征。 气道和血液嗜酸性粒细胞增多与哮喘发作率增加和更强烈的治疗有关。

最近,揭示了两种不同嗜酸性粒细胞亚型的存在——肺驻留嗜酸性粒细胞 (rEOS),其独立成熟为白细胞介素 (IL) 5,其主要功能是维持组织稳态,以及炎症性嗜酸性粒细胞 (iEOS),其在 IL 中成熟-5依赖性方式,主要参与免疫反应。 嗜酸性粒细胞对哮喘气道重塑的影响不仅取决于活性,还取决于它们在肺部的存活数量。 血液 iEOS 主要在过敏原等环境刺激后渗入气道,并与支气管分泌物一起离开气道。 然而,rEOS 在其整个生命周期内都存在于肺组织中,调节局部免疫。 与健康对照组相比,哮喘患者的血液 rEOS 和 iEOS 比率发生了变化。 已知过敏性哮喘中嗜酸性粒细胞的主要亚型是iEOS,而rEOS是重症嗜酸性哮喘患者的基本亚型,而且它们的粘附性和存活性也不同。 不同的生物学特性允许推测它们在哮喘中的不同功能,但是,信息仍然很少。 哮喘患者嗜酸性粒细胞中不同表达的 microRNA (miRNA) 谱的数据表明,嗜酸性粒细胞亚型在非编码 RNA (ncRNA) 中可能不同 - microRNA (miRNA)、piwi 相互作用 RNA (piRNA) 和长链非编码 RNA (IncRNA) ) 可以描述它们在哮喘发病机制中的作用并作为生物标志物来辨别哮喘表型的概况。

研究概览

地位

招聘中

条件

干预/治疗

详细说明

哮喘无法治愈,只有均衡的治疗才能控制疾病的进程和严重程度。 大多数临床症状起因于异常的慢性气道炎症,主要是嗜酸性粒细胞增多。 嗜酸性粒细胞是终末分化的粒细胞,通过产生和释放多种趋化因子、细胞因子、脂质介质和其他生长因子,积极促进先天性和适应性炎症级联反应。 IL-5 在骨髓中嗜酸性粒细胞的成熟、它们的募集和炎症部位的激活中起着重要作用。

历史上,嗜酸性粒细胞被描述为宿主防御的关键参与者,包括寄生虫、病毒、真菌或细菌,赋予它们破坏性的炎症细胞标签。 然而,很明显,稳态嗜酸性粒细胞也可以促进免疫调节和组织稳态。 研究表明,嗜酸性粒细胞有不同的亚型——免疫调节性肺驻留嗜酸性粒细胞 (rEOS) 和炎症性嗜酸性粒细胞 (iEOS),参与免疫反应。 具有不同功能的不同嗜酸性粒细胞亚型决定了单独的治疗。 仍然只有少数研究描述了肺部或血液中不同的嗜酸性粒细胞亚型。 这是一个新的有前途的研究领域的开端,可以更好地个体化治疗嗜酸性粒细胞性哮喘,此外,还可以治疗其他嗜酸性粒细胞性疾病。

外周血嗜酸性粒细胞研究与组织嗜酸性粒细胞研究充分相关,因为血液嗜酸性粒细胞以完全成熟的形式释放到血流中。 此外,外周血研究可以提供额外的信息,并可能在迁移到气道之前在早期阶段预防嗜酸性粒细胞的影响。 此外,根据人血嗜酸性粒细胞的数据,证实了外周血中组织常驻嗜酸性粒细胞的存在,并初步研究了嗜酸性粒细胞亚型表面标志物。

有关哮喘患者嗜酸性粒细胞中不同表达的 microRNA (miRNA) 谱的数据表明,嗜酸性粒细胞亚型在非编码 RNA (ncRNA) - microRNA (miRNA)、piwi 相互作用 RNA (piRNA) 和长链非编码 RNA 中可能不同。 IncRNA)概况,可以描述它们在哮喘发病机制中的作用,并作为生物标志物来辨别哮喘表型。

研究人员计划通过分析非编码 RNA (ncRNA) - rEOS 和 iEOS 的 miRNA、piRNA 和 lncRNA 图谱以及血浆中选定的 ncRNA 特征来评估其诊断价值,从而扩大研究范围。 此外,对嗜酸性粒细胞衍生的外泌体中 ncRNA 的额外研究将提供有关嗜酸性粒细胞亚型可能通过分泌的 ncRNA 对气道重塑产生影响的重要数据。 ncRNA 是基因转录的关键调节因子。 然而,有证据表明它们在哮喘期间嗜酸性粒细胞失调。 它将提供有关在健康和哮喘期间调节不同嗜酸性粒细胞亚型活性的分子信号通路的重要信息,并提供有关控制它们的可能新治疗靶点的基本信息。 此外,研究人员将研究 rEOS 和 iEOS 之间的生物学差异,包括表面整合素和嗜酸性粒细胞生成素受体表达、粘附特性、存活性、合成活性氧和细胞凋亡,以及它们对肺结构细胞生理活动的影响,如增殖、凋亡、迁移、收缩力和蛋白质的产生,并将其与分子信号通路联系起来,由不同表达的 ncRNA 调节。 ncRNA 可以储存在嗜酸性粒细胞外泌体中,并向周围环境表达。 嗜酸性粒细胞来源的外泌体中有关 ncRNA 的信息将通过影响其他细胞来证明它们的功能,尤其是在迁移到气道后。 此外,ncRNA 稳定且对血液 RNase 具有抗性,并且在多种病理学中差异表达。 研究人员认为,血液中 ncRNA 水平的改变可以作为哮喘的一种可能的新诊断生物标志物。

研究类型

介入性

注册 (预期的)

80

阶段

  • 不适用

联系人和位置

本节提供了进行研究的人员的详细联系信息,以及有关进行该研究的地点的信息。

学习联系方式

研究联系人备份

学习地点

      • Kaunas、立陶宛、LT-50009
        • 招聘中
        • Lithuanian University of Health Sciences, Pulmonology Department
        • 接触:

参与标准

研究人员寻找符合特定描述的人,称为资格标准。这些标准的一些例子是一个人的一般健康状况或先前的治疗。

资格标准

适合学习的年龄

14年 至 66年 (成人、年长者)

接受健康志愿者

不

有资格学习的性别

全部

描述

纳入标准:

  • 18-70岁的男女;
  • 过敏性哮喘和对屋尘螨 (D. pteronyssinus) 过敏原致敏,获批: 1) 超过一年的病史和症状; 2) 屋尘螨皮肤点刺试验阳性(阳性风团直径大于阴性对照3mm以上); 3) 乙酰甲胆碱支气管激发试验阳性或有记录的可逆性支气管阻塞;
  • 严重的嗜酸性粒细胞性哮喘;
  • 妊娠试验阴性的绝经前妇女;
  • 无过敏及其他慢性呼吸道疾病的健康受试者(对照组);
  • 给予知情书面同意的参与者。

排除标准:

  • 研究前 1 个月哮喘加重;
  • 具有临床意义的永久性过敏症状(例如 猫或狗皮屑引起的过敏);
  • 进行过敏性皮肤试验和/或支气管激发试验的禁忌症: 1) 研究前 1 个月有活动性气道感染; 2) 使用的药物:研究前1个月吸入糖皮质激素,研究前7天服用抗组胺药; 3) 研究前 12 小时使用短效 β2 激动剂; 4) 研究前 2 天使用长效 β2 激动剂; 5) 白三烯受体拮抗剂前 14 天;
  • 肾上腺素的禁忌症;
  • 其他重大的精神和/或内部疾病和状况,根据研究人员的意见可以作为排除标准;
  • 酒精或麻醉品滥用;
  • 怀孕;
  • 哺乳。

学习计划

本节提供研究计划的详细信息,包括研究的设计方式和研究的衡量标准。

研究是如何设计的?

设计细节

  • 主要用途:基础科学
  • 分配:随机化
  • 介入模型:并行分配
  • 屏蔽:无(打开标签)

武器和干预

参与者组/臂
干预/治疗
实验性的:过敏性哮喘患者
过敏性哮喘患者和对屋尘螨 (D. pteronyssinus) 过敏原敏感。
进行过敏原支气管激发试验需要屋尘螨过敏原。
从一个人的身体中抽取的用于医疗的一定量的血液。
支气管挑战是用 D. pteronyssinus 过敏原进行的。 过敏原攻击后嗜酸性粒细胞活性差异的测量。
实验性的:重度嗜酸粒细胞性哮喘患者
从一个人的身体中抽取的用于医疗的一定量的血液。
有源比较器:健康受试者作为对照组
无过敏和其他慢性呼吸道疾病的健康受试者(对照组)。
从一个人的身体中抽取的用于医疗的一定量的血液。

研究衡量的是什么?

主要结果指标

结果测量
措施说明
大体时间
嗜酸性粒细胞亚型之间 ncRNA 表达的倍数变化
大体时间:从 6 到 12 个月
在重度和非重度嗜酸性粒细胞哮喘患者和健康受试者中验证了 rEOS 和 iEOS 的 ncRNA 表达。
从 6 到 12 个月
rEOS 和 iEOS 衍生的外泌体中的 ncRNA 水平
大体时间:从 12 到 18 个月
所有研究组的 rEOS 和 iEOS 衍生的外泌体中定性和定量选择的 ncRNA 水平。
从 12 到 18 个月

次要结果测量

结果测量
措施说明
大体时间
不同嗜酸性粒细胞亚型的 ncRNA 图谱的折叠变化
大体时间:从 6 到 12 个月
严重和非严重嗜酸性粒细胞哮喘患者和健康受试者中不同嗜酸性粒细胞亚型的未经验证的完整 ncRNA 图谱。
从 6 到 12 个月
REOS 和 iEOS 表面整合素表达的倍数变化
大体时间:从 6 到 12 个月
选定的外膜整合素在嗜酸性粒细胞亚型中的基因表达。
从 6 到 12 个月
REOS 和 iEOS 嗜酸性粒细胞生成素受体表达的倍数变化
大体时间:从 6 到 12 个月
白细胞介素 (IL)-5、IL-3 和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子在嗜酸性粒细胞亚型中的基因表达。
从 6 到 12 个月
IEOS 和 rEOS 粘附的效率
大体时间:从 6 到 12 个月
比较研究组与气道平滑肌 (ASM) 细胞或肺成纤维细胞的联合细胞培养物中稳定粘附的 iEOS 和 rEOS 数量的差异。
从 6 到 12 个月
iEOS 和 rEOS 生存差异
大体时间:从 6 到 12 个月
在与 ASM 细胞或肺成纤维细胞联合培养适当时间后,活的 iEOS 和 rEOS 数量。
从 6 到 12 个月
IEOS 和 rEOS 合成活性氧的数量
大体时间:从 6 到 12 个月
IEOS 和 rEOS 在单独或与 ASM 细胞或肺成纤维细胞孵育适当时间后合成的活性氧物质数量之间的相对差异。
从 6 到 12 个月
凋亡 iEOS 和 rEOS 数
大体时间:从 6 到 12 个月
在与 ASM 细胞或肺成纤维细胞联合培养适当时间后,凋亡的 iEOS 和 rEOS 的数量。
从 6 到 12 个月
IEOS 和 rEOS 的浓度在研究对象的体液中产生了蛋白质。
大体时间:从 6 到 12 个月
选择的 iEOS 和 rEOS 蛋白质浓度,在研究对象的体液中测量,表示为相应量的液体样品中的蛋白质量。
从 6 到 12 个月
iEOS 和 rEOS 对气道平滑肌细胞或肺成纤维细胞增殖的影响
大体时间:从 6 到 12 个月
在存在或不存在嗜酸性粒细胞亚型的情况下,多次重复增殖后 ASM 细胞或肺成纤维细胞的数量。
从 6 到 12 个月
iEOS 和 rEOS 对凋亡 ASM 细胞和肺成纤维细胞数量的影响
大体时间:从 6 到 12 个月
在与 iEOS 和 rEOS 联合培养适当时间后,凋亡的 ASM 细胞和肺成纤维细胞的数量。
从 6 到 12 个月
iEOS 和 rEOS 对 ASM 细胞迁移的影响。
大体时间:从 6 到 12 个月
在与 iEOS 和 rEOS 联合培养适当时间后迁移的 ASM 细胞数
从 6 到 12 个月
iEOS 和 rEOS 对肺成纤维细胞迁移的影响
大体时间:从 6 到 12 个月
在与 iEOS 和 rEOS 联合培养适当时间后迁移的肺成纤维细胞数量
从 6 到 12 个月
iEOS 和 rEOS 对 ASM 细胞收缩力的影响
大体时间:从 6 到 12 个月
与未与嗜酸性粒细胞孵育的对照 ASM 细胞相比,ASM 细胞在与 iEOS 和 rEOS 联合培养适当时间后收缩胶原凝胶的能力的相对效率,表示为减少的倾倒凝胶大小百分比。
从 6 到 12 个月
iEOS 和 rEOS 对肺成纤维细胞收缩力的影响
大体时间:从 6 到 12 个月
在与 iEOS 和 rEOS 联合培养适当时间后,肺成纤维细胞收缩胶原凝胶的能力的相对效率。 与未与嗜酸性粒细胞孵育的对照肺成纤维细胞相比,表示为减少的倾倒凝胶大小百分比。
从 6 到 12 个月
iEOS和rEOS对ASM细胞和肺成纤维细胞蛋白表达倍数变化的影响;
大体时间:从 6 到 12 个月
改变选定的 ASM 细胞和肺成纤维细胞蛋白表达,在与 iEOS 和 rEOS 孵育后,表示为与对照细胞相比的倍数变化,没有与嗜酸性粒细胞孵育
从 6 到 12 个月
iEOS和rEOS对ASM细胞和肺成纤维细胞蛋白基因表达倍数变化的影响;
大体时间:从 6 到 12 个月
改变选定的 ASM 细胞和肺成纤维细胞蛋白基因表达,在与 iEOS 和 rEOS 孵育后,表示为与对照细胞相比的倍数变化,未与嗜酸性粒细胞孵育
从 6 到 12 个月

合作者和调查者

在这里您可以找到参与这项研究的人员和组织。

赞助

出版物和有用的链接

负责输入研究信息的人员自愿提供这些出版物。这些可能与研究有关。

一般刊物

研究记录日期

这些日期跟踪向 ClinicalTrials.gov 提交研究记录和摘要结果的进度。研究记录和报告的结果由国家医学图书馆 (NLM) 审查,以确保它们在发布到公共网站之前符合特定的质量控制标准。

研究主要日期

学习开始 (预期的)

2020年10月1日

初级完成 (预期的)

2023年10月1日

研究完成 (预期的)

2023年10月1日

研究注册日期

首次提交

2020年8月25日

首先提交符合 QC 标准的

2020年9月7日

首次发布 (实际的)

2020年9月9日

研究记录更新

最后更新发布 (实际的)

2020年9月9日

上次提交的符合 QC 标准的更新

2020年9月7日

最后验证

2020年8月1日

更多信息

与本研究相关的术语

其他研究编号

  • LAB-1/2020

计划个人参与者数据 (IPD)

计划共享个人参与者数据 (IPD)?

不

药物和器械信息、研究文件

研究美国 FDA 监管的药品

不

研究美国 FDA 监管的设备产品

不

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