胰岛移植中的 cePolyTregs (cePolyTregs)

1 型糖尿病 (T1DM) 的发生是由于位于人类胰腺中的胰岛素生成细胞遭到破坏而导致胰岛素生成减少。 患有 T1DM 的患者会因血糖水平不受控制而出现大量并发症。 胰岛素给药是一种挽救生命的治疗方法，但无法复制人体自身产生胰岛素的细胞所提供的动态和响应控制。 胰岛素治疗还会增加严重低血糖发作的风险，这会严重影响这些患者的生活质量。 此外，这些疗法无法完全预防这种破坏性疾病的长期并发症。

将产生胰岛素的细胞移植到肝脏（胰岛移植）已被证明对那些血糖不佳的人来说是一种有效且有价值的治疗方法。 然而，胰岛移植目前受到胰腺器官捐献者数量和抗排斥药物等终身服药需求的限制。

Treg 是 CD4+ T 细胞的一个子集，其功能是维持免疫系统稳态并保持对自身抗原的耐受性。 Tregs 在维持免疫耐受方面的功能可以通过 Treg 细胞疗法来治疗各种免疫疾病。 Tregs 有能力迁移到炎症部位，并有超过 30 种不同的免疫调节机制来应对不同的炎症状况。 Treg 效应器功能似乎通过旁观者抑制起作用，通过细胞间接触和抑制性细胞因子产生的组合来调节局部炎症反应。 最后，Tregs 已被证明在组织修复中发挥关键作用。 2003 年转录因子 FOXP3 的发现代表了 Treg 表征的重大进展。 FOXP3 对于 Treg 细胞谱系规范至关重要，并直接有助于 Treg 功能。 然而，FOXP3 是一种细胞内蛋白，不能用于分离 Tregs 用于治疗用途。 因此，分离 Tregs 的方法必须依赖于细胞表面标记的使用。 发现 CD127 和 FOXP3 表达之间的反比关系导致使用 CD4+CD127lo/-CD25+ 细胞表面表型来高产选择在体外具有高度抑制性的高纯度人 Tregs 群体，从而提供最佳来源用于过继免疫治疗的 FOXP3+ Tregs。

冷冻保存的 PolyTregs (cePolyTregs) 是一种用于同种异体或自体应用的新型细胞疗法，迄今为止已被研究用于治疗与 SARS-CoV-2 感染相关的急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)。 以前的类似产品 PolyTregs 使用类似的方法制备，只是最终配方不同，被认为在体外和体内表现相似。 cePolyTregs 的临床经验仍然有限；然而，类似的 PolyTregs 已被广泛用作各种临床条件下的同种异体和自体产品，包括移植物抗宿主病 (GvHD)、1 型糖尿病、肾移植、系统性红斑狼疮 (SLE) 和寻常型天疱疮 (PV) ). 这些使用自体 PolyTregs 的经验为 cePolyTregs 提供了宝贵的见解。

我们在接受胰岛移植的受试者的临床试验中使用了类似的 PolyTregs 产品（胰岛移植研究中的 PolyTregs）。 2018 年 3 月至 2021 年 3 月期间，共有 16 名参与者接受了阿尔伯塔大学的研究资格筛选。 参与者被分成两组。 队列 1 使用阿仑单抗诱导疗法、依那西普和阿那白滞素抗炎疗法接受胰岛移植。 队列 2 使用抗胸腺细胞球蛋白 (ATG) 诱导疗法、依那西普和阿那白滞素抗炎疗法接受胰岛移植。 队列 1 和队列 2 的治疗组分别在胰岛移植后 6 周和 2 周接受 PolyTregs 输注。 两个队列中的所有参与者均维持低剂量他克莫司 (Tac) 和西罗莫司 (SRL) 免疫抑制，并在 PolyTregs 输注后随访一年，以评估 PolyTregs 治疗的安全性和初步疗效。 在本协议制定时，3 名参与者接受了 PolyTregs 输注。 所有报告的 AE 的严重程度均为轻度至中度，已解决，并且被确定为不太可能或与 PolyTregs 输注无关。 虽然可行，但该试验受到围绕 PolyTregs 制造的物流问题以及已故供体胰岛移植时间的不可预测性的限制。

冷冻保存的 PolyTregs (cePolyTregs) 为了促进围绕 PolyTregs 制造物流和胰岛移植时间的可行性，将使用 cePolyTregs。 cePolyTregs 在配制后冷冻保存，并在输注前立即解冻。 cePolyTregs 具有不同的配方，但其特性和特征类似于冷冻保存前后的 PolyTregs。 cePolyTregs 将使用合格的托运人在受控条件下运送到输液点，并将冷冻保存直到输液前。 cePolyTregs 将首先在保持在 34ºC - 38ºC 的水浴中解冻，并在给药前保存在冰上。 解冻的 cePolyTregs 产品将按照既定的标准操作程序通过外周静脉内（ IV ）线进行管理，并用盐水灌注。 该产品将通过外周 IV 线通过手动注射器推入约 10 分钟至 30 分钟，具体取决于体积。

在施用解冻的 cePolyTregs 产品后，将用生理盐水冲洗产品袋、管道和外周 IV 线，以确保输注完整剂量。 如果受试者对输液有过敏反应、严重的低血压危象或任何其他反应，输液期间将提供紧急医疗设备（即，急救手推车）。 生命体征（体温、呼吸率、脉搏和血压）将在输注前后采集，然后每 15 分钟（+/- 3 分钟）一次，持续至少一小时，直到这些体征令人满意且稳定。 输注后将维持静脉内线路，受试者将被要求留在临床研究单位 24 小时。 生命体征将在前四个小时内每小时（+/- 3 分钟）监测一次，此后每四个小时（+/- 3 分钟）监测一次。

根据现有的临床前和临床发现，我们假设 cePolyTregs 可以防止移植胰岛的自身排斥和同种异体排斥，从而随着时间的推移改善 T1DM 成人的胰岛素非依赖性耐久性和 C 肽功能。