cePolyTregs saarensiirrossa (cePolyTregs)

Tyypin 1 diabetes mellitus (T1DM) johtuu insuliinintuotannon menetyksestä, joka johtuu ihmisen haimassa olevien insuliinia tuottavien solujen tuhoutumisesta. T1DM-potilaat kokevat huomattavia komplikaatioita hallitsemattomista verensokeritasoista. Insuliinin antaminen on hengenpelastava hoito, mutta se ei toista ihmisen omien insuliinia tuottavien solujen tarjoamaa dynaamista ja reagoivaa kontrollia. Insuliinihoidot voivat myös lisätä vakavien matalan glukoosipitoisuuksien riskiä, ​​mikä vaikuttaa merkittävästi näiden potilaiden elämänlaatuun. Lisäksi nämä hoidot eivät pysty täysin estämään tämän tuhoisan taudin pitkäaikaisia ​​komplikaatioita.

Insuliinia tuottavan solun siirto maksaan (Islet Transplantation) on osoittautunut tehokkaaksi ja arvokkaaksi hoidoksi niille, joilla on huono verensokeri. Saaristosiirtoa rajoittavat kuitenkin tällä hetkellä haiman elinten luovuttajien määrä ja elinikäisten lääkitystarpeiden, kuten hylkimislääkkeiden, tarve.

Tregit ovat CD4+ T-solujen alajoukko, joka ylläpitää immuunijärjestelmän homeostaasia ja säilyttää toleranssin oma-antigeeneille. Tregien tehtävää immuunitoleranssin ylläpitäjänä voidaan valjastaa Treg-soluterapialla erilaisten immunologisten sairauksien hoitoon. Tregeillä on kyky siirtyä tulehduskohtiin, ja niillä on yli 30 erilaista immuunisäätelymekanismia reagoimaan erilaisiin tulehdustiloihin. Treg-efektoritoiminto näyttää toimivan sivustakatsojan suppressiolla, säätelemällä paikallisia tulehdusvasteita solu-solukontaktin ja tukahduttavan sytokiinituotannon yhdistelmällä. Lopuksi, Tregien on osoitettu olevan kriittinen rooli kudosten korjaamisessa. Transkriptiotekijän FOXP3 löytäminen vuonna 2003 edusti suurta edistystä Tregin karakterisoinnissa. FOXP3 on välttämätön Treg-solulinjan määrittämiselle ja myötävaikuttaa suoraan Treg-toimintaan. FOXP3 on kuitenkin solunsisäinen proteiini, jota ei voida käyttää Tregien eristämiseen terapeuttista käyttöä varten. Siten Tregien eristämismenetelmien on perustuttava solun pintamarkkereiden käyttöön. CD127:n ja FOXP3:n ilmentymisen välisen käänteisen suhteen löytäminen johti CD4+CD127lo/-CD25+-solupinnan fenotyypin käyttöön erittäin puhtaan ihmisen Tregs-populaation korkeasatoiseen valintaan, joka on erittäin suppressiivinen in vitro, mikä tarjoaa parhaan lähteen. FOXP3+ Tregs adoptiivista immunoterapiaa varten.

Cryoperserved PolyTregs (cePolyTregs) on uusi soluhoitoaine allogeenisiin tai autologisiin sovelluksiin, joita on tähän mennessä tutkittu SARS-CoV-2-infektioon liittyvän akuutin hengitysvaikeusoireyhtymän (ARDS) hoitoon. Aiemman analogisen tuotteen, PolyTregsin, joka valmistettiin käyttäen samanlaista metodologiaa ja joka erosi vain lopullisessa formulaatiossa, uskotaan toimivan samalla tavalla in vitro ja in vivo. Kliininen kokemus cePolyTregs-valmisteesta on edelleen rajallinen; analogista PolyTregiä on kuitenkin käytetty laajalti sekä allogeenisena että autologisena tuotteena erilaisissa kliinisissä tiloissa, mukaan lukien graft-versus host -tauti (GvHD), tyypin 1 diabetes, munuaisensiirto, systeeminen lupus erythematosus (SLE) ja pemphigus vulgaris (PV). ). Nämä kokemukset autologisista PolyTregsistä tarjoavat arvokkaita näkemyksiä cePolyTregsille.

Olemme käyttäneet analogista PolyTregs-tuotetta kliinisessä tutkimuksessa koehenkilöillä, jotka saavat saarekesiirtoa (PolyTregs in Islet Transplant -tutkimus). Yhteensä 16 osallistujan kelpoisuus tutkimukseen seulottiin Albertan yliopistossa maaliskuun 2018 ja maaliskuun 2021 välisenä aikana. Osallistujat jaettiin kahteen kohorttiin. Kohortti 1 sai saarekesiirteen käyttäen alemtutsumabi-induktiohoitoa etanerseptin ja anakinran anti-inflammatorisella hoidolla. Kohortti 2 sai saarekesiirteen käyttämällä anti-Thymocyte Globulin (ATG) -induktiohoitoa Etanerseptin ja Anakinran anti-inflammatorisella hoidolla. Molempien kohorttien hoitoryhmät saivat PolyTregs-infuusion 6 viikkoa saarekesiirron jälkeen ja 2 viikkoa kohortin 1 ja kohortin 2 jälkeen. Kummankin kohortin kaikille osallistujille annettiin pieniannoksinen takrolimuusi (Tac) ja sirolimuusi (SRL) immunosuppressio, ja heitä seurattiin vuoden ajan PolyTregs-infuusion jälkeen PolyTregs-hoidon turvallisuuden ja alustavan tehon arvioimiseksi. Tämän protokollan aikaan 3 osallistujaa on saanut PolyTregs-infuusioita. Kaikki raportoidut haittavaikutukset olivat vakavuudeltaan lieviä tai kohtalaisia, ne hävisivät ja niiden määritettiin olevan epätodennäköisiä tai eivät liittyneet PolyTregs-infuusioon. Vaikka tämä kokeilu oli mahdollista, sitä rajoittivat PolyTregsin tuotantoon liittyvät logistiikkaongelmat ja kuolleiden luovuttajien saarekesiirron ajoituksen arvaamaton luonne.

Kryosäilötyt PolyTregit (cePolyTregs) PolyTregsin valmistuksen logistiikan ja saarekesiirron ajoituksen mahdollistamiseksi käytetään cePolyTregiä. cePolyTregs kylmäsäilytetään valmistuksen jälkeen ja sulatetaan välittömästi ennen infuusiota. cePolyTregsillä on erilainen formulaatio, mutta identiteetti ja ominaisuudet ovat samanlaisia ​​kuin PolyTregs ennen ja jälkeen kylmäsäilytyksen. cePolyTregs toimitetaan infuusiokohtaan valvotuissa olosuhteissa pätevän lähettäjän avulla ja säilytetään kylmässä juuri ennen infuusiota. cePolyTregs sulatetaan ensin vesihauteessa, jonka lämpötila on 34 ºC - 38 ºC, ja säilytetään jäissä ennen antoa. Sulatettu cePolyTregs-tuote annetaan perifeerisen suonensisäisen (IV) letkun kautta, joka on esikäsitelty suolaliuoksella vakiintuneiden standardien toimintaohjeiden mukaisesti. Tuote annostellaan perifeerisen laskimonsisäisen letkun kautta manuaalisen ruiskun painalluksella noin 10–30 minuutissa tilavuudesta riippuen.

Sulatetun cePolyTregs-tuotteen antamisen jälkeen tuotepussi, letku ja perifeerinen laskimonsisäinen letku huuhdellaan normaalilla suolaliuoksella varmistaakseen, että koko annos on infusoitu. Ensiapuvälineitä (eli hätävaunuja) on saatavilla infuusion aikana siltä varalta, että potilaalla on allerginen vaste, vakava hypotensiivinen kriisi tai mikä tahansa muu reaktio infuusioon. Elintoiminnot (lämpötila, hengitystaajuus, pulssi ja verenpaine) mitataan ennen infuusiota ja sen jälkeen, sitten 15 minuutin välein (+/- 3 minuuttia) vähintään tunnin ajan ja kunnes nämä merkit ovat tyydyttäviä ja vakaita. Laskimonsisäistä linjaa ylläpidetään infuusion jälkeen ja koehenkilöä pyydetään jäämään kliinisen tutkimuksen yksikköön 24 tunniksi. Elintoimintoja seurataan tunnin välein (+/- 3 minuuttia) ensimmäisten neljän tunnin ajan ja sen jälkeen joka neljäs tunti (+/- 3 minuuttia).

Olemassa olevien prekliinisten ja kliinisten löydösten perusteella oletamme, että cePolyTregs suojaa sekä automaattiselta että allorejektiolta siirrettyjä saarekkeita, mikä parantaa insuliinista riippumatonta kestävyyttä ja C-peptidin toimintaa ajan myötä aikuisilla, joilla on T1DM.