cePolyTregs no transplante de ilhotas (cePolyTregs)

O diabetes mellitus tipo 1 (T1DM) ocorre devido a uma perda de produção de insulina causada pela destruição das células produtoras de insulina localizadas no pâncreas humano. Os pacientes que vivem com DM1 apresentam complicações substanciais devido aos níveis descontrolados de açúcar no sangue. A administração de insulina é um tratamento que salva vidas, mas falha em replicar o controle dinâmico e responsivo fornecido pelas próprias células produtoras de insulina de uma pessoa. As terapias com insulina também podem aumentar o risco de episódios graves de baixa glicose, o que afeta significativamente a qualidade de vida desses pacientes. Além disso, essas terapias falham em prevenir completamente as complicações a longo prazo dessa doença devastadora.

O transplante da célula produtora de insulina para o fígado (transplante de ilhotas) provou ser um tratamento eficaz e valioso para aqueles com baixo nível de açúcar no sangue. No entanto, o transplante de ilhotas é atualmente limitado pelo número de doadores de órgãos pancreáticos e pela necessidade de medicamentos para toda a vida, como medicamentos anti-rejeição.

Tregs são um subconjunto de células T CD4+ que funcionam para manter a homeostase do sistema imunológico e preservar a tolerância aos autoantígenos. A função das Tregs na manutenção da tolerância imunológica pode ser aproveitada por meio da terapia com células Treg para o tratamento de várias doenças imunológicas. Tregs têm a capacidade de migrar para locais de inflamação e têm mais de 30 diferentes mecanismos reguladores imunológicos para responder a diferentes condições inflamatórias. A função efetora Treg parece funcionar por supressão do espectador, regulando as respostas inflamatórias locais por meio de uma combinação de contato célula-célula e produção supressiva de citocinas. Finalmente, foi demonstrado que as Tregs desempenham um papel crítico na reparação de tecidos. A descoberta do fator de transcrição FOXP3 em 2003 representou um grande avanço na caracterização de Treg. FOXP3 é essencial para a especificação da linhagem celular Treg e contribui diretamente para a função Treg. No entanto, FOXP3 é uma proteína intracelular que não pode ser usada para isolar Tregs para fins terapêuticos. Assim, métodos para o isolamento de Tregs devem contar com o uso de marcadores de superfície celular. A descoberta da relação inversa entre a expressão de CD127 e FOXP3 levou ao uso do fenótipo de superfície celular CD4+CD127lo/- CD25+ para seleção de alto rendimento de uma população de Tregs humana altamente pura que é altamente supressiva in vitro, fornecendo assim a melhor fonte de Tregs FOXP3+ para imunoterapia adotiva.

O PolyTregs criopreservado (cePolyTregs) é um novo terapêutico celular para aplicações alogênicas ou autólogas que foram estudadas até agora para o tratamento da síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA) associada à infecção por SARS-CoV-2. Acredita-se que um produto análogo anterior, o PolyTregs, preparado usando uma metodologia semelhante e diferindo apenas na formulação final, tenha um desempenho semelhante in vitro e in vivo. A experiência clínica com cePolyTregs ainda é limitada; no entanto, o análogo PolyTregs tem sido amplamente utilizado como um produto alogênico e autólogo em várias condições clínicas, incluindo doença do enxerto contra o hospedeiro (GvHD), diabetes tipo 1, transplante renal, lúpus eritematoso sistêmico (LES) e pênfigo vulgar (PV). ). Essas experiências com PolyTregs autólogos fornecem informações valiosas para cePolyTregs.

Usamos o produto análogo PolyTregs em um ensaio clínico em indivíduos que receberam transplante de ilhotas (estudo PolyTregs in Islet Transplant). Um total de 16 participantes foram selecionados para elegibilidade para o estudo na Universidade de Alberta no período de março de 2018 a março de 2021. Os participantes foram divididos em duas coortes. A coorte 1 recebeu transplante de ilhotas usando terapia de indução de alemtuzumabe com terapia anti-inflamatória etanercepte e anakinra. A Coorte 2 recebeu transplante de ilhotas usando terapia de indução com Anti-Thymocyte Globulin (ATG) com terapia anti-inflamatória Etanercept e Anakinra. Os grupos de tratamento de ambas as coortes receberam infusão de PolyTregs em 6 semanas e 2 semanas após o transplante de ilhotas para Coorte 1 e Coorte 2, respectivamente. Todos os participantes em ambas as coortes foram mantidos em imunossupressão com tacrolimus (Tac) e sirolimus (SRL) de baixa dose e foram acompanhados por um ano após a infusão de PolyTregs para avaliar a segurança e a eficácia preliminar da terapia com PolyTregs. No momento deste protocolo, 3 participantes receberam infusões de PolyTregs. Todos os EAs relatados foram de gravidade leve a moderada, resolvidos e determinados como improváveis ​​ou não relacionados à infusão de PolyTregs. Embora viável, este estudo foi limitado pelas questões de logística envolvendo a fabricação de PolyTregs e a natureza imprevisível do momento do transplante de ilhotas de doadores falecidos.

PolyTregs criopreservados (cePolyTregs) Para facilitar a viabilidade em torno da logística da fabricação de PolyTregs e o momento do transplante de ilhotas, serão usados ​​cePolyTregs. cePolyTregs é criopreservado após sua formulação e descongelado imediatamente antes da infusão. O cePolyTregs tem uma formulação diferente, mas a identidade e as características são análogas às do PolyTregs antes e depois da criopreservação. Os cePolyTregs serão entregues no local de infusão sob condições controladas usando um expedidor qualificado e serão mantidos criopreservados até pouco antes da infusão. Os cePolyTregs serão primeiro descongelados em banho-maria mantido a 34ºC - 38ºC e mantidos em gelo antes da administração. O produto cePolyTregs descongelado será administrado através de uma linha intravenosa periférica (IV) preparada com solução salina de acordo com os procedimentos operacionais padrão estabelecidos. O produto será administrado por via intravenosa periférica via injeção manual de seringa em aproximadamente 10 minutos a 30 minutos, dependendo do volume.

Após a administração do produto cePolyTregs descongelado, a bolsa do produto, o tubo e a linha IV periférica serão lavados com solução salina normal para garantir a infusão completa da dose. Equipamento médico de emergência (ou seja, carrinho de emergência) estará disponível durante a infusão, caso o sujeito tenha uma resposta alérgica, crise hipotensiva grave ou qualquer outra reação à infusão. Os sinais vitais (temperatura, frequência respiratória, pulso e pressão arterial) serão medidos antes e após a infusão, depois a cada 15 minutos (+/- 3 minutos) por pelo menos uma hora e até que esses sinais sejam satisfatórios e estáveis. A linha intravenosa será mantida após a infusão e o sujeito será solicitado a permanecer na unidade de pesquisa clínica por 24 horas. Os sinais vitais serão monitorados a cada hora (+/- 3 minutos) durante as primeiras quatro horas e a cada quatro horas (+/- 3 minutos) posteriormente.

Com base nos achados pré-clínicos e clínicos existentes, levantamos a hipótese de que os cePolyTregs protegem da auto e alorrejeição de ilhotas transplantadas, melhorando assim a durabilidade independente da insulina e a função do peptídeo C ao longo do tempo em adultos com DM1.