cePolyTregs i Islet Transplantation (cePolyTregs)

Type-1 diabetes mellitus (T1DM) opstår på grund af et tab af insulinproduktion forårsaget af ødelæggelsen af ​​de insulinproducerende celler i den menneskelige bugspytkirtel. Patienter, der lever med T1DM, oplever betydelige komplikationer fra ukontrollerede blodsukkerniveauer. Insulinadministration er en livreddende behandling, men formår ikke at replikere den dynamiske og responsive kontrol, som en persons egne insulinproducerende celler giver. Insulinbehandlinger kan også øge risikoen for alvorlige episoder med lavt glukose, hvilket i væsentlig grad påvirker livskvaliteten hos disse patienter. Derudover forhindrer disse terapier fuldstændigt at forhindre langsigtede komplikationer fra denne ødelæggende sygdom.

Transplantationen af ​​den insulinproducerende celle i leveren (Islet-transplantation) har vist sig at være en effektiv og værdifuld behandling for dem med dårligt blodsukker. Islet-transplantation er dog i øjeblikket begrænset af antallet af bugspytkirtelorgandonorer og behovet for livslange medicinkrav såsom antiafstødningsmedicin.

Tregs er en undergruppe af CD4+ T-celler, der fungerer til at opretholde immunsystemets homeostase og bevare tolerancen over for selvantigener. Tregs funktion til at opretholde immuntolerance kan udnyttes gennem Treg-celleterapi til behandling af forskellige immunologiske sygdomme. Tregs har evnen til at migrere til steder med inflammation og har over 30 forskellige immunregulerende mekanismer til at reagere på forskellige inflammatoriske tilstande. Treg-effektorfunktionen ser ud til at virke ved undertrykkelse af tilskuere, der regulerer lokale inflammatoriske reaktioner gennem en kombination af celle-cellekontakt og undertrykkende cytokinproduktion. Endelig har Tregs vist sig at spille en afgørende rolle i vævsreparation. Opdagelsen af ​​transkriptionsfaktoren FOXP3 i 2003 repræsenterede et stort fremskridt i Treg-karakterisering. FOXP3 er essentiel for Treg-cellelinjespecifikation og bidrager direkte til Treg-funktionen. FOXP3 er imidlertid et intracellulært protein, der ikke kan bruges til at isolere Tregs til terapeutiske formål. Metoder til isolering af Tregs skal således stole på brugen af ​​celleoverflademarkører. Opdagelsen af ​​det omvendte forhold mellem CD127 og FOXP3-ekspression førte til brugen af ​​CD4+CD127lo/- CD25+-celleoverfladefænotypen til højudbytteudvælgelse af en meget ren human Tregs-population, der er meget undertrykkende in vitro, hvilket giver den bedste kilde af FOXP3+ Tregs til adoptiv immunterapi.

Cryoperserved PolyTregs (cePolyTregs) er et nyt cellulært terapeutisk middel til allogene eller autologe applikationer, som hidtil er blevet undersøgt til behandling af akut respiratory distress syndrome (ARDS) forbundet med SARS-CoV-2-infektion. Et tidligere analogt produkt, PolyTregs, fremstillet ved anvendelse af en lignende metode og kun adskilte sig i den endelige formulering, menes at fungere på samme måde in vitro og in vivo. Den kliniske erfaring med cePolyTregs er stadig begrænset; den analoge PolyTregs er imidlertid blevet brugt i vid udstrækning som et både allogent og autologt produkt i forskellige kliniske tilstande, herunder graft-versus host-sygdom (GvHD), Type 1-diabetes, nyretransplantation, systemisk lupus erythematosus (SLE) og pemphigus vulgaris (PV). ). Disse erfaringer med autologe PolyTregs giver værdifuld indsigt til cePolyTregs.

Vi har brugt det analoge PolyTregs-produkt i et klinisk forsøg med forsøgspersoner, der modtager ø-transplantation (PolyTregs in Islet Transplant-undersøgelse). I alt 16 deltagere blev screenet for berettigelse til undersøgelsen ved University of Alberta i perioden marts 2018 til marts 2021. Deltagerne blev delt i to årgange. Kohorte 1 modtog ø-transplantation ved hjælp af Alemtuzumab-induktionsterapi med Etanercept og Anakinra antiinflammatorisk behandling. Kohorte 2 modtog øtransplantation ved hjælp af anti-thymocytglobulin (ATG) induktionsterapi med Etanercept og Anakinra antiinflammatorisk behandling. Behandlingsgrupperne i begge kohorter modtog PolyTregs-infusion 6 uger og 2 uger efter ø-transplantation for henholdsvis kohorte 1 og kohorte 2. Alle deltagere i begge kohorter blev opretholdt på lavdosis tacrolimus (Tac) og sirolimus (SRL) immunsuppression og blev fulgt i et år efter PolyTregs-infusion for at vurdere sikkerheden og den foreløbige effekt af PolyTregs-behandlingen. På tidspunktet for denne protokol har 3 deltagere modtaget PolyTregs-infusioner. Alle rapporterede bivirkninger var milde til moderate i sværhedsgrad, forsvandt og blev bestemt til at være usandsynlige eller ikke relateret til PolyTregs-infusion. Selvom det var muligt, var dette forsøg begrænset af logistikproblemerne omkring PolyTregs-fremstilling og den uforudsigelige karakter af timingen af ​​transplantation af afdøde donorøer.

Kryopreserverede PolyTregs (cePolyTregs) For at lette gennemførligheden omkring logistik af PolyTregs-fremstilling og tidspunktet for øtransplantation, vil cePolyTregs blive brugt. cePolyTregs kryokonserveres efter formuleringen og optøs umiddelbart før infusion. cePolyTregs har en anden formulering, men identiteten og egenskaberne er analoge med PolyTregs før og efter kryokonservering. cePolyTregs vil blive leveret til infusionsstedet under kontrolleret tilstand ved hjælp af en kvalificeret afsender og vil blive opbevaret kryokonserveret indtil lige før infusion. cePolyTregs vil først blive optøet i et vandbad, der holdes ved 34ºC - 38ºC og opbevaret på is før administration. Det optøede cePolyTregs-produkt vil blive indgivet via en perifer intravenøs (IV) linje, der er primet med saltvand i henhold til etablerede standardoperationsprocedurer. Produktet vil blive indgivet via perifer IV-slange via manuel sprøjtetryk på ca. 10 minutter til 30 minutter afhængigt af volumen.

Efter administration af det optøede cePolyTregs-produkt, skylles produktposen, slangen og den perifere IV-slange med normalt saltvand for at sikre, at fuldstændig dosis infunderes. Medicinsk nødudstyr (dvs. nødvogn) vil være tilgængeligt under infusionen i tilfælde af, at forsøgspersonen har en allergisk reaktion, alvorlig hypotensiv krise eller enhver anden reaktion på infusionen. Vitale tegn (temperatur, respirationsfrekvens, puls og blodtryk) tages før og efter infusion, derefter hvert 15. minut (+/- 3 minutter) i mindst en time, og indtil disse tegn er tilfredsstillende og stabile. Den intravenøse linje vil blive opretholdt efter infusionen, og forsøgspersonen vil blive bedt om at forblive i den kliniske forskningsenhed i 24 timer. Vitale tegn vil blive overvåget hver time (+/- 3 minutter) i de første fire timer og hver fjerde time (+/- 3 minutter) derefter.

Baseret på eksisterende prækliniske og kliniske fund antager vi, at cePolyTregs beskytter mod både auto- og allorejektion af transplanterede øer, og derved forbedrer insulinuafhængig holdbarhed og C-peptidfunktion over tid hos voksne med T1DM.