cePolyTregs при трансплантации островков (cePolyTregs)

Сахарный диабет 1 типа (СД1) возникает из-за потери выработки инсулина, вызванной разрушением клеток, продуцирующих инсулин, расположенных в поджелудочной железе человека. Пациенты, живущие с СД1, испытывают значительные осложнения из-за неконтролируемого уровня сахара в крови. Введение инсулина является спасающим жизнь лечением, но оно не может воспроизвести динамический и чувствительный контроль, обеспечиваемый собственными инсулинпродуцирующими клетками человека. Инсулинотерапия также может увеличить риск тяжелых эпизодов гипогликемии, что существенно влияет на качество жизни таких пациентов. Кроме того, эти методы лечения не могут полностью предотвратить долгосрочные осложнения этого разрушительного заболевания.

Трансплантация клеток, продуцирующих инсулин, в печень (трансплантация островков) оказалась эффективным и ценным методом лечения людей с низким уровнем сахара в крови. Тем не менее, трансплантация островков в настоящее время ограничена количеством доноров органов поджелудочной железы и потребностью в пожизненных лекарствах, таких как препараты против отторжения.

Tregs представляют собой подмножество CD4+ T-клеток, которые поддерживают гомеостаз иммунной системы и сохраняют толерантность к собственным антигенам. Функцию Treg в поддержании иммунной толерантности можно использовать с помощью терапии Treg-клетками для лечения различных иммунологических заболеваний. Tregs обладают способностью мигрировать в места воспаления и имеют более 30 различных иммунных регуляторных механизмов для реагирования на различные воспалительные состояния. Эффекторная функция Treg, по-видимому, работает путем подавления свидетелей, регулируя локальные воспалительные реакции посредством комбинации межклеточных контактов и подавления продукции цитокинов. Наконец, было показано, что Tregs играют критическую роль в восстановлении тканей. Открытие транскрипционного фактора FOXP3 в 2003 г. стало большим шагом вперед в характеристике Treg. FOXP3 необходим для спецификации линии клеток Treg и непосредственно способствует функции Treg. Однако FOXP3 является внутриклеточным белком, который нельзя использовать для выделения Treg для терапевтических целей. Таким образом, методы выделения Tregs должны основываться на использовании маркеров клеточной поверхности. Открытие обратной связи между экспрессией CD127 и FOXP3 привело к использованию фенотипа клеточной поверхности CD4+CD127lo/- CD25+ для высокопродуктивной селекции высокочистой популяции Treg человека, обладающей высокой супрессивной активностью in vitro, что обеспечивает наилучший источник FOXP3+ Tregs для адоптивной иммунотерапии.

Криоконсервированные политреги (cePolyTregs) — это новый клеточный терапевтический препарат для аллогенного или аутологичного применения, который до сих пор изучался для лечения острого респираторного дистресс-синдрома (ОРДС), связанного с инфекцией SARS-CoV-2. Предыдущий аналогичный продукт, PolyTregs, приготовленный с использованием аналогичной методологии и отличающийся только конечным составом, считается, что он работает одинаково как in vitro, так и in vivo. Клинический опыт применения cePolyTregs все еще ограничен; однако аналогичные PolyTreg широко использовались как аллогенные, так и аутологичные продукты при различных клинических состояниях, включая реакцию «трансплантат против хозяина» (РТПХ), диабет 1 типа, трансплантацию почки, системную красную волчанку (СКВ) и вульгарную пузырчатку (PV). ). Этот опыт работы с аутологичными PolyTreg дает ценную информацию для cePolyTreg.

Мы использовали аналогичный продукт PolyTregs в клинических испытаниях у субъектов, перенесших трансплантацию островков (исследование PolyTregs in Islet Transplant). В общей сложности 16 участников были проверены на соответствие требованиям для участия в исследовании в Университете Альберты в период с марта 2018 года по март 2021 года. Участники были разделены на две когорты. Когорта 1 получила трансплантацию островков с использованием индукционной терапии алемтузумабом с этанерцептом и противовоспалительной терапией анакинрой. Когорта 2 получила трансплантацию островков с использованием индукционной терапии антитимоцитарным глобулином (АТГ) с противовоспалительной терапией этанерцептом и анакинрой. Лечебные группы обеих когорт получали инфузию PolyTregs через 6 недель и 2 недели после трансплантации островков для когорты 1 и когорты 2 соответственно. Все участники обеих групп получали низкие дозы такролимуса (Tac) и сиролимуса (SRL) для иммуносупрессии и наблюдались в течение года после инфузии PolyTregs для оценки безопасности и предварительной эффективности терапии PolyTregs. Во время этого протокола 3 участника получили инфузии PolyTregs. Все зарегистрированные НЯ были легкой или средней степени тяжести, разрешились и были признаны маловероятными или не связанными с инфузией PolyTregs. Хотя это испытание было возможным, оно было ограничено проблемами логистики, связанными с производством PolyTreg, и непредсказуемым характером сроков трансплантации островков умершего донора.

Криоконсервированные политреги (cePolyTregs) Чтобы упростить логистику производства PolyTregs и сроки трансплантации островков, будут использоваться cePolyTregs. cePolyTregs подвергают криоконсервации после приготовления и размораживают непосредственно перед инфузией. cePolyTregs имеет другую формулу, но идентичность и характеристики аналогичны PolyTregs до и после криоконсервации. cePolyTregs будут доставлены в место инфузии в контролируемых условиях с помощью квалифицированного грузоотправителя и будут храниться в криоконсервированном состоянии непосредственно перед инфузией. cePolyTregs сначала размораживают на водяной бане при температуре 34–38 °C и хранят на льду перед введением. Размороженный продукт cePolyTregs будет вводиться через периферическую внутривенную (IV) линию, заполненную физиологическим раствором, в соответствии с установленными стандартными операционными процедурами. Продукт будет вводиться через периферический внутривенный катетер с помощью ручного шприца в течение приблизительно от 10 до 30 минут в зависимости от объема.

После введения размороженного продукта cePolyTregs пакет с продуктом, трубка и периферический внутривенный катетер будут промыты физиологическим раствором, чтобы гарантировать введение полной дозы. Во время инфузии будет доступно медицинское оборудование для неотложной помощи (например, тележка для неотложной помощи) на случай, если у субъекта возникнет аллергическая реакция, тяжелый гипотензивный криз или любая другая реакция на инфузию. Жизненно важные показатели (температура, частота дыхания, пульс и артериальное давление) будут измеряться до и после инфузии, затем каждые 15 минут (+/- 3 минуты) в течение как минимум одного часа и до тех пор, пока эти показатели не станут удовлетворительными и стабильными. Внутривенный катетер будет поддерживаться после инфузии, и субъекту будет предложено оставаться в отделении клинических исследований в течение 24 часов. Показатели жизнедеятельности будут контролироваться каждый час (+/- 3 минуты) в течение первых четырех часов и каждые четыре часа (+/- 3 минуты) в дальнейшем.

Основываясь на существующих доклинических и клинических данных, мы предполагаем, что cePolyTreg защищают как от ауто-, так и от аллореактивации трансплантированных островков, тем самым улучшая независимую от инсулина устойчивость и функцию С-пептида с течением времени у взрослых с СД1.