cePolyTregs en el trasplante de islotes (cePolyTregs)

La diabetes mellitus tipo 1 (T1DM) ocurre debido a una pérdida en la producción de insulina causada por la destrucción de las células productoras de insulina ubicadas en el páncreas humano. Los pacientes que viven con T1DM experimentan complicaciones sustanciales debido a los niveles de azúcar en sangre no controlados. La administración de insulina es un tratamiento que salva vidas, pero no logra replicar el control dinámico y receptivo proporcionado por las propias células productoras de insulina de una persona. Las terapias con insulina también pueden aumentar el riesgo de episodios graves de glucosa baja, lo que afecta significativamente la calidad de vida de estos pacientes. Además, estas terapias no logran prevenir por completo las complicaciones a largo plazo de esta devastadora enfermedad.

El trasplante de la célula productora de insulina en el hígado (trasplante de islotes) ha demostrado ser un tratamiento eficaz y valioso para las personas con niveles bajos de azúcar en la sangre. Sin embargo, el trasplante de islotes actualmente está limitado por la cantidad de donantes de órganos de páncreas y la necesidad de medicamentos de por vida, como medicamentos contra el rechazo.

Las Treg son un subconjunto de células T CD4+ que funcionan para mantener la homeostasis del sistema inmunitario y preservar la tolerancia a los antígenos propios. La función de las células Treg en el mantenimiento de la tolerancia inmunológica se puede aprovechar a través de la terapia con células Treg para tratar diversas enfermedades inmunológicas. Las Treg tienen la capacidad de migrar a sitios de inflamación y tienen más de 30 mecanismos reguladores inmunológicos diferentes para responder a diferentes condiciones inflamatorias. La función efectora Treg parece funcionar mediante la supresión de los espectadores, regulando las respuestas inflamatorias locales a través de una combinación de contacto célula-célula y la producción supresora de citoquinas. Finalmente, se ha demostrado que las Treg desempeñan un papel fundamental en la reparación de tejidos. El descubrimiento del factor de transcripción FOXP3 en 2003 representó un gran avance en la caracterización de Treg. FOXP3 es esencial para la especificación del linaje de células Treg y contribuye directamente a la función Treg. Sin embargo, FOXP3 es una proteína intracelular que no puede usarse para aislar Tregs para usos terapéuticos. Por lo tanto, los métodos para el aislamiento de Tregs deben basarse en el uso de marcadores de superficie celular. El descubrimiento de la relación inversa entre la expresión de CD127 y FOXP3 condujo al uso del fenotipo de superficie celular CD4+CD127lo/- CD25+ para la selección de alto rendimiento de una población Tregs humana altamente pura que es altamente supresora in vitro, proporcionando así la mejor fuente de FOXP3+ Tregs para inmunoterapia adoptiva.

PolyTregs crioperservado (cePolyTregs) es una nueva terapia celular para aplicaciones alogénicas o autólogas que se ha estudiado hasta ahora para el tratamiento del síndrome de dificultad respiratoria aguda (SDRA) asociado con la infección por SARS-CoV-2. Se cree que un producto análogo anterior, PolyTregs, preparado con una metodología similar y solo difería en la formulación final, funciona de manera similar in vitro e in vivo. La experiencia clínica con cePolyTregs aún es limitada; sin embargo, los PolyTregs análogos se han utilizado ampliamente como producto alogénico y autólogo en diversas afecciones clínicas, incluida la enfermedad de injerto contra huésped (EICH), diabetes tipo 1, trasplante de riñón, lupus eritematoso sistémico (LES) y pénfigo vulgar (PV). ). Estas experiencias con PolyTregs autólogos proporcionan información valiosa para cePolyTregs.

Hemos utilizado el producto PolyTregs análogo en un ensayo clínico en sujetos que recibieron un trasplante de islotes (estudio PolyTregs in Islet Transplant). Se evaluó la elegibilidad para el estudio de un total de 16 participantes en la Universidad de Alberta en el período de marzo de 2018 a marzo de 2021. Los participantes se dividieron en dos cohortes. La cohorte 1 recibió un trasplante de islotes con terapia de inducción de alemtuzumab con etanercept y terapia antiinflamatoria con anakinra. La cohorte 2 recibió un trasplante de islotes usando una terapia de inducción con globulina antitimocito (ATG) con etanercept y una terapia antiinflamatoria con anakinra. Los grupos de tratamiento de ambas cohortes recibieron infusión de PolyTregs a las 6 y 2 semanas posteriores al trasplante de islotes para la Cohorte 1 y la Cohorte 2, respectivamente. Todos los participantes en ambas cohortes se mantuvieron con dosis bajas de inmunosupresión de tacrolimus (Tac) y sirolimus (SRL) y se les dio seguimiento durante un año después de la infusión de PolyTregs para evaluar la seguridad y la eficacia preliminar de la terapia con PolyTregs. En el momento de este protocolo, 3 participantes han recibido infusiones de PolyTregs. Todos los eventos adversos informados fueron de gravedad leve a moderada, se resolvieron y se determinó que eran poco probables o no estaban relacionados con la infusión de PolyTregs. Si bien fue factible, este ensayo estuvo limitado por los problemas logísticos relacionados con la fabricación de PolyTregs y la naturaleza impredecible del momento del trasplante de islotes de donantes fallecidos.

PolyTregs criopreservados (cePolyTregs) Para facilitar la viabilidad en torno a la logística de la fabricación de PolyTregs y el momento del trasplante de islotes, se utilizarán cePolyTregs. cePolyTregs se crioconserva después de su formulación y se descongela inmediatamente antes de la infusión. cePolyTregs tiene una formulación diferente, pero la identidad y las características son análogas a las de PolyTregs antes y después de la crioconservación. cePolyTregs se entregará en el lugar de la infusión en condiciones controladas mediante un transportista calificado y se mantendrá crioconservado hasta justo antes de la infusión. cePolyTregs se descongelará primero en un baño de agua mantenido a 34 ºC - 38 ºC y se mantendrá en hielo antes de la administración. El producto cePolyTregs descongelado se administrará a través de una vía intravenosa (IV) periférica cebada con solución salina según los procedimientos operativos estándar establecidos. El producto se administrará por vía intravenosa periférica a través de una jeringa manual en aproximadamente 10 minutos a 30 minutos, según el volumen.

Después de la administración del producto cePolyTregs descongelado, la bolsa del producto, el tubo y la vía intravenosa periférica se enjuagarán con solución salina normal para asegurar que se infunda la dosis completa. El equipo médico de emergencia (es decir, un carrito de emergencia) estará disponible durante la infusión en caso de que el sujeto tenga una respuesta alérgica, una crisis hipotensiva grave o cualquier otra reacción a la infusión. Se tomarán los signos vitales (temperatura, frecuencia respiratoria, pulso y presión arterial) antes y después de la infusión, luego cada 15 minutos (+/- 3 minutos) durante al menos una hora y hasta que estos signos sean satisfactorios y estables. La vía intravenosa se mantendrá después de la infusión y se pedirá al sujeto que permanezca en la unidad de investigación clínica durante 24 horas. Los signos vitales se controlarán cada hora (+/- 3 minutos) durante las primeras cuatro horas y cada cuatro horas (+/- 3 minutos) a partir de entonces.

Sobre la base de los hallazgos clínicos y preclínicos existentes, planteamos la hipótesis de que las cePolyTregs protegen tanto del auto como del alorrechazo de los islotes trasplantados, mejorando así la durabilidad independiente de la insulina y la función del péptido C con el tiempo en adultos con DM1.