cePolyTregs i ötransplantation (cePolyTregs)

Typ 1-diabetes mellitus (T1DM) uppstår på grund av en förlust av insulinproduktion orsakad av förstörelsen av de insulinproducerande cellerna i den mänskliga bukspottkörteln. Patienter som lever med T1DM upplever betydande komplikationer från okontrollerade blodsockernivåer. Insulintillförsel är en livräddande behandling men lyckas inte replikera den dynamiska och responsiva kontrollen som en persons egna insulinproducerande celler tillhandahåller. Insulinterapier kan också öka risken för allvarliga episoder med lågt glukos, vilket avsevärt påverkar livskvaliteten hos dessa patienter. Dessutom misslyckas dessa terapier att helt förhindra långsiktiga komplikationer från denna förödande sjukdom.

Transplantationen av den insulinproducerande cellen i levern (Islet-transplantation) har visat sig vara en effektiv och värdefull behandling för personer med lågt blodsocker. Emellertid är Islet-transplantation för närvarande begränsad av antalet donatorer av bukspottkörtelorgan och behovet av livslånga medicineringskrav såsom läkemedel mot avstötning.

Tregs är en undergrupp av CD4+ T-celler som fungerar för att upprätthålla immunsystemets homeostas och bevara toleransen mot självantigener. Tregs funktion för att upprätthålla immuntolerans kan utnyttjas genom Treg-cellterapi för behandling av olika immunologiska sjukdomar. Tregs har förmågan att migrera till platser för inflammation och har över 30 olika immunreglerande mekanismer för att svara på olika inflammatoriska tillstånd. Treg-effektorfunktionen verkar fungera genom undertryckande av åskådare, som reglerar lokala inflammatoriska svar genom en kombination av cell-cellkontakt och undertryckande cytokinproduktion. Slutligen har Tregs visat sig spela en avgörande roll i vävnadsreparation. Upptäckten av transkriptionsfaktorn FOXP3 2003 representerade ett stort framsteg i Treg-karakterisering. FOXP3 är väsentligt för Treg-celllinjespecifikation och bidrar direkt till Treg-funktionen. FOXP3 är dock ett intracellulärt protein som inte kan användas för att isolera Tregs för terapeutisk användning. Sålunda måste metoder för isolering av Tregs förlita sig på användningen av cellytmarkörer. Upptäckten av det omvända förhållandet mellan CD127- och FOXP3-uttryck ledde till användningen av CD4+CD127lo/- CD25+-cellytfenotypen för högutbytesselektion av en mycket ren mänsklig Tregs-population som är mycket undertryckande in vitro, vilket ger den bästa källan av FOXP3+ Tregs för adoptiv immunterapi.

Cryoperserved PolyTregs (cePolyTregs) är ett nytt cellulärt läkemedel för allogena eller autologa applikationer som hittills har studerats för behandling av akut andnödsyndrom (ARDS) associerat med SARS-CoV-2-infektion. En tidigare analog produkt, PolyTregs, framställd med en liknande metod och endast skiljde sig i slutlig formulering, tros fungera likadant in vitro och in vivo. Den kliniska erfarenheten av cePolyTregs är fortfarande begränsad; den analoga PolyTregs har emellertid använts i stor utsträckning som en både allogen och autolog produkt i olika kliniska tillstånd, inklusive graft-versus host-sjukdom (GvHD), typ 1-diabetes, njurtransplantation, systemisk lupus erythematosus (SLE) och pemphigus vulgaris (PV). ). Dessa erfarenheter med autologa PolyTregs ger värdefulla insikter till cePolyTregs.

Vi har använt den analoga PolyTregs-produkten i en klinisk prövning på försökspersoner som fått ötransplantation (PolyTregs in Islet Transplant-studie). Totalt 16 deltagare screenades för berättigande till studien vid University of Alberta under perioden mars 2018 till mars 2021. Deltagarna delades in i två kohorter. Kohort 1 fick ötransplantation med Alemtuzumab induktionsterapi med Etanercept och Anakinra antiinflammatorisk behandling. Kohort 2 fick ötransplantation med anti-tymocytglobulin (ATG) induktionsterapi med Etanercept och Anakinra antiinflammatorisk behandling. Behandlingsgrupperna i båda kohorterna fick PolyTregs-infusion 6 veckor och 2 veckor efter ötransplantation för kohort 1 respektive kohort 2. Alla deltagare i båda kohorterna hölls på lågdos takrolimus (Tac) och sirolimus (SRL) immunsuppression och följdes i ett år efter PolyTregs-infusion för att bedöma säkerhet och preliminär effekt av PolyTregs-behandling. Vid tidpunkten för detta protokoll har 3 deltagare fått PolyTregs-infusioner. Alla rapporterade biverkningar var milda till måttliga i svårighetsgrad, försvann och bedömdes vara osannolika eller inte relaterade till PolyTregs-infusion. Även om det var genomförbart begränsades detta försök av logistikproblemen kring PolyTregs tillverkning och den oförutsägbara karaktären av tidpunkten för transplantation av avlidna donatoröar.

Cryopreserved PolyTregs (cePolyTregs) För att underlätta genomförbarheten kring logistiken för PolyTregs tillverkning och tidpunkten för ötransplantation kommer cePolyTregs att användas. cePolyTregs kryokonserveras efter sin formulering och tinas omedelbart före infusion. cePolyTregs har en annan formulering men identiteten och egenskaperna är analoga med PolyTregs före och efter kryokonservering. cePolyTregs kommer att levereras till infusionsstället under kontrollerat tillstånd med hjälp av en kvalificerad avsändare och kommer att förvaras kryokonserverad till strax före infusion. cePolyTregs kommer först att tinas i ett vattenbad som hålls vid 34ºC - 38ºC och förvaras på is före administrering. Den tinade cePolyTregs-produkten kommer att administreras via en perifer intravenös (IV) linje som förbereds med koksaltlösning enligt fastställda standardförfaranden. Produkten kommer att administreras via perifer IV-ledning via manuell spruta på cirka 10 minuter till 30 minuter beroende på volymen.

Efter administrering av den tinade cePolyTregs-produkten kommer produktpåsen, slangen och den perifera IV-linjen att spolas med normal koksaltlösning för att säkerställa att fullständig dos infunderas. Medicinsk akututrustning (d.v.s. nödvagn) kommer att finnas tillgänglig under infusionen om patienten har en allergisk reaktion, allvarlig hypotensiv kris eller någon annan reaktion på infusionen. Vitala tecken (temperatur, andningsfrekvens, puls och blodtryck) tas före och efter infusion, sedan var 15:e minut (+/- 3 minuter) under minst en timme och tills dessa tecken är tillfredsställande och stabila. Den intravenösa linjen kommer att bibehållas efter infusionen och försökspersonen kommer att uppmanas att stanna kvar på den kliniska forskningsenheten i 24 timmar. Vitala tecken kommer att övervakas varje timme (+/- 3 minuter) under de första fyra timmarna och var fjärde timme (+/- 3 minuter) därefter.

Baserat på befintliga prekliniska och kliniska fynd, antar vi att cePolyTregs skyddar från både auto- och allorejektion av transplanterade öar, och därigenom förbättrar insulinoberoende hållbarhet och C-peptidfunktion över tid hos vuxna med T1DM.