cePolyTregs nel trapianto di isole (cePolyTregs)

Il diabete mellito di tipo 1 (T1DM) si verifica a causa di una perdita di produzione di insulina causata dalla distruzione delle cellule produttrici di insulina situate nel pancreas umano. I pazienti che vivono con T1DM sperimentano notevoli complicazioni dovute a livelli di zucchero nel sangue non controllati. La somministrazione di insulina è un trattamento salvavita, ma non riesce a replicare il controllo dinamico e reattivo fornito dalle cellule produttrici di insulina di una persona. Le terapie insuliniche possono anche aumentare il rischio di episodi gravi di ipoglicemia, che influiscono in modo significativo sulla qualità della vita di questi pazienti. Inoltre, queste terapie non riescono a prevenire completamente le complicanze a lungo termine di questa malattia devastante.

Il trapianto della cellula produttrice di insulina nel fegato (trapianto di isole) si è dimostrato un trattamento efficace e prezioso per chi ha un basso livello di zucchero nel sangue. Tuttavia, il trapianto di isole è attualmente limitato dal numero di donatori di organi del pancreas e dalla necessità di farmaci per tutta la vita come i farmaci antirigetto.

Le Treg sono un sottoinsieme di cellule T CD4+ che funzionano per mantenere l'omeostasi del sistema immunitario e preservare la tolleranza agli autoantigeni. La funzione delle Treg nel mantenere la tolleranza immunitaria può essere sfruttata attraverso la terapia cellulare Treg per il trattamento di varie malattie immunologiche. Le Treg hanno la capacità di migrare verso i siti di infiammazione e hanno oltre 30 diversi meccanismi di regolazione immunitaria per rispondere a diverse condizioni infiammatorie. La funzione effettrice delle Treg sembra funzionare mediante la soppressione degli astanti, regolando le risposte infiammatorie locali attraverso una combinazione di contatto cellula-cellula e produzione soppressiva di citochine. Infine, è stato dimostrato che le Treg svolgono un ruolo fondamentale nella riparazione dei tessuti. La scoperta del fattore di trascrizione FOXP3 nel 2003 ha rappresentato un importante progresso nella caratterizzazione delle Treg. FOXP3 è essenziale per la specifica del lignaggio delle cellule Treg e contribuisce direttamente alla funzione Treg. Tuttavia, FOXP3 è una proteina intracellulare che non può essere utilizzata per isolare le Treg per usi terapeutici. Pertanto, i metodi per l'isolamento delle Treg devono basarsi sull'uso di marcatori di superficie cellulare. La scoperta della relazione inversa tra l'espressione di CD127 e FOXP3 ha portato all'uso del fenotipo della superficie cellulare CD4+CD127lo/-CD25+ per la selezione ad alto rendimento di una popolazione Tregs umana altamente pura che è altamente soppressiva in vitro, fornendo così la migliore fonte di FOXP3+ Treg per l'immunoterapia adottiva.

Cryoperserved PolyTregs (cePolyTregs) è una nuova terapia cellulare per applicazioni allogeniche o autologhe che sono state finora studiate per il trattamento della sindrome da distress respiratorio acuto (ARDS) associata all'infezione da SARS-CoV-2. Si ritiene che un precedente prodotto analogo, PolyTregs, preparato utilizzando una metodologia simile e differiva solo nella formulazione finale, abbia prestazioni simili in vitro e in vivo. L'esperienza clinica con cePolyTregs è ancora limitata; tuttavia, l'analogo PolyTregs è stato ampiamente utilizzato come prodotto sia allogenico che autologo in varie condizioni cliniche, tra cui la malattia del trapianto contro l'ospite (GvHD), il diabete di tipo 1, il trapianto di rene, il lupus eritematoso sistemico (LES) e il pemfigo volgare (PV ). Queste esperienze con PolyTregs autologo forniscono preziose informazioni a cePolyTregs.

Abbiamo utilizzato l'analogo prodotto PolyTregs in uno studio clinico su soggetti sottoposti a trapianto di isole (studio PolyTregs in Islet Transplant). Un totale di 16 partecipanti è stato sottoposto a screening per l'idoneità allo studio presso l'Università di Alberta nel periodo compreso tra marzo 2018 e marzo 2021. I partecipanti sono stati divisi in due coorti. La coorte 1 ha ricevuto trapianto di isole utilizzando la terapia di induzione con Alemtuzumab con Etanercept e terapia antinfiammatoria con Anakinra. La coorte 2 ha ricevuto trapianto di isole utilizzando la terapia di induzione anti-timocita globulina (ATG) con Etanercept e terapia antinfiammatoria con Anakinra. I gruppi di trattamento di entrambe le coorti hanno ricevuto l'infusione di PolyTregs a 6 settimane e 2 settimane dopo il trapianto di isole rispettivamente per la coorte 1 e la coorte 2. Tutti i partecipanti in entrambe le coorti sono stati mantenuti in immunosoppressione a basse dosi di tacrolimus (Tac) e sirolimus (SRL) e sono stati seguiti per un anno dopo l'infusione di PolyTregs per valutare la sicurezza e l'efficacia preliminare della terapia PolyTregs. Al momento di questo protocollo, 3 partecipanti hanno ricevuto infusioni di PolyTregs. Tutti gli eventi avversi segnalati erano di gravità da lieve a moderata, si sono risolti e sono stati ritenuti improbabili o non correlati all'infusione di PolyTregs. Sebbene fattibile, questo studio è stato limitato dai problemi logistici che circondano la produzione di PolyTregs e dalla natura imprevedibile dei tempi del trapianto di isole del donatore deceduto.

PolyTregs crioconservati (cePolyTregs) Per facilitare la fattibilità relativa alla logistica della produzione di PolyTregs e la tempistica del trapianto di isole, verrà utilizzato cePolyTregs. cePolyTregs viene criopreservato dopo la sua formulazione e scongelato immediatamente prima dell'infusione. cePolyTregs ha una formulazione diversa ma l'identità e le caratteristiche sono analoghe a PolyTregs prima e dopo la crioconservazione. cePolyTregs sarà consegnato al sito di infusione in condizioni controllate utilizzando uno spedizioniere qualificato e sarà conservato criopreservato fino a poco prima dell'infusione. cePolyTregs verrà prima scongelato in un bagno d'acqua mantenuto a 34ºC - 38ºC e tenuto in ghiaccio prima della somministrazione. Il prodotto cePolyTregs scongelato verrà somministrato tramite una linea endovenosa periferica (IV) innescata con soluzione salina secondo le procedure operative standard stabilite. Il prodotto verrà somministrato tramite linea IV periferica tramite spinta manuale della siringa in circa 10 minuti a 30 minuti a seconda del volume.

Dopo la somministrazione del prodotto cePolyTregs scongelato, la sacca del prodotto, i tubi e la linea IV periferica verranno lavati con soluzione fisiologica normale per garantire l'infusione della dose completa. L'attrezzatura medica di emergenza (ad es. carrello di emergenza) sarà disponibile durante l'infusione nel caso in cui il soggetto abbia una risposta allergica, una grave crisi ipotensiva o qualsiasi altra reazione all'infusione. I segni vitali (temperatura, frequenza respiratoria, polso e pressione sanguigna) verranno rilevati prima e dopo l'infusione, quindi ogni 15 minuti (+/- 3 minuti) per almeno un'ora e fino a quando questi segni non saranno soddisfacenti e stabili. La linea endovenosa verrà mantenuta dopo l'infusione e al soggetto verrà chiesto di rimanere nell'unità di ricerca clinica per 24 ore. I segni vitali saranno monitorati ogni ora (+/- 3 minuti) per le prime quattro ore e successivamente ogni quattro ore (+/- 3 minuti).

Sulla base dei risultati preclinici e clinici esistenti, ipotizziamo che cePolyTregs protegga sia dall'auto che dall'allorigetto delle isole trapiantate, migliorando così la durata indipendente dall'insulina e la funzione del peptide C nel tempo negli adulti con T1DM.