cePolyTregs dans la transplantation d'îlots (cePolyTregs)

Le diabète sucré de type 1 (T1DM) survient en raison d'une perte de production d'insuline causée par la destruction des cellules productrices d'insuline situées dans le pancréas humain. Les patients vivant avec le DT1 éprouvent des complications importantes dues à des niveaux de sucre dans le sang non contrôlés. L'administration d'insuline est un traitement salvateur, mais ne parvient pas à reproduire le contrôle dynamique et réactif fourni par les propres cellules productrices d'insuline d'une personne. Les thérapies à l'insuline peuvent également augmenter le risque d'épisodes graves d'hypoglycémie, ce qui a un impact significatif sur la qualité de vie de ces patients. De plus, ces thérapies ne parviennent pas à prévenir complètement les complications à long terme de cette maladie dévastatrice.

La greffe de la cellule productrice d'insuline dans le foie (greffe d'îlots) s'est avérée être un traitement efficace et précieux pour les personnes souffrant d'une glycémie faible. Cependant, la greffe d'îlots est actuellement limitée par le nombre de donneurs d'organes pancréatiques et le besoin de médicaments à vie tels que les médicaments antirejet.

Les Tregs sont un sous-ensemble de lymphocytes T CD4+ dont la fonction est de maintenir l'homéostasie du système immunitaire et de préserver la tolérance aux auto-antigènes. La fonction des Treg dans le maintien de la tolérance immunitaire peut être exploitée par la thérapie cellulaire Treg pour le traitement de diverses maladies immunologiques. Les Tregs ont la capacité de migrer vers les sites d'inflammation et ont plus de 30 mécanismes de régulation immunitaire différents pour répondre à différentes conditions inflammatoires. La fonction effectrice de Treg semble fonctionner par suppression de spectateur, régulant les réponses inflammatoires locales par une combinaison de contact cellule-cellule et de production de cytokines suppressives. Enfin, il a été démontré que les Tregs jouent un rôle essentiel dans la réparation des tissus. La découverte du facteur de transcription FOXP3 en 2003 a représenté une avancée majeure dans la caractérisation des Treg. FOXP3 est essentiel pour la spécification de la lignée cellulaire Treg et contribue directement à la fonction Treg. Cependant, FOXP3 est une protéine intracellulaire qui ne peut pas être utilisée pour isoler des Tregs à des fins thérapeutiques. Ainsi, les méthodes d'isolement des Treg doivent s'appuyer sur l'utilisation de marqueurs de surface cellulaire. La découverte de la relation inverse entre l'expression de CD127 et de FOXP3 a conduit à l'utilisation du phénotype de surface cellulaire CD4+CD127lo/- CD25+ pour la sélection à haut rendement d'une population de Tregs humains hautement pure et hautement suppressive in vitro, fournissant ainsi la meilleure source de FOXP3+ Tregs pour l'immunothérapie adoptive.

Le Cryoperserved PolyTregs (cePolyTregs) est une nouvelle thérapeutique cellulaire pour des applications allogéniques ou autologues qui a été étudiée jusqu'à présent pour le traitement du syndrome de détresse respiratoire aiguë (SDRA) associé à une infection par le SRAS-CoV-2. Un produit analogue précédent, PolyTregs, préparé à l'aide d'une méthodologie similaire et ne différant que par la formulation finale, est censé fonctionner de manière similaire in vitro et in vivo. L'expérience clinique avec les cePolyTregs est encore limitée ; cependant, les PolyTregs analogues ont été largement utilisés comme produits allogéniques et autologues dans diverses conditions cliniques, y compris la réaction du greffon contre l'hôte (GvHD), le diabète de type 1, la greffe de rein, le lupus érythémateux disséminé (LES) et le pemphigus vulgaire (PV ). Ces expériences avec des PolyTregs autologues fournissent des informations précieuses sur les cePolyTregs.

Nous avons utilisé le produit PolyTregs analogue dans un essai clinique chez des sujets recevant une greffe d'îlots (étude PolyTregs in Islet Transplant). Un total de 16 participants ont été sélectionnés pour l'admissibilité à l'étude à l'Université de l'Alberta au cours de la période de mars 2018 à mars 2021. Les participants ont été divisés en deux cohortes. La cohorte 1 a reçu une greffe d'îlots en utilisant un traitement d'induction à l'alemtuzumab avec un traitement anti-inflammatoire à l'étanercept et à l'anakinra. La cohorte 2 a reçu une greffe d'îlots en utilisant une thérapie d'induction de globuline anti-thymocyte (ATG) avec un traitement anti-inflammatoire Etanercept et Anakinra. Les groupes de traitement des deux cohortes ont reçu une perfusion de PolyTregs 6 semaines et 2 semaines après la transplantation d'îlots pour la cohorte 1 et la cohorte 2, respectivement. Tous les participants des deux cohortes ont été maintenus sous immunosuppression à faible dose de tacrolimus (Tac) et de sirolimus (SRL) et ont été suivis pendant un an après la perfusion de PolyTregs pour évaluer l'innocuité et l'efficacité préliminaire du traitement par PolyTregs. Au moment de ce protocole, 3 participants ont reçu des perfusions de PolyTregs. Tous les EI signalés étaient de gravité légère à modérée, résolus et ont été jugés peu probables ou non liés à la perfusion de PolyTregs. Bien que faisable, cet essai a été limité par les problèmes logistiques entourant la fabrication de PolyTregs et la nature imprévisible du moment de la greffe d'îlots du donneur décédé.

PolyTregs cryoconservés (cePolyTregs) Pour faciliter la faisabilité entourant la logistique de la fabrication des PolyTregs et le moment de la transplantation d'îlots, cePolyTregs sera utilisé. cePolyTregs est cryoconservé après sa formulation et décongelé juste avant la perfusion. cePolyTregs a une formulation différente mais l'identité et les caractéristiques sont analogues aux PolyTregs avant et après cryoconservation. Les cePolyTregs seront livrés au site de perfusion dans des conditions contrôlées par un expéditeur qualifié et seront conservés cryoconservés jusqu'à juste avant la perfusion. Les cePolyTregs seront d'abord décongelés dans un bain-marie maintenu à 34 °C - 38 °C et conservés sur de la glace avant administration. Le produit cePolyTregs décongelé sera administré via une ligne intraveineuse périphérique (IV) amorcée avec une solution saline conformément aux procédures opératoires standard établies. Le produit sera administré par voie intraveineuse périphérique via une seringue manuelle en environ 10 minutes à 30 minutes selon le volume.

Après l'administration du produit cePolyTregs décongelé, le sac de produit, la tubulure et la ligne IV périphérique seront rincés avec une solution saline normale pour s'assurer que la dose complète est perfusée. Un équipement médical d'urgence (c'est-à-dire un chariot d'urgence) sera disponible pendant la perfusion au cas où le sujet aurait une réaction allergique, une crise hypotensive grave ou toute autre réaction à la perfusion. Les signes vitaux (température, fréquence respiratoire, pouls et pression artérielle) seront pris avant et après la perfusion, puis toutes les 15 minutes (+/- 3 minutes) pendant au moins une heure et jusqu'à ce que ces signes soient satisfaisants et stables. La ligne intraveineuse sera maintenue après la perfusion et le sujet sera invité à rester dans l'unité de recherche clinique pendant 24 heures. Les signes vitaux seront surveillés toutes les heures (+/- 3 minutes) pendant les quatre premières heures et toutes les quatre heures (+/- 3 minutes) par la suite.

Sur la base des découvertes précliniques et cliniques existantes, nous émettons l'hypothèse que les cePolyTregs protègent à la fois de l'auto et de l'allorerejet des îlots transplantés, améliorant ainsi la durabilité indépendante de l'insuline et la fonction du peptide C au fil du temps chez les adultes atteints de DT1.