牙周治疗对牙周炎唾液和血清生物标志物的影响

牙周炎是一种生态失调的慢性炎症性疾病，会损害牙齿支持组织的完整性。 当牙周炎发生时，活性氧（主要是由过度活跃的中性粒细胞过度产生）无法通过抗氧化防御系统来平衡，从而导致组织损伤。 细胞保护酶，如超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (Cat) 以及影响它们的调节途径，在 ROS 的清除和解毒中发挥着关键作用。 Sirtuin-1 (SIRT-1) 是一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD) 依赖性组蛋白脱乙酰酶。 众所周知，SIRT1 可以使 FOXO3a 脱乙酰，后者通过调节 SOD2 和 CAT 诱导抗氧化反应。 此外，SIRT1过表达会下调促炎细胞因子，例如白细胞介素（IL）-1α、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的合成，这些细胞因子与牙周病的发病和进展相关。 MMP-9 是一种源自宿主的蛋白水解酶，可导致牙周组织分解并被氧化应激激活。

本研究旨在探讨非手术牙周治疗（NSPT）对唾液和血清 SIRT-1、SOD 和 MMP-9 的影响。 这是第一个对照临床研究，调查 NSPT 对不同牙周炎组唾液 SIRT-1 水平的影响。 样本量是根据之前调查唾液MMP-9水平的研究计算得出的，测试功效为95%，α值：0.05。 估计样本量为每组 10 人。 因此，共有49名全身健康的患者；本研究纳入了 17 名牙周健康者、16 名 P-III-B 名、16 名 P-III-C 名。 进行牙周检查，并由一名检查者在基线和 NSPT 后 3 个月收集完整的医疗和牙科病史。 全口临床牙周检查包括每颗牙齿 6 个部位的探诊深度 (PPD)、临床附着水平 (CAL)、探诊出血情况 (BOP)、牙龈指数 (GI) 和菌斑指数 (PI) 的测量，除了第三磨牙。 通过每位参与者的数字全景X光片评估牙槽骨丢失的存在和类型，必要时补充根尖周X光片。 每个患者的牙周状态由一位经过校准的牙周病医生使用手动探针进行评估。 牙周炎或牙周健康的诊断是根据2017年牙周和种植体周围疾病和状况分类世界研讨会确定的。 对照组牙周健康个体 (n=17) 没有 PD >3 mm 和 CAL >2 mm 的部位，也没有牙槽骨丢失的放射学证据。 国际收支平衡点<10%。

牙周炎III期患者除第一磨牙和门牙外至少有3颗牙齿显示CAL≥5mm和PD≥6mm，并且没有>4颗牙齿因牙周炎而脱落。 放射线骨质流失从冠状沟延伸至中三分之一或以上。 射线照相骨质流失是根据显示最严重骨质流失的牙齿占根长的百分比来确定的。 如果骨丢失百分比/年龄的值在 0.25 和 1.0 之间，则将患者分配至 B 级（n=16）。 如果高于 1.0，则患者被分配至 C 级（n=16）。

治疗

牙周炎组的患者在局部麻醉后，使用超声波洁牙机和手动器械进行象限上和龈下机械洁治和根面平整。 牙周健康对照者未进行牙周干预。

唾液和血清采样

上午 9:00 至 10:00 期间，通过被动流涎法收集总共 5 mL 未刺激的全唾液。 建议参与者在样本采集前三个小时内避免进食。 参与者坐直，在 5 分钟内收集唾液，并按照指示将唾液集中在口底并被动地将其流到无菌玻璃烧杯中。 然后立即将唾液样本转移至 2 mL 聚丙烯管中并储存在 -80°C 下。 采用静脉穿刺法从肘前窝采集血液共计5 mL。 通过以 5000 rpm 离心 10 分钟从血液中分离血清，然后将其快速转移至无菌聚丙烯管并储存在 -80°C。

生物标志物免疫测定唾液和血清样品在冰上解冻。 将唾液样本在室温下以 5.000 rpm 离心 15 分钟，上清液立即用于测定。 使用商业试剂盒通过ELISA测量血清和唾液样品的SIRT-1、MMP-9、MIP-1α*、T-SOD。

统计分析

所有统计分析均使用标准统计软件包进行。 对于组内比较，如果数据不呈正态分布，则使用Wilcoxon符号秩检验和带有Bonferroni校正的Dunn检验来分析基线与治疗后3个月之间的变化。 对于组间比较，对正态分布和非正态分布数据进行 Mann-Whitney U 检验。 采用Spearman等级相关检验检测病组治疗前后生化参数与临床参数及相互之间的相关性。 所有检验均以 P <0.05 的显着性水平进行。