Effect van parodontale behandeling op speeksel- en serumbiomarkers bij parodontitis

Parodontitis is een dysbiotische chronische ontstekingsziekte die de integriteit van de tandondersteunende weefsels aantast. Wanneer parodontitis optreedt, kunnen reactieve zuurstofsoorten, die voornamelijk door hyperactieve neutrofielen worden geproduceerd, niet in evenwicht worden gebracht door het antioxidantafweersysteem en weefselschade veroorzaken. Cytoprotectieve enzymen zoals superoxide dismutase (SOD), catalase (Cat) en de regulerende routes die deze beïnvloeden, spelen een cruciale rol bij het opruimen en ontgiften van ROS. Sirtuin-1 (SIRT-1) is een nicotinamide-adenine-dinucleotide (NAD)-afhankelijke histondeacetylase. Het is bekend dat SIRT1 FOXO3a deacetyleert, wat antioxidantreacties induceert via modulatie in SOD2 en CAT. Bovendien reguleert overexpressie van SIRT1 de pro-inflammatoire cytokines zoals interleukine (IL)-1α, IL-6, IL-8 en de synthese van tumornecrosefactor-α (TNF-α), die geassocieerd zijn met het begin en de progressie van parodontitis. . MMP-9 is een van de gastheer afkomstig proteolytisch enzym dat leidt tot afbraak van parodontaal weefsel en wordt geactiveerd door oxidatieve stress.

Deze studie heeft tot doel het effect van niet-chirurgische parodontale behandeling (NSPT) op speeksel en serum SIRT-1, SOD en MMP-9 te onderzoeken. Het is de eerste gecontroleerde klinische studie die het effect van NSPT op de SIRT-1-spiegels in het speeksel bij verschillende parodontitisgroepen onderzoekt. De steekproefomvang werd berekend op basis van een eerder onderzoek naar het niveau van speeksel MMP-9 en de power van de test was 95%, alfawaarde: 0,05. De geschatte steekproefomvang was 10 personen voor elke groep. Daarom zijn er in totaal 49 systemisch gezonde patiënten; 17 parodontaal gezonde, 16 P-III-B, 16 P-III-C werden in dit onderzoek opgenomen. Er werd parodontaal onderzoek uitgevoerd en de volledige medische en tandheelkundige geschiedenis werd verzameld door één onderzoeker bij aanvang en drie maanden na NSPT. Het klinische parodontale onderzoek van de hele mond omvatte het meten van de sondediepte (PPD), het klinische hechtingsniveau (CAL), de aanwezigheid van bloedingen bij sonderen (BOP), de gingivale index (GI) en de plaque-index (PI) op 6 plaatsen per tand, behalve de derde kiezen. De aanwezigheid en het type alveolair botverlies werden bij elke deelnemer beoordeeld op de digitale panoramische röntgenfoto, die indien nodig werd aangevuld met periapicale röntgenfoto's. De parodontale status van elke patiënt werd geëvalueerd door een enkele gekalibreerde parodontoloog met een handmatige sonde. De diagnose parodontitis of parodontale gezondheid werd vastgesteld volgens de World Workshop on Classification of Periodontal and Peri-Implant Diseases and Condities van 2017. Parodontaal gezonde individuen (n=17) in de controlegroep hadden geen plaatsen met PD >3 mm en CAL >2 mm en ook geen radiografisch bewijs van alveolair botverlies. BOP was <10%.

De patiënten met parodontitis stadium III hadden minimaal drie tanden afgezien van de eerste kiezen en snijtanden, met een CAL ≥5 mm en een PD ≥6 mm, en vertoonden geen>4 tandenverlies als gevolg van parodontitis. Radiologisch botverlies dat zich uitstrekt van coronaal tot het middelste derde deel of verder. Radiologisch botverlies werd bepaald op basis van de tand die het ernstigste botverlies vertoonde als percentage van de wortellengte. Als de waarden van het botverliespercentage/leeftijd tussen 0,25 en 1,0 lagen, werden de patiënten ingedeeld in graad B (n=16). Indien hoger dan 1,0 werden de patiënten ingedeeld in graad C (n=16).

Behandeling

Patiënten in de parodontitisgroepen ondergingen kwadrantsgewijze supra- en subgingivale mechanische schaling en wortelplaning met behulp van ultrasone scalers en handmatige instrumenten, na toediening van lokale anesthesie. Bij de parodontaal gezonde controles werd geen parodontale interventie uitgevoerd.

Speeksel- en serummonstername

Tussen 9.00 en 10.00 uur werd in totaal 5 ml ongestimuleerd speeksel verzameld via de passieve kwijlmethode. De deelnemers werd geadviseerd om drie uur vóór de monstername geen voedsel te consumeren. De deelnemers zaten rechtop en speeksel werd gedurende een periode van 5 minuten verzameld met instructies om speeksel in de mondbodem te verzamelen en het passief in een steriele glazen beker te laten kwijlen. Vervolgens worden speekselmonsters onmiddellijk overgebracht naar een polypropyleenbuis van 2 ml en bij -80°C bewaard. Er werd in totaal 5 ml bloed uit de antecubitale fossa verzameld door middel van een venepunctiemethode. Het serum werd uit het bloed geïsoleerd door gedurende 10 minuten bij 5000 rpm te centrifugeren, gevolgd door snelle overdracht naar een steriele polypropyleenbuis en opslag bij -80°C.

Biomarker Immunoassays Speeksel- en serummonsters werden op ijs ontdooid. De speekselmonsters werden gedurende 15 minuten bij kamertemperatuur bij 5.000 rpm gecentrifugeerd en de supernatanten werden onmiddellijk voor tests gebruikt. Serum- en speekselmonsters van SIRT-1, MMP-9, MIP-la*, T-SOD werden gemeten met behulp van ELISA met behulp van commerciële kits.

Statistische analyse

Alle statistische analyses zijn uitgevoerd met het standaard statistische softwarepakket. Voor de vergelijkingen binnen de groep werden, als de gegevens niet normaal verdeeld waren, de door Wilcoxon ondertekende rangtest en de Dunn-test met de Bonferroni-correctie gebruikt om de verandering tussen de uitgangswaarde en 3 maanden na de behandeling te analyseren. Voor vergelijkingen tussen groepen wordt de Mann-Whitney U-test uitgevoerd voor normaal en niet-normaal verdeelde gegevens. De Spearman's rangcorrelatietest werd gebruikt om de correlaties van biochemische parameters met klinische parameters en die van elkaar in de zieke groep voor en na de behandeling te detecteren. Alle tests werden uitgevoerd op een significantieniveau van P <0,05.