Effekt av parodontitbehandling på saliv och serumbiomarkörer vid parodontit

Parodontit är en dysbiotisk kronisk inflammatorisk sjukdom som äventyrar integriteten hos de tandstödjande vävnaderna. När parodontit inträffar kan reaktiva syrearter, som överproduceras mestadels av hyperaktiva neutrofiler, inte balanseras av antioxidantförsvarssystemet och orsaka vävnadsskador. Cytoskyddande enzymer som superoxiddismutas (SOD), katalas (Cat) och de regulatoriska vägarna som påverkar dem, spelar en avgörande roll i rensandet och avgiftningen av ROS. Sirtuin-1 (SIRT-1) är ett nikotinamid-adenindinukleotid (NAD)-beroende histon-deacetylas. SIRT1 är känt för att deacetylera FOXO3a, vilket inducerar antioxidantsvar via modulering i SOD2 och CAT. Dessutom nedreglerar SIRT1-överuttryck de pro-inflammatoriska cytokinerna såsom interleukin (IL)-1α, IL-6, IL-8 och tumörnekrosfaktor-α (TNF-α) syntesen som är associerade med uppkomsten och progressionen av den periodontala sjukdomen . MMP-9 är ett värdhärlett proteolytiskt enzym som leder till periodontal vävnadsnedbrytning och aktiveras av oxidativ stress.

Denna studie syftar till att undersöka effekten av icke-kirurgisk periodontal behandling (NSPT) på saliv och serum SIRT-1, SOD och MMP-9. Det är den första kontrollerade kliniska studien som undersöker effekten av NSPT på saliv SIRT-1-nivåer i olika parodontitgrupper. Provstorleken beräknades baserat på en tidigare studie som undersökte nivån av saliv MMP-9 och testets styrka var 95 %, alfa-värde: 0,05. Den uppskattade urvalsstorleken var 10 individer för varje grupp. Därför totalt 49 systemiskt friska patienter; 17 parodontalt friska, 16 P-III-B, 16 P-III-C inkluderades i denna studie. Parodontal undersökning utfördes och fullständig medicinsk och tandläkarhistoria samlades in av en enda undersökare vid baslinjen och 3 månader efter NSPT. Den kliniska parodontala undersökningen i hela munnen inkluderade mätning av sonderingsdjup (PPD), klinisk bindningsnivå (CAL), förekomst av blödning vid sondering (BOP), gingivalindex (GI) och plackindex (PI) på 6 ställen per tand, förutom tredje kindtänderna. Förekomsten och typen av den alveolära benförlusten bedömdes på den digitala panoramaröntgenbilden hos varje deltagare, som vid behov kompletterades med periapikala röntgenbilder. Parodontal status för varje patient utvärderades av en enda kalibrerad parodontist med en manuell sond. Diagnosen parodontit eller parodontit hälsa fastställdes enligt 2017 års World Workshop on Classification of Periodontal and Peri-Implant Diseases and Conditions. Periodontalt friska individer (n=17) i kontrollgruppen hade inga ställen med PD >3 mm och CAL >2 mm och heller inga radiografiska bevis på alveolär benförlust. BOP var <10 %.

Patienterna med parodontit stadium III hade minst tre tänder förutom de första molarerna och framtänderna som visade CAL ≥5 mm och PD ≥6 mm och visade ingen>4 tänder förlust på grund av parodontit. Radiografisk benförlust som sträcker sig från koronal till mellersta tredjedelen eller längre. Radiografisk benförlust bestämdes från tanden som visade den mest allvarliga benförlusten i procent av rotlängden. Om värdena för benförlust %/ålder var mellan 0,25 och 1,0, tilldelades patienterna grad B (n=16). Om högre än 1,0 tilldelades patienterna grad C (n=16).

Behandling

Patienter i parodontitgrupperna genomgick kvadrantvis supra och subgingival mekanisk skalning och rothyvling med hjälp av ultraljudsavskiljare och manuella instrument, efter administrering av lokalbedövning. Ingen periodontal intervention utfördes i de parodontalt friska kontrollerna.

Saliv och serumprovtagning

Totalt 5 ml ostimulerad hel saliv samlades in med passiv dregling mellan 9:00 och 10:00. Deltagarna fick rådet att undvika matkonsumtion i tre timmar före provtagning. Deltagarna sattes upprätt och saliv samlades in under en period av 5 minuter med instruktioner om att samla saliv i munbotten och passivt dregla den i en steril glasbägare. Sedan överförs salivprover omedelbart till ett 2 ml polypropenrör och förvaras vid -80°C. Totalt 5 ml blod samlades in från den antecubital fossa genom venpunktionsmetod. Serum isolerades från blodet genom centrifugering vid 5000 rpm under 10 minuter följt av dess snabba överföring till ett sterilt polypropenrör och lagring vid -80°C.

Biomarkörimmunoanalyser Saliv- och serumprover tinades på is. Salivproverna centrifugerades vid 5 000 rpm under 15 minuter vid rumstemperatur och supernatanter användes omedelbart för analyser. Serum- och salivprover av SIRT-1, MMP-9, MIP-1α*, T-SOD mättes med ELISA med användning av kommersiella kit.

Statistisk analys

Alla statistiska analyser utfördes med det standardiserade statistiska mjukvarupaketet. För jämförelser inom gruppen, om data inte var normalfördelade, användes Wilcoxon-signerat rangtest och Dunn-testet med Bonferroni-korrigering för att analysera förändringen mellan baslinje och 3 månader efter behandling. För jämförelser mellan grupper testar Mann-Whitney U för normal- och icke-normalfördelade data. Spearmans rangkorrelationstest användes för att upptäcka korrelationerna mellan biokemiska parametrar med kliniska parametrar och varandras i sjuka grupper före och efter behandling. Alla tester utfördes vid signifikansnivån P <0,05.