Secralin刺激胰腺分泌对胰腺导管腺癌患者ctDNA表达的影响：生物标志物在确定胰管腺癌预后的作用

背景胰腺导管腺癌（PDAC）是一种侵略性的肿瘤疾病，预后较差，存活率较低。 由于其生物学性质，完成早期诊断并因此获得成功的治疗结果通常是一项挑战。

最近，全球许多试验和研究旨在更好地了解肿瘤生物学，并为诊断，疾病监测和开发目标疗法提供新颖的工具。 感兴趣的主题之一恰好是所谓的液体活检。

从这些活检中分离出生物标志物，例如miRNA，肿瘤抑制基因或氨基酸，它们的分析，定量和融合到临床肿瘤学中是一个复杂的问题，高度需要进一步研究。 受试者，材料，方法生物标志物分析的关键先决条件是足够数量的遗传信息。 在我们的研究中，将分析静脉注射促进素对PDAC患者CTDNA释放的影响。 在研究中，PDAC患者的KRAS突变率超过90％，因此，其周围血浆中KRAS突变阳性并计划进行手术治疗的患者将包括在研究中。

然后，在手术的前两个小时内将以特定的间隔收集36例PDAC诊断患者的外周血血浆。 样品中的ctDNA的静脉水平将进行定量。 在手术前和手术后的特定时间间隔，将在患有PDAC的患者中设计和测试一组标准化的生物标志物。 结果将与最小残留疾病，生存率和其他指标相关，以确定疾病的预后。 统计评估将与在生物信息学和生物医学统计中经验丰富的专家合作进行。

介绍：

胰腺导管腺癌（PDAC）是最严重，最具侵略性的恶性疾病，具有不利的预后和高死亡率[1,2]。 PDAC患者的五年生存率为10％，十年生存率为6％[3]。 根据捷克共和国卫生信息和统计研究所的说法，捷克人的PDAC发病率为21.9/100000居民，患病率为23,2/100000居民。 除了对全身化疗的反应不足之外，由于经常无症状的时期，该统计数据还显着导致早期发现该疾病的难度，而治疗方法在诊断时可能会受到显着限制。 手术治疗作为一种潜在的治疗方法的指示显然取决于疾病的既定程度[4]。 目前，全球监测的标记是血清中CA19-9的水平，也与术前和术后预后的确定有关[5]。 但是，由于缺乏对PDAC的足够敏感性和特异性，CA19-9不能归类为具有足够预测值的特定标记[6]。 已经在各种生物材料（血液，尿液，粪便，唾液，胆汁，胰汁等）中提出了超过三百个标记，用于筛查，早期诊断，对治疗和预后，但目前没有一个生物标志物更宽在日常临床实践中应用[6,7]。

根据最近的研究，已经确定了几种生物标志物[6]，具有与预后评估和一般人群筛查的未来使用相关的进一步研究的潜力[6,7,8]早期诊断是早期诊断的关键部分是治疗方案和PDAC的预后改善，因此选择了一组具有巨大临床使用潜力的生物标志物，以分析该项目。 其中之一是来自RAS家族的Kras Protooncogene，该家族经常在PDAC [9、10、11、12]中突变。 突变的KRAS基因将从从患者血浆中分离的CTDNA中检测到静脉刺激前后，静脉内刺激（一种激素），一种激素也负责胰腺分泌[13]。 我们假设促素刺激将增强ctDNA的释放。

因此，在诊断性治疗过程中，突变KRAS，mRNA，miRNA，siRNA，EXORNA，EXORNA，S100蛋白和氨基酸可以成为PDAC监测的有效标志。

目标：

该项目的目的是证明PDAC患者静脉内分泌蛋白刺激对CTDNA释放的增强影响，从而介导了较高的浆液水平的ctDNA水平，可用于进一步分析。 除此之外，在整个治疗过程中，将要分析KRAS突变在CtDNA，mRNA，miRNA，siRNA，ExORNA，ExORNA，S100蛋白和氨基酸的作用一次生活等。

零假设：

静脉内分泌素给药后ctDNA的静脉水平不会显着高于给药前。 手术后手术后的mRNA，miRNA，外源性RNA和S100蛋白的静脉水平不会显着低于手术，并且它们与术后疾病的术后没有任何相关性。

方法和统计评估：

在第一阶段，将选出任何被诊断为PDAC的年龄段的男性和女性患者，并指示进行手术治疗。 考虑到短时间内的多个血液样本收集，分泌素的生理影响以及该过程的逻辑优化，我们决定让指定的手术患者参与其中。

肿瘤重复的患者将被排除在外。 只有签署参与研究的患者才能包括在内。 这些患者的血浆将在门诊期间从外周静脉中收集，并在手术前检查突变的KRAS基因的阳性，并使用变性毛细血管电泳通过异卵形分析进行了杂化基因的阳性。

36例KRAS阳性等离子体样本的患者将定期准备手术。 在外科手术的前两个小时，将应用16微克静脉内促素。 在此期间，对患者的静脉内促毒素给药是安全的，不会干扰胰腺切除的手术阶段。 在距Synectin应用程序的3分钟间隔3x 5分钟的时间内，麻醉人员还将从周围静脉中收集血液样本。 所有血液样本将收集到准备好的采样套件中，而无需进一步的技术处理，将其运送到实验室并进行分析和定量其他候选标记。 在项目的第二阶段中，将根据当前的知识和初步结果建立最有希望的标记面板。 然后，在门诊检查期间手术后的3、6和12个月前，将在术前和术后进行术前和术后的标记水平测试被诊断为PDAC的患者的血浆。 然后，将对结果进行分析和评估，与最小残留疾病，生存率，生活质量和其他标准化指标相关，以监测疾病的预后。 统计评估将与具有丰富经验的专业人士合作，在生物信息学和生物医学统计学方面具有广泛的经验。

结果和意义：

我们的项目将提供有关液体活检和生物标志物分析的系统文献综述，并在被诊断为PDAC的患者中纳入临床肿瘤学。 将分析静脉内给药对PDAC患者ctDNA释放作为创新方法的影响，在这些患者的生物标志物分析中可能会采购大量的遗传信息。 此外，结果和结果将有助于设计一组生物标志物，并评估其在疾病监测和预后评估中的临床意义。