Der Einfluss von Sekretin stimulierte die Pankreassekretion auf die ctDNA -Expression bei Patienten mit Pankreas -Duktaladenokarzinom

Hintergrundpankreas -Duktaladenokarzinom (PDAC) ist eine aggressive onkologische Erkrankung mit einer schlechten Prognose und einer geringen Überlebensrate. Aufgrund seiner biologischen Natur ist es im Allgemeinen schwierig, frühzeitige Diagnostika zu erreichen und daher erfolgreiche therapeutische Ergebnisse zu erzielen.

In jüngster Zeit zielen viele Studien und Studien weltweit ein besseres Verständnis der Tumorbiologie und die Bereitstellung eines neuen Instruments zur Diagnostik, der Überwachung der Krankheit und der Entwicklung einer gezielten Therapie. Eines der interessierenden Themen sind die sogenannten flüssigen Biopsien.

Die Isolierung von Biomarkern wie miRNA, Tumorsuppressorgenen oder Aminosäuren aus diesen Biopsien, deren Analyse, Quantifizierung und Einbau in die klinische Onkologie stellt ein komplexes Problem dar, bei dem weitere Forschung dringend erforderlich ist. Probanden, Materialien, Methoden Eine entscheidende Voraussetzung für die Biomarker -Analyse ist eine ausreichende Menge an genetischen Informationen. In unserer Studie wird die Wirkung der intravenösen Sekretinverabreichung auf die CTDNA -Freisetzung bei Patienten mit PDAC analysiert. Mehr als 90% KRAS -Mutationsrate bei Patienten mit PDAC wurden wissenschaftlich bewiesen, daher werden Patienten mit positiver KRAS -Mutation in ihrem peripheren Blutplasma und für die chirurgische Therapie in die Studie einbezogen.

Das periphere Blutplasma von 36 Patienten mit PDAC -Diagnose wird dann in den ersten zwei Stunden des Betriebs in bestimmten Intervallen gesammelt. Die plasmatischen CTDNA -Spiegel in den Proben werden quantifiziert. Eine standardisierte Gruppe von Biomarkern wird vor der Operation und in bestimmten Intervallen nach der Operation bei Patienten mit PDAC entworfen und getestet. Die Ergebnisse werden in Korrelation mit minimaler Resterkrankung, Überlebensrate und anderen Indikatoren analysiert, um die Prognose der Krankheit zu bestimmen. Die statistische Bewertung erfolgt in Zusammenarbeit mit Spezialisten, die in Bioinformatik und biomedizinischen Statistiken erfahren haben.

Einführung:

Pankreas -Duktaladenokarzinom (PDAC) zählt zu den schwerwiegendsten und aggressivsten bösartigen Erkrankungen mit ungünstiger Prognose und hoher Mortalität [1,2]. Das Überleben von fünf Jahren bei Patienten mit PDAC beträgt 10 % und das Überleben von zehn Jahren 6 % [3]. Nach Angaben des Instituts für Gesundheitsinformationen und Statistiken der Tschechischen Republik beträgt die Inzidenz von PDAC in der Tschechien 21,9/100000 Einwohner, die Prävalenz beträgt 23,2/100000 Einwohner. Neben der unzureichenden Reaktion auf systemische Chemotherapie trägt diese Statistik aufgrund ihrer häufig asymptomatischen Periode auch signifikant zur Schwierigkeit des Früherkennung der Krankheit bei, während die Behandlungsmethoden zum Zeitpunkt der Diagnose signifikant begrenzt sein können. Der Hinweis auf eine chirurgische Behandlung als potenziell kurative Methode hängt eindeutig vom festgelegten Ausmaß der Krankheit ab [4]. Derzeit ist der weltweit überwachte Marker das Niveau von CA19-9 im Serum, auch in Bezug auf die Bestimmung der präoperativen und postoperativen Prognose [5]. Aufgrund des Mangels an ausreichender Empfindlichkeit und Spezifität für PDAC kann CA19-9 jedoch nicht als spezifischer Marker mit ausreichendem Vorhersagewert klassifiziert werden [6]. In verschiedenen biologischen Material Anwendung in der täglichen klinischen Praxis [6,7].

Nach jüngsten Studien wurden mehrere Biomarker [6] mit einem hohen Potenzial für weitere Untersuchungen in der Korrelation mit der Bewertung der Prognose und zukünftiger Verwendung beim Screening in der Allgemeinbevölkerung [6,7,8] identifiziert Behandlungsoptionen und die Prognoseverbesserung bei PDAC, daher wurde eine Reihe von Biomarkern mit einem signifikanten Potenzial für den praktischen klinischen Einsatz ausgewählt, damit dieses Projekt analysiert wurde. Eines davon ist KRAS -Protoonkogen aus der RAS -Familie, das häufig in PDAC mutiert ist [9, 10, 11, 12]. Das mutierte KRAS -Gen steht kurz vor der von der Plasma des Patienten vor und nach intravenösen Stimulation isolierten ctDNA mit Sekretin, einem Hormon, das auch für die Pankreassekretion verantwortlich ist [13]. Wir nehmen an, dass die Sekretinstimulation die Freisetzung von ctDNA potenzieren wird.

Die Analyse von mutierten KRAS, mRNA, miRNA, siRNA, Exorna, S100 -Proteinen und Aminosäuren könnte daher zu einem effizienten Kennzeichen bei der PDAC -Überwachung während des diagnostischen therapeutischen Prozesses werden.

Ziele:

Ziel dieses Projekts ist es, den potenzierenden Einfluss der intravenösen Sekretinstimulation auf die ctDNA -Freisetzung bei Patienten mit PDAC zu beweisen und dadurch höhere plasmatische CTDNA -Spiegel zu vermitteln, die möglicherweise für die weitere Analyse verwendet werden kann. Außerdem wird die Rolle der KRAS -Mutation in CtDNA, mRNA, miRNA, siRNA, Exorna, S100 -Proteinen und Aminosäuren im gesamten therapeutischen Prozess analysiert, um die Korrelation der Markerspiegel mit den standardisierten Indikatoren für die Lebenserwartung, Qualität, Qualität zu überwachen des Lebens usw. zu einer Zeit.

Zero Hypothese:

Das plasmatische Niveau von ctDNA nach intravenöser Sekretinverabreichung wird nicht signifikant höher sein als vor der Verabreichung. Die plasmatischen Spiegel von mRNA, miRNA, exogener RNA und S100 -Proteinen sind nach der Operation nicht signifikant niedriger als vor der Operation und zeigen keine Korrelation mit dem postoperativen Verlauf der Krankheit.

Methodik und statistische Bewertung:

In der ersten Phase werden sowohl männliche als auch weibliche Patienten in jedem Altersbereich, bei dem PDAC diagnostiziert und für eine chirurgische Therapie angezeigt wird, ausgewählt. In Anbetracht mehrerer Blutprobensammlungen in kurzer Zeit, der physiologischen Auswirkungen von Sekretin und logistischer Optimierung des Prozesses haben wir beschlossen, die für die Operation angegebenen Patienten einzubeziehen.

Patienten mit Tumor Duplizität werden ausgeschlossen. Nur die Patienten mit unterschriebener Zustimmung zur Teilnahme an der Studie werden einbezogen. Das Blutplasma dieser Patienten wird während eines ambulanten Besuchs vor der Operation aus einer peripheren Vene gesammelt und auf die Positivität des mutierten KRAS -Gens mit Heteroduplex -Analyse unter Verwendung der denaturierenden Kapillarelektrophorese getestet.

36 Patienten mit KRAS -positiver Plasmaprobe werden dann routinemäßig für die Operation vorbereitet. In den ersten zwei Stunden des chirurgischen Eingriffs werden 16 Mikrogramm intravenöses Sekretin angewendet. Während dieser Zeit ist die intravenöse Sekretinverabreichung an den Patienten sicher und stört die chirurgische Phase der Pankreasresektion nicht. Im Intervall von 3 Minuten und 3x 5 Minuten von der Sekretin -Anwendung werden auch von der Anästhesie -Personal Blutproben aus der peripheren Vene entnommen. Alle Blutproben werden in die vorbereiteten Probenahmungskits gesammelt, ohne dass eine weitere technische Verarbeitung erforderlich ist, zum Labor transportiert und für die Analyse und Quantifizierung von CTDNA -Ant -anderen Kandidatenmarkern unterzogen werden. In der zweiten Phase des Projekts werden die vielversprechendsten Marker -Panels auf der Grundlage des aktuellen Wissens und der vorläufigen Ergebnisse festgelegt. Blutplasma der mit PDAC diagnostizierten Patienten, die für die chirurgische Therapie angezeigt werden, werden dann vor der Entlassung vor der Entlassung vor der Entlassung vor der Entlassung 3, 6 und 12 Monate nach der Operation während der ambulanten Untersuchung auf die Markerspiegel getestet. Die Ergebnisse werden dann in Korrelation mit minimaler Resterkrankung, Überlebensrate, Lebensqualität und anderen standardisierten Indikatoren zur Überwachung der Prognose der Krankheit statistisch analysiert und statistisch bewertet. Die statistische Bewertung wird in Zusammenarbeit mit Spezialisten mit einer breiten Erfahrung in Bioinformatik und biomedizinischen Statistiken realisiert.

Ergebnisse und Bedeutung:

Unser Projekt wird eine systematische Literaturrecherche in Bezug auf flüssige Biopsie und Biomarker -Analyse sowie deren Einbau in die klinische Onkologie bei Patienten mit PDAC bieten. Die Wirkung der intravenösen Verabreichung von Sekretin auf die CTDNA -Freisetzung auf Patienten mit PDAC als innovative Methode wird analysiert, wodurch bei diesen Patienten möglicherweise eine signifikant größere Menge genetischer Informationen für die Biomarker -Analyse erfasst wird. Darüber hinaus werden die Ergebnisse und das Ergebnis dazu beitragen, eine Gruppe von Biomarkern zu entwerfen und ihre klinischen Implikation bei der Überwachung der Krankheit und der Prognose zu bewerten.