Ph2 NK buňky obohacené DCI s RLR9 agonistou, DUK-CPG-001 od dárců po alogenní SCT (NK-DCI)

Toto je randomizovaná, paralelní studie fáze II, která má vyhodnotit míru přežití bez progrese a nepřijatelnou toxicitu u pacientů, kteří dostávají infuze lymfocytů dárců obohacených NK buňkami (DLI), když jsou podávány samostatně nebo s agonistou TLR9, DUK-CPG-001, od 7-8/8 HLA-shodného příbuzného nebo nepříbuzného dárce (Kohorta A) nebo 4-6/8 HLA-shodného příbuzného dárce (Kohorta B) po snížené intenzitě nebo neablativní alogenní transplantaci kmenových buněk. Randomizace bude stratifikována podle typů onemocnění (myeloidní versus lymfoidní malignity).

Pacient před zahájením léčby Do 21 dnů před zahájením léčby bude u pacientů provedena aktualizovaná anamnéza a fyzikální vyšetření, laboratorní testy, odběr stolice a těhotenský test, pokud je pacientkou žena ve fertilním věku. Pacienti budou mít uloženou krev nebo dřeň pro analýzu imunitních funkcí a chimérismu. Při vstupu do studie jsou také vyžadovány testy dokumentující stav onemocnění pacienta (aspirace/biopsie kostní dřeně, krevní studie a/nebo radiografické testy, jako jsou CT, MRI, PET skeny, jak stanoví ošetřující lékař, a jak je požadováno pro standardizované hodnocení odezvy) .

Aferéza dárců a zpracování buněk Dárci se vrátí do centra pro čerstvý odběr NK buněk a nebudou potřebovat mobilizaci růstového faktoru. Pro každou infuzi NK buněk bude použit jeden odběr. Buňky budou transfuzovány ihned po odběru a zpracování nebo následující den. Zpracování buněk bude provedeno v naší kryokonzervační laboratoři podle SOP pro odběr, značení a manipulaci. Buňky budou selektovány NK pomocí protilátky CD56 (CliniMACS CD56 Reagent), přístroje CliniMACSplus a sady hadiček CliniMACS poskytnuté společností Miltenyi Biotec za použití firemního protokolu (Miltenyi Biotec Inc, Auburn, California). Bude proveden počet buněk před a po zpracování, životaschopnost, test hematopoetických progenitorových buněk (HPCA) a průtoková analýza na SOP.

Hodnocení pacienta Hodnocení onemocnění bude používat standardizovaná kritéria a bude zahrnovat pečlivé vyšetření studií potřebných k detekci onemocnění (PET, rentgenové snímky, imunofenotyp, kostní dřeň, molekulární studie atd.). Restaging může být změněn podle uvážení transplantačního lékaře sledujícího pacienta (což jsou všichni subinvestigátoři v této studii), pokud má pacient pocit, že postupuje před těmito časovými body, ale doporučené restaging je q3 měsíce po dobu 1 roku po poslední NK- obohacené DLI, každých 6 měsíců po dobu dalších 2 let, poté podle klinické indikace. Studie imunitní rekonstituce před a 1 a 7 dní po každém DLI obohaceném NK buňkami a 3, 6 a 12 měsíců po posledním DLI obohaceném o NK. Stanovení chimerismu (krátkou tandemovou opakovanou analýzou používanou v naší laboratoři DUKE HLA s 2% citlivostí) těsně před každým DLI obohaceným o NK buňky a 3, 6, 12 měsíců po posledním DLI obohaceném o NK.

Toxicita bude formálně hodnocena po infuzi a o týden později (více podle určení léčebného týmu) a minimálně každý druhý týden po dobu 6 týdnů po infuzi, poté q3 měsíce počínaje 3 měsíci po druhém DLI pro první rok. Hodnocení zahrnuje anamnézu (specifickou pro GI toxicitu i celkové nové problémy), fyzikální vyšetření, CBC, jaterní testy (AST, ALT, bilirubin minimálně) a Chemistry CS pro zahrnutí kreatininu a BUN pro hodnocení toxicity podle společné NCI kritéria toxicity (verze 4) a standardní kritéria GVHD (příloha I). Pokud má pacient toxicitu způsobenou transplantačními nebo infuzními postupy, bude nutné další sledování podle potřeby. Pacienti se stupněm toxicity 3 nebo vyšším v důsledku studie budou sledováni minimálně každý druhý týden, dokud toxicita nebude < stupeň 3, a poté budou považováni za klinicky vhodné.

Odběr stolice a analýza mikrobiomu:

Vzorky stolice budeme od pacientů odebírat v následujících časových bodech v průběhu studie: před DLI, den +7, před druhým DLI, den +7, poté každé 3 měsíce po DLI po dobu jednoho roku. Vzorky stolice od pacientů mohou být skladovány při 4 °C po dobu až 24 hodin před zmrazením při -80 °C pro dávkovou analýzu.

Infuze NK buněk pacienta a plán podávání CpG Cílová buněčná dávka pro DLI obohacené NK buňkami bude tolik buněk, kolik bude možné shromáždit s méně než 0,5 x 106 CD3+ CD56- buněk/kg hmotnosti pacienta v 4-6/8 HLA- odpovídající související nastavení a 1 x 106 CD3+ CD56- buněk/kg hmotnosti pacienta v 7-8/8 HLA odpovídající související nebo nesouvisející nastavení. První DLI obohacený NK buňkami bude podáván jeden až šest měsíců po transplantaci. Druhá DLI obohacená NK buňkami bude podána jeden až tři měsíce po první infuzi u pacientů, kteří mají < stupeň II aGVHD v době infuze a neměli nepřijatelnou toxicitu, která by alespoň možná souvisela s předchozí DLI a vymizela do stupně 1 nebo méně. Druhá DLI NEBUDE podávána pacientovi s aGVHD ≥ III. stupně v době infuze nebo nepřijatelnými toxicitami, které by alespoň mohly souviset s první infuzí. Pokud mají pacienti GVHD a byli na imunosupresivní léčbě při vstupu do studie, budou pacienti pokračovat ve své stabilní dávce imunosupresivních látek, která byla zahájena pro léčbu akutní GVHD před DLI obohaceným NK buňkami, a nebude se snižovat dříve než 6 týdnů po každé NK DLI obohacené o buňky (pokud progrese onemocnění nebo toxicita pro pacienta z látek nevyžadují dřívější snižování). Dárcovské NK buňky budou infuzovány po dobu 30 minut. Před každou reinfuzí se použije difenhydramin 25 mg iv nebo po a acetaminofen 650 mg po, pokud pacient nemá v anamnéze alergie nebo kontraindikaci, v takovém případě bude použit hydrokortison 50 mg iv.

Tyto buňky jsou infundovány do pacienta periferní intravenózní linkou nebo centrální linkou. Objeví-li se známky GVHD po DLI obohaceném NK buňkami, lze zahájit léčbu imunosupresivy (prednison, cyklosporin, takrolimus a/nebo mykofenolát preferované první volby).