Tato stránka byla automaticky přeložena a přesnost překladu není zaručena. Podívejte se prosím na anglická verze pro zdrojový text.

Infekce a nevysvětlitelná neplodnost

26. června 2018 aktualizováno: Giuseppe Lo Monte, University Hospital of Ferrara

Prognostické markery u žen s primární nevysvětlitelnou neplodností

  1. Pozadí: U žen je nevysvětlitelná neplodnost spojena s řadou buněčných a molekulárních defektů endometria, nepříznivými imunitními reakcemi a imunologickými faktory. Jsou zahrnuty přirozené zabíječské (NK) buňky, protože tvoří nejhojnější populaci leukocytů v decidua. Zatímco NK buňky decidua byly rozsáhle zkoumány, studium endometriálních eNK buněk stále postrádá komplexní výzkumy. Snížení frekvence eNK bylo spojeno se stavem neplodnosti, zejména v přítomnosti souběžné herpesvirové virémie. Vzhledem k tomu, že herpesviry používají jako imunitní únikové molekuly HLA-G a HLA-E, které jsou imunoinhibiční a důležité pro správnou placentu, mohou představovat kofaktory neplodnosti.
  2. Cíl: Vzhledem k tomu, že nedostatek přesné diagnózy v reprodukční medicíně vede k selhání léčby, zaměřuje se tento návrh na charakterizaci buněk eNK jako diagnostického faktoru pro nevysvětlenou ženskou neplodnost. Budeme hodnotit také kofaktory s ohledem na infekci herpesvirem a expresi HLA-G a HLA-E.
  3. Metody: NK buňky periferní krve a endometria budou imunofenotypizovány a počet buněk a stav aktivace (CD107a, IL-6, IL-10, IL-17) budou korelovány se stavem neplodnosti. Implikace herpesviru bude hodnocena analýzou DNA ze vzorků periferní krve a endometriálních výplachů pomocí HSV-1, HSV-2, EBV, CMV, HHV-6, HHV-7, VZV a HHV-8 specifických primerů a PCR techniky. Exprese HLA-G a HLA-E bude analyzována v periferní krvi a endometriálním prostředí pomocí průtokové cytometrie a ELISA testů a korelována pomocí NK buněčné exprese jejich receptorů (KIRs, LILRB1/2, NKG2A).
  4. Očekávané výsledky: Na základě našich předběžných výsledků očekáváme identifikaci NK buněk jako prognostického markeru primární nevysvětlitelné neplodnosti s herpesvirovou infekcí a expresí HLA-G a HLA-E jako kofaktory. Tyto údaje budou důležité při léčbě neplodných žen.

Přehled studie

Postavení

Postavení

Označuje aktuální stav náboru nebo stav rozšířeného přístupu.
Dokončeno

Podmínky

Podmínky

Nemoc, porucha, syndrom, nemoc nebo zranění, které je studováno. Na webu ClinicalTrials.gov mohou podmínky zahrnovat i další problémy související se zdravím, jako je délka života, kvalita života a zdravotní rizika.

Intervence / Léčba

Intervence / Léčba

Proces nebo akce, na které se klinická studie zaměřuje. Intervence zahrnují léky, zdravotnická zařízení, postupy, vakcíny a další produkty, které jsou buď zkoušené nebo již dostupné. Intervence mohou také zahrnovat neinvazivní přístupy, jako je edukace nebo úprava stravy a cvičení.

Detailní popis

Primární cíl Hlavním úkolem tohoto projektu je definovat potenciální roli NK buněk jako prognostického markeru primární nevysvětlitelné neplodnosti. K dosažení tohoto cíle provedeme prospektivní studii na kohortě 100 neobjasněných neplodných žen. NK buňky periferní krve a endometria budou imunofenotypizovány a bude analyzován stav jejich aktivace. Mezitím bude vyhodnocena přítomnost herpesvirové infekce v periferní krvi a korelována s výsledky NK analýzy. Tato data objasní roli NK buněk v neplodných ženských stavech a vyhodnotí implikaci herpesvirové infekce jako kofaktoru pro stav NK buněk. Tato data poskytnou důkaz principu použití analýzy NK buněk jako prediktivního markeru nevysvětlitelné neplodnosti.

Sekundární cíl Sekundárním cílem je vyhodnotit mechanismy na základě stavu NK buněk při neplodnosti. Vzhledem k tomu, že exprese HLA-G a HLA-E je modifikována herpesvirovou infekcí (9), jako imunitním únikovým mechanismem, a tyto antigeny jsou zodpovědné za správnou implantaci embrya (14), budeme analyzovat hladiny těchto molekul v periferní krvi a endometriální prostředí. Mezitím budou analyzovány genetické polymorfismy HLA-G a HLA-E. Tyto výsledky budou korelovány s přítomností herpesvirové infekce, expresí KIR, LILRB a NKG2A receptorů na buňkách pNK a eNK. Tato data objasní implikaci exprese HLA-G a HLA-E a genetického pozadí v kontrole aktivace NK buněk a herpesvirové infekce u neplodných žen.

Dosažení těchto cílů bude dosaženo pomocí 6 pracovních balíčků/cílů (WP)

  1. Charakterizace neplodných žen (WP1) (1-20 měsíců) Přijmeme 100 neobjasněných neplodných žen a 30 kontrolních žen. Tyto ženy budou klinicky hodnoceny a vytvoří se klinická databáze. Od každé ženy odebereme vzorky periferní krve, biopsie endometria a výplach dělohy.
  2. Imunitní fenotyp NK buněk (WP2) (1-20 měsíců) NK buňky z periferní krve a endometria budou analyzovány na procenta podtypů (CD56, CD16, CD9, CD49a) a na expresi KIR, LILRB-1 a -2 a CD94/NKG2A receptory, o kterých je známo, že interagují s molekulami HLA-G a HLA-E produkujícími inhibiční signály.
  3. Th1, Th2, Th17 a LIF (WP3). (1-20 měsíců) Hladiny Th1, Th2, Th17 a LIF budou analyzovány ve vzorcích plazmy a výplachů dělohy, aby se vyhodnotil stav aktivace. Výsledky budou korelovány s počtem NK buněk.
  4. Herpesvirová infekce (WP4) (12-24. měsíc) Přítomnost herpesvirové DNA (HSV-1, HSV-2, EBV, CMV, HHV-6, HHV-7, VZV a HHV-8) bude analyzována v periferní krvi a výplachu dělohy.
  5. HLA-G (WP5) (12-24 měsíců) Molekuly HLA-G jsou exprimovány jako membránové (HLA-G1) i rozpustné (HLA-G5, z alternativního sestřihu mRNA; sHLA-G1, z odlupování membrány) molekuly. Exprese membrány a rozpustného HLA-G bude hodnocena v periferní krvi a endometriu. Exprese HLA-G je řízena polymorfismem inzerce/delece (ins/del) 14 párů bází (rs66554220), kde delece 14bp stabilizuje mRNA produkující vyšší hladiny HLA-G (15). Budeme genotypovat ženy na polymorfismus rs66554220, abychom vyhodnotili implikaci v hladinách exprese HLA-G v neplodném stavu.
  6. HLA-E (WP6) (12-24mth) HLA-E molekuly jsou exprimovány jako membránové i rozpustné molekuly. Exprese membrány a rozpustného HLA-E bude hodnocena v periferní krvi a endometriu. Byly identifikovány dvě nesynonymní alely HLA-E, HLA-ER (E*0101) a HLA-EG (E*0103) (16), kde exprese HLA-E proteinu EG byla vyšší než ER. Budeme genotypovat ženy na HLA-E polymorfismy, abychom vyhodnotili implikaci v neplodnosti.

Typ studie

Typ studie

Popisuje povahu klinické studie. Typy studií zahrnují intervenční studie (také nazývané klinické studie), observační studie (včetně registrů pacientů) a rozšířený přístup.
Pozorovací

Zápis (Aktuální)

Zápis

Počet účastníků klinické studie. „Očekávaný“ zápis je cílový počet účastníků, které výzkumníci pro studii potřebují.
143

Kritéria účasti

Výzkumníci hledají lidi, kteří odpovídají určitému popisu, kterému se říká kritéria způsobilosti. Některé příklady těchto kritérií jsou celkový zdravotní stav osoby nebo předchozí léčba.

Kritéria způsobilosti

Kritéria způsobilosti

Klíčové požadavky, které musí lidé, kteří se chtějí zúčastnit klinické studie, splňovat nebo vlastnosti, které musí mít. Kritéria způsobilosti se skládají jak z kritérií pro zařazení (která jsou vyžadována pro účast osoby ve studii), tak z kritérií vyloučení (která brání osobě v účasti). Typy kritérií způsobilosti zahrnují, zda studie přijímá zdravé dobrovolníky, má požadavky na věk nebo věkovou skupinu nebo je omezena pohlavím.

Věk způsobilý ke studiu

21 let až 38 let (Dospělý)

Přijímá zdravé dobrovolníky

Ne

Pohlaví způsobilá ke studiu

Ženský

Metoda odběru vzorků

Vzorek nepravděpodobnosti

Studijní populace

Půjde o prospektivní neintervenční klinickou studii založenou na biologických vzorcích odebraných během současné standardní klinické praxe. Na základě našich předběžných výsledků zapíšeme 100 neplodných a 30 kontrolních žen, abychom dosáhli mocniny 0,8 s 5% chybou alfa při detekci rozdílů mezi neplodnými a fertilními ženami.

Popis

Kritéria pro zařazení do studijní skupiny:

  • 21-38 let,
  • primární neplodnost (žádný živě narozený),
  • pravidelný menstruační cyklus (24-35 dní),
  • index tělesné hmotnosti (BMI) ≤ 25, FSH <10 mUI/ml,
  • E2 < 50 pg/ml v den 2-3 menstruačního cyklu. Nábor při přijetí k posouzení průchodnosti vejcovodů.

Kritéria pro zařazení do kontrolní skupiny:

  • 21-35 let,
  • téměř jeden živě narozený,
  • pravidelný menstruační cyklus (24-35 dní),
  • BMI ≤ 25, FSH <10 mUI/ml,
  • E2 < 50 pg/ml v den 2-3 menstruačního cyklu

Kritéria vyloučení:

  • endometritida,
  • endometrióza,
  • tubární faktor,
  • ovulační dysfunkce,
  • anatomické děložní patologie.

Studijní plán

Tato část poskytuje podrobnosti o studijním plánu, včetně toho, jak je studie navržena a co studie měří.

Jak je studie koncipována?

Detaily designu

  • Observační modely: Kohorta
  • Časové perspektivy: Budoucí

Kohorty a intervence

Skupina / kohorta

Skupina / kohorta

Skupina nebo podskupina účastníků pozorovací studie, která je hodnocena z hlediska biomedicínských nebo zdravotních výsledků.
Intervence / Léčba

Intervence / Léčba

Proces nebo akce, na které se klinická studie zaměřuje. Intervence zahrnují léky, zdravotnická zařízení, postupy, vakcíny a další produkty, které jsou buď zkoušené nebo již dostupné. Intervence mohou také zahrnovat neinvazivní přístupy, jako je edukace nebo úprava stravy a cvičení.
Neplodné ženy
Kritéria pro zařazení do studijní skupiny budou následující: 21–38 let, primární neplodnost (žádný živý porod), pravidelný menstruační cyklus (24–35 dní), index tělesné hmotnosti (BMI) ≤ 25, FSH <10 mUI/ml , E2 < 50 pg/ml v den 2-3 menstruačního cyklu. Při přijetí budou přijati k posouzení průchodnosti vejcovodů.
Diagnostický test: Analýza NK buněk

Rozhodli jsme se provést studii během proliferativní fáze (den 9-11), kdy jsou v endometriu přítomny pouze rezidentní eNK buňky. Vzorky budou analyzovány následujícími metodami, které se běžně používají v OU ​​návrhu:

- Analýza pNK buněk: PBMC budou purifikovány roztokem Ficoll a NK buňky budou analyzovány průtokovou cytometrií (FacsVantage, BD) s anti-CD56, CD16, CD9, CD49a, KIRs, LILRB1, LILRB2, CD94, CD107a eNK buněčnou analýzou: eNK buňky budou získány z endometriálních biopsií během proliferativní fáze, stanoveny ultrazvukovým skenem a analyzovány na subtypy NK buněk a KIR, LILRB1, LILRB2, CD94, CD107a expresi průtokovou cytometrií

Diagnostický test: Detekce herpesviru
Detekce herpesviru: DNA bude analyzována specifickými primery pro HSV-1, HSV-2, EBV, CMV, HHV-6, HHV-7, VZV a HHV-8, s PCR a nested PCR
Diagnostický test: sHLA-G analýza
Analýza sHLA-G: Kvantifikace sHLA-G v plazmě a výplachu endometria bude provedena metodou ELISA s použitím anti-HLA-G (G233) a anti-beta2-mikroglobulinu HRP-konjugovaných moAb (Exbio)
Diagnostický test: Typizace HLA-G 14bp INS/DEL
Genomová DNA bude genotypována pomocí RealTime PCR
Diagnostický test: sHLA-E analýza
Analýza sHLA-E: Kvantifikace sHLA-E v plazmě a výplachu endometria bude provedena metodou ELISA s použitím anti-HLA-E (3D12, eBioscience) a anti-beta2-mikroglobulinu HRP-konjugovaných moAb (Exbio)
Plodné ženy
Kritéria pro zařazení do kontrolní skupiny budou následující: 21–35 let, téměř jeden živý porod, pravidelný menstruační cyklus (24–35 dní), BMI ≤ 25, FSH <10 mUI/ml, E2 < 50 pg/ml za den 2-3 menstruačního cyklu. Ženy s endometritidou, endometriózou, tubárním faktorem, ovulační dysfunkcí, anatomickými děložními patologiemi budou vyloučeny.
Diagnostický test: Analýza NK buněk

Rozhodli jsme se provést studii během proliferativní fáze (den 9-11), kdy jsou v endometriu přítomny pouze rezidentní eNK buňky. Vzorky budou analyzovány následujícími metodami, které se běžně používají v OU ​​návrhu:

- Analýza pNK buněk: PBMC budou purifikovány roztokem Ficoll a NK buňky budou analyzovány průtokovou cytometrií (FacsVantage, BD) s anti-CD56, CD16, CD9, CD49a, KIRs, LILRB1, LILRB2, CD94, CD107a eNK buněčnou analýzou: eNK buňky budou získány z endometriálních biopsií během proliferativní fáze, stanoveny ultrazvukovým skenem a analyzovány na subtypy NK buněk a KIR, LILRB1, LILRB2, CD94, CD107a expresi průtokovou cytometrií

Diagnostický test: Detekce herpesviru
Detekce herpesviru: DNA bude analyzována specifickými primery pro HSV-1, HSV-2, EBV, CMV, HHV-6, HHV-7, VZV a HHV-8, s PCR a nested PCR
Diagnostický test: sHLA-G analýza
Analýza sHLA-G: Kvantifikace sHLA-G v plazmě a výplachu endometria bude provedena metodou ELISA s použitím anti-HLA-G (G233) a anti-beta2-mikroglobulinu HRP-konjugovaných moAb (Exbio)
Diagnostický test: Typizace HLA-G 14bp INS/DEL
Genomová DNA bude genotypována pomocí RealTime PCR
Diagnostický test: sHLA-E analýza
Analýza sHLA-E: Kvantifikace sHLA-E v plazmě a výplachu endometria bude provedena metodou ELISA s použitím anti-HLA-E (3D12, eBioscience) a anti-beta2-mikroglobulinu HRP-konjugovaných moAb (Exbio)

Co je měření studie?

Primární výstupní opatření

Primární výstupní opatření

V protokolu klinické studie je plánovaná výsledná míra, která je nejdůležitější pro hodnocení účinku intervence/léčby. Většina klinických studií má jedno primární měřítko výsledku, ale některé mají více než jedno.
Měření výsledku
Popis opatření
Časové okno
Prognostická hodnota NK buněk u ženské idiopatické neplodnosti
Časové okno: 20 měsíců
Procento (e)NK CD56brightCD16-
20 měsíců
Detekce herpesviru
Časové okno: 16 měsíců
Přítomnost infekce HHV v buňkách endometria
16 měsíců

Sekundární výstupní opatření

Sekundární výstupní opatření

V protokolu klinické studie jde o plánované měřítko výsledku, které není tak důležité jako primární měřítko výsledku pro hodnocení účinku intervence, ale je stále zajímavé. Většina klinických studií má více než jedno sekundární měřítko výsledku.
Měření výsledku
Popis opatření
Časové okno
Hladiny sHLA-G a sHLA-E buňky pNKe eNK
Časové okno: 16 měsíců
Hladiny sHLA-G a sHLA-E ve vzorcích z výplachů dělohy
16 měsíců
Genetické polymorfismy HLA-G a HLA-E
Časové okno: 10 měsíců
Frekvence genetických polymorfismů HLA-G a HLA-E
10 měsíců
Hladiny cytokinů ve vzorcích z výplachu endometria
Časové okno: 10 měsíců
Hladiny Th1 a Th2 cytokinů
10 měsíců

Spolupracovníci a vyšetřovatelé

Zde najdete lidi a organizace zapojené do této studie.

Sponzor

Sponzor

Organizace nebo osoba, která iniciuje studii a která má autoritu a kontrolu nad studií.
University Hospital of Ferrara

Vyšetřovatelé

Vyšetřovatelé

Výzkumník zapojený do klinické studie. Související pojmy zahrnují hlavní řešitel, dílčí řešitel, vedoucí studie, vedoucí studie a hlavní řešitel studie.
  • Vrchní vyšetřovatel: Giuseppe Lo Monte, M.D., Università di Ferarra

Publikace a užitečné odkazy

Osoba odpovědná za zadávání informací o studiu tyto publikace poskytuje dobrovolně. Mohou se týkat čehokoli, co souvisí se studiem.

Obecné publikace

Termíny studijních záznamů

Tato data sledují průběh záznamů studie a předkládání souhrnných výsledků na ClinicalTrials.gov. Záznamy ze studií a hlášené výsledky jsou před zveřejněním na veřejné webové stránce přezkoumány Národní lékařskou knihovnou (NLM), aby se ujistily, že splňují specifické standardy kontroly kvality.

Hlavní termíny studia

Začátek studia (Aktuální)

Začátek studia

Skutečné datum, kdy byl první účastník zařazen do klinické studie. „Očekávané“ datum zahájení studie je datum, o kterém si vědci myslí, že bude datem zahájení studie.
1. listopadu 2014

Primární dokončení (Aktuální)

Primární dokončení

Datum, kdy byl poslední účastník klinické studie vyšetřen nebo obdržel intervenci ke sběru konečných dat pro primární měření výsledku. Zda byla klinická studie ukončena podle protokolu nebo byla ukončena, toto datum neovlivňuje. U klinických studií s více než jedním primárním výstupním měřením s různými daty dokončení se tento termín vztahuje k datu, kdy je dokončen sběr dat pro všechna primární výsledná měření. „Očekávané“ datum primárního dokončení je datum, o kterém si vědci myslí, že bude primárním datem dokončení studie.
1. listopadu 2015

Dokončení studie (Aktuální)

Dokončení studie

Datum, kdy byl poslední účastník klinické studie vyšetřen nebo dostal intervenci/léčbu za účelem shromáždění konečných dat pro měření primárního výsledku, sekundárního měření výsledku a nežádoucí příhody (tj. poslední návštěva posledního účastníka). „Očekávané“ datum dokončení studie je datum, o kterém si vědci myslí, že bude datem dokončení studie.
1. listopadu 2016

Termíny zápisu do studia

První předloženo

První předloženo

Datum, kdy zadavatel studie nebo zkoušející poprvé předložil záznam studie na ClinicalTrials.gov. Mezi prvním odeslaným datem a dostupností záznamu na ClinicalTrials.gov (první zveřejněné datum) je obvykle několik dní.
4. června 2018

První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality

První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality

Datum, kdy zadavatel studie nebo zkoušející poprvé předloží záznam studie, který je v souladu s kritérii kontroly kvality (QC) Národní lékařské knihovny (NLM). Sponzor nebo zkoušející může potřebovat revidovat a předložit záznam studie jednou nebo vícekrát, než budou splněna kritéria kontroly kontroly kvality NLM. Je odpovědností sponzora nebo zkoušejícího zajistit, aby byl záznam studie v souladu s kritérii kontroly kontroly kvality NLM.
26. června 2018

První zveřejněno (Aktuální)

První zveřejněno

Datum, kdy byl záznam studie poprvé k dispozici na webu ClinicalTrials.gov poté, co byla dokončena kontrola kontroly kvality (QC) National Library of Medicine (NLM). Mezi datem, kdy zadavatel studie nebo zkoušející předložil záznam studie, a prvním zveřejněným datem je typicky několik dní zpoždění.
10. července 2018

Aktualizace studijních záznamů

Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)

Poslední zveřejněná aktualizace

Nejnovější datum, kdy byly změny záznamu studie zpřístupněny na ClinicalTrials.gov. Mezi okamžikem, kdy byly změny odeslány na ClinicalTrials.gov sponzorem nebo zkoušejícím studie (datum poslední předložení aktualizace), a datem zveřejnění poslední aktualizace může nastat zpoždění.
10. července 2018

Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality

Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality

Nejnovější datum, kdy zadavatel studie nebo zkoušející předložil změny záznamu studie, které jsou v souladu s kritérii kontroly kvality (QC) National Library of Medicine (NLM). Je odpovědností sponzora nebo zkoušejícího zajistit, aby byl záznam studie v souladu s kritérii kontroly kontroly kvality NLM.
26. června 2018

Naposledy ověřeno

Naposledy ověřeno

Nejnovější datum, kdy zadavatel studie nebo zkoušející potvrdil informace o klinické studii na webu ClinicalTrials.gov jako přesné a aktuální. Pokud jde o studii s náborovým statusem náboru; ještě nenabírá nábor; nebo aktivní, nebyl nábor potvrzen během posledních 2 let, status náboru studie je uveden jako neznámý.
1. června 2018

Více informací

Termíny související s touto studií

Klíčová slova

Další relevantní podmínky MeSH

Další identifikační čísla studie

Další identifikační čísla studie

Identifikátory nebo ID čísla jiná než číslo NCT, které klinické studii přiděluje zadavatel studie, financující subjekty nebo jiní. Tato čísla mohou zahrnovat jedinečné identifikátory z jiných registrů studií a čísla grantů National Institutes of Health.
  • PRUAlGR-2013-00000084

Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)

Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?

Ne

Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty

Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA

Ne

Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA

Ne

Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .

Nastavení souborů cookie

Používáme cookies, abychom zajistili, že vám poskytneme nejlepší zážitek z našich webových stránek. Pro více informací si pečlivě přečtěte naše Zásady ochrany osobních údajů a cookies. ...>>>Svou preference můžete kdykoli změnit nebo svůj souhlas odvolat odstraněním cookies z vašeho webu nebo počítače, jak je popsáno v zásadách. Přijměte to a vyberte své předvolby zaškrtnutím příslušných polí v části „Správa nastavení“ níže. Než budete pokračovat v používání jakékoli části tohoto webu, pozorně si prosím přečtěte naše Podmínky služby.
«Spravovat nastavení