Vliv dusičnanů ve stravě na krevní tlak, citlivost na inzulín a vaskulární funkci u diabetu 2.

Dvojitě zaslepená, randomizovaná placebem kontrolovaná studie s křížovým designem srovnávajícím účinek šťávy z červené řepy (bohaté na dusičnany) s placebem (šťava z červené řepy ochuzené o dusičnany) na krevní tlak, endoteliální funkci a citlivost na inzulín u subjektů s diabetem 2. typu. Subjektům ve zdravém věku bude změřen krevní tlak.

Plán vyšetřování: Měření výsledků studie.

Krevní tlak měřen pomocí ambulantního monitorování krevního tlaku (Spacelabs) po dobu 24 hodin.

Rychlost vylučování albuminu v moči: ve vzorcích přes noc za použití standardních technik radioimunologického testu.

Vylučování dusičnanů močí bude použito jako měřítko adherence a bude měřeno pomocí testu HPLC nedávno vyvinutého v St. Luke's v laboratoři profesora Winyarda.

Mikrovaskulární endoteliální funkce hodnocená iontoforézou vazodilatátoru závislého na endotelu (acetylcholin, ACh) a nezávislého (nitroprusid sodný, SNP) a monitorování perfuzní odpovědi pomocí Laser Doppler Perfusion Imaging intraindividuální variační koeficient je 12 % pro Ach a 18,7 % pro SNP.

Postokluzivní reaktivní hyperémie: Laserová dopplerovská sonda bude připojena k vnitřnímu povrchu předloktí nebo hřbetu nohy a bude měřen průtok krve po dobu 5 minut. Následně se manžeta na krevní tlak rychle nafoukne na 200 mmHg po dobu 5 minut, aby se uzavřel průtok krve. Na konci 4minutové okluze bude manžeta rychle vypuštěna a průtok krve bude zaznamenán po dobu 10 minut po uvolnění. Tento postup stimuluje mikrocévy k dilataci s následným zvýšením průtoku krve. Analýza zahrnuje podrobné zkoumání tvaru křivky průtoku krve za účelem kategorizace do jedné ze 3 možností: normální; časný dominantní vrchol a časný nedominantní vrchol.

Optická reflektanční spektroskopie (ORS) ORS je neinvazivní technika, která přímo měří jak změny v objemu krve, tak okysličení kožní mikrocirkulace. Viditelné světlo procházející kůží je částečně tlumeno koncentrací oxy- a deoxyhemoglobinu. Za předpokladu, že útlum světla rozptylem zůstává konstantní, lze změny v koncentraci oxy- a deoxyhemoglobinu vypočítat z naměřených změn útlumu světla při různých vlnových délkách při jeho průchodu kůží.

Maximální hyperémie kůže (MH): Oblast dorzální části pravé nohy a ventrální část předloktí, bez viditelných žilek nebo kožních lézí, bude zahřátá na teplotu 42 C po dobu 30 minut pomocí malého mosazného ohřívače. 1 cm v průměru (Moor Instruments, Axminster, Devon, U.K.) a maximální odezva průtoku krve se měří pomocí laserových dopplerovských technik (jednobodový nebo laserový Dopplerův perfuzní zobrazovač. Průměrný intraindividuální variační koeficient pro měření maximálního průtoku krve je 6,6 % stanovený od 2 subjektů při 5 různých příležitostech. Pomocí této techniky vědci již dříve pozorovali změny v maximální hyperémii kůže u diabetu 2. typu au žen s předchozí anamnézou gestačního diabetu.

Blízká infračervená spektroskopie (NIRS). NIRS je neinvazivní technika, která hodnotí změnu objemu krve a okysličení mikrocirkulace v různých tkáňových lůžkách včetně svalů a mozku. Pracuje na stejných principech jako ORS s tím rozdílem, že využívá zdroj blízkého infračerveného světla, nikoli viditelného. světlo. Vzhledem k tomu, že blízké infračervené (760 - 840 nm) má delší vlnovou délku než viditelné světlo, rozptyluje se méně, a proto má zvýšenou hloubku průniku, což mu umožňuje posoudit okysličení ve svalu nebo mozku, kde bude použito ve vztahu k našemu hodnocení poznání.

. Inzulinová senzitivita bude měřena na konci dvou léčebných fází pomocí hyperinzulinemické izoglykemické svorky (upravená verze hyperinzulinemické euglykemické svorky). Po dobu 180 minut bude podávána základní infuze rozpustného inzulínu konstantní rychlostí (2,0 μkg za minutu) a k udržení izoglykémie bude podávána infuze 20% glukózy s proměnlivou rychlostí. Izoglykemická nastavená hodnota bude určena jako průměr ze dvou měření glykémie nalačno, která budou provedena v den vaskulárního testování a před svorkou. Inzulinová infuze bude připravena ve 45 ml 0,9% NaCl a 5 ml pacientovy krve, aby se zabránilo adsorpci inzulínu na plastové povrchy. V 5minutových intervalech budou odebrány 2 ml krevní vzorky z dorzální žíly ruky. Během ustáleného stavu se M vypočítá z rychlosti infuze glukózy a koncentrace inzulínu v séru podle jednoduchého matematického vzorce.

Vasodilatace zprostředkovaná průtokem používaná jako míra produkce endoteliálního oxidu dusnatého na standardní stimul (střih). Jak bylo popsáno dříve a podle konsenzuálních pokynů, periferní vaskulární endotel závislý (tj. NO-zprostředkovaná) vazodilatace v reakci na reaktivní hyperémii předloktí bude stanovena měřením změny průměru brachiální arterie pomocí ultrazvuku v lineárním poli B-módu a softwaru pro automatizovanou detekci okrajů (MIA, Iowa, USA). Reaktivní hyperémie bude vyvolána okluzí průtoku krve do horní části předloktí pomocí manžety nafouknuté na 250 mmHg po dobu 5 minut s následným rychlým vyfouknutím. Průtok krve během reaktivní hyperémie bude měřen pomocí ultrazvukového dopplerovského systému pro výpočet a analýzu stimulu smykové rychlosti. Vasodilatace nezávislá na cévním endotelu (vnitřní kontrola) bude určena dilatací brachiální tepny na sublingvální nitroglycerin (0,4 mg). Intraindividuální variační koeficient pro průtokem zprostředkovanou dilataci je 8,1 %.

Testování VO2 max: Pro stanovení kinetiky příjmu kyslíku během submaximálního cvičení a maximálního příjmu kyslíku budou provedeny statické zátěžové testy na kole za použití standardních postupů. Během zátěžových testů bude použita blízká infračervená spektroskopie k měření změn svalového oxy, deoxy a celkového hemoglobinu, které doprovázejí cvičení.

Testování kognitivních funkcí: Pomocí programu E-prime (Psychology Software Tools inc) bude navrženo 30minutové pole testů kognitivních funkcí. Tyto jednoduché testy bude pacient absolvovat na notebooku v období aklimatizace

Plazmové dusitany a dusičnany deproteinované vzorky budou analyzovány na koncentraci dusitanů a dusičnanů pomocí Sievers analyzátoru oxidu dusnatého (Sievers NOA 280i, Analytix Ltd, Durham, UK) a modifikací naší předchozí chemiluminiscenční techniky