Posouzení role probiotik u dětí ve věku 6–36 měsíců léčených na zápal plic

Tato studie je randomizovaná, dvojitě zaslepená, placebem kontrolovaná klinická studie prováděná v Nemocnici pro porodnictví a pediatrii provincie Phu Tho za účelem vyhodnocení probiotik na bázi Bacillus spór podávaných nosohltanovým sprejem (LiveSpo® Navax) s nebo bez perorální probiotické suspenze (LiveSpo® Preg-Mom) jako doplněk ke standardní lékařské léčbě u dětí ve věku 6-36 měsíců hospitalizovaných s pneumonií.

Celkem 330 způsobilých dětí bude náhodně rozděleno v poměru 1:1:1 do tří skupin (n = 110 na skupinu):

kontrolní skupina, která dostane nosohltanový sprej s 0,9% roztokem chloridu sodného a perorálně RO vodu, skupina Navax, která dostane nosohltanový sprej s probiotiky na bázi Bacillus spór a perorálně RO vodu, a skupina Navax-PregMom, která dostane probiotika na bázi Bacillus spór jak ve formě nosního spreje, tak perorální suspenze. Všichni účastníci dostávají standardní léčbu podle nemocničních pokynů, přičemž rozdíly mezi skupinami jsou omezeny na přidělené studijní intervence.

Nosohltanový sprej se podává jako tři střiky do každé nosní dírky a hrdla na dávku, třikrát denně, a perorální intervence se podává v denní dávce 5 ml, dvakrát denně. Intervence jsou zahájeny během hospitalizace a pokračují až dva měsíce od přijetí.

Odůvodnění a potřeba: Dětská pneumonie často následuje po infekci horních cest dýchacích a je charakterizována kolonizací patogeny a zánětem nosohltanové sliznice. V souladu s tím by sprej s Bacillus spórami do nosu a hrdla mohl sloužit jako lokální doplněk k udržení hygieny dýchacích cest a obnově sliznice, přičemž by potenciálně mohl snižovat množství respiračních virů a bakteriálních kopatogenů v místě infekce. Souběžné intervence u hospitalizovaných dětí s pneumonií, včetně podpůrné péče a podávání léků (jako jsou antibiotika), mohou narušit střevní mikrobiom a vést k gastrointestinálním příznakům před léčbou nebo po ní. Očekává se, že perorální suspenze Bacillus spór doplní lokální intervenci působením prostřednictvím rozhraní střevo-imunitní systém, čímž podpoří systémovou imunitní modulaci a zotavení nad rámec horních cest dýchacích.

Klíčové je, že většina dostupných klinických studií zkoumá probiotika jako monoterapii (např. pouze perorálně nebo pouze nosně) a nedostatečně řeší výsledky související s kombinací obou cest podání ve stejné léčbě. Účelem této studie je přímo prověřit hypotézu, že poskytnutí současných probiotik Bacillus nosně (B. subtilis ANA4 + B. clausii ANA39) a perorálně (B. subtilis ANA46 + B. clausii ANA39 + B. coagulans ANA40) u hospitalizovaných dětí s pneumonií bude mít aditivní účinek. Očekávaný mechanismus je, že kombinovaný režim může lépe podpořit léčbu a prevenci recidivy snížením virové nálože, bakteriální koinfekce a prozánětlivých cytokinů, zatímco zlepší profil nosního a střevního mikrobiomu.

Po získání písemného informovaného souhlasu jsou pomocí standardizovaných dotazníků a lékařských záznamů shromážděna základní demografická a klinická data.

Během hospitalizační léčby lékaři a sestry sledují a zaznamenávají denní klinické příznaky, včetně horečky, kašle, tachypnoe, zatahování hrudníku, sípání, chrůpků a gastrointestinálních projevů, stejně jako délku hospitalizace a užívání léků, jako jsou antibiotika, antivirotika a podpůrné terapie. Vzorky z nosohltanu, krve a stolice jsou odebírány v předem stanovených časových bodech podle protokolu (povinně v den 0 a den 3, a volitelně v den 30 a den 60). Všechny tyto vzorky jsou zpracovány ke kvantifikaci zánětlivých cytokinů (IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IL-23, TNF-α) a IgA pomocí ELISA a k detekci respiračních virů, bakteriálních kopatogenů a B. subtilis, B. clausii a B. coagulans pomocí PCR v reálném čase. Stratifikované podvzorky stolice a nosohltanových vzorků (n = 15-20 na skupinu x 2 časové body) podstupují sekvenování genu 16S rRNA k posouzení změn v diverzitě a taxonomickém složení respiračního (v den 30 vs. den 0) a střevního mikrobiomu (v den 30 vs. den 0). Po propuštění jsou děti sledovány v den 30 a/nebo den 60 prostřednictvím ambulantních návštěv nebo strukturovaných rozhovorů s rodiči nebo pečovateli za účelem dokumentace recidivy respiračních nebo gastrointestinálních příznaků, znovuhospitalizace a užívání léků po propuštění. Rodičům nebo pečovatelům je nařízeno, aby během studie nepodávali jiné probiotické přípravky (kromě jogurtu) ani nosní přípravky s Bacillus spórami.

Všechny lékařské záznamy jsou shromažďovány, skenovány a ukládány v elektronické podobě. Pacientská data jsou systematicky organizována do databází pro analýzu. Snížení patogenní nálože je hodnoceno porovnáním hodnot prahového cyklu (Ct) PCR v reálném čase při propuštění nebo sledování s výchozí hodnotou pomocí metody 2^−ΔCt. Změny v koncentracích cytokinů a IgA jsou hodnoceny porovnáním mediánů před a po intervenci. Přítomnost B. subtilis, B. clausii a B. coagulans ve vzorcích je vyjádřena pomocí hodnot Ct z testů s TaqMan sondami. Statistické analýzy a grafické prezentace jsou prováděny pomocí GraphPad Prism (verze 10.2.3), IBM SPSS Statistics (verze 27) a softwaru R (verze 4.4.2), s oboustrannou hladinou významnosti nastavenou na p < 0,05. Randomizace a dvojité zaslepení jsou aplikovány za účelem minimalizace náhodných a systematických zkreslení a kódy přidělení léčby zůstávají utajeny až do dokončení analýzy dat, s výjimkou případů závažných nežádoucích příhod vyžadujících nouzové odtajnění.