Detekce mutace EGFR u maligního pleurálního výpotku pacientů s rakovinou plic a založení rakovinných buněčných linií (EGFR)

Rakovina plic je hlavní příčinou úmrtnosti na světě. Předchozí studie ukázala, že asi 88 % případů rakoviny plic patří k nemalobuněčnému karcinomu plic (NSCLC) na Tchaj-wanu (1). Přibližně 50~90 % pacientů s NSCLC mělo expresi (nebo popisovanou jako nadměrnou expresi) EGFR u rakoviny (2,3). Přestože zacílení na doménu EGFR kinázy pomocí inhibitorů gefitinib (Iressa) a erlotinib (Tarceva) nemá žádný účinek proti solidním nádorům, dosahuje působivé odpovědi v podskupině NSCLC, zejména v asijském etnickém původu, ženském pohlaví, absenci kouření v anamnéze, a nádor s histologickým rysem adenokarcinomu (3,4,5). Molekulární studie vysoce citlivých případů odhalily vysoké procento somatických mutací v tyrosinkináze, ATP-vazebné doméně genu EGFR (6). Jedním z možných vysvětlení tohoto jevu je, že rakovinné buňky jsou „závislé“ na signalizaci prostřednictvím mutantních EGFR a umírají, když je mutantní onkoprotein inaktivován (7). Nicméně specifické mechanismy, které jsou základem buněčné smrti indukované inhibitorem tyrosinkinázy epidermálního růstového faktoru (EGFR-TKI), nebyly dobře popsány (7).

Přibližně 90 % mutací ovlivňuje několik specifických aminokyselin. Delece v rámci exonu 19 zaměřené na kodony 756 až 750 tvoří 45~50 % mutací a dalších 35~45 % tvoří missense mutace leucinu na arginin v kodonu 858 (L858R) v exonu 21 (8, 9, 10). Souvislost mezi odpovědí EGFR-TKI a mutacemi EGFR byla potvrzena, ale zvýšená prevalence mutací u asijských (25 % až 50 %) ve srovnání se severoamerickými a západoevropskými pacienty (10 %) není v současnosti vysvětlena (6,8–12 ). Míra odpovědi na léčbu TKI u pozitivních mutací je 77 % (30 % až 100 % u většiny sérií > 60 %) ve srovnání s 10 % u případů s negativní mutací (6). Je zajímavé, že delece exonu 19 zvýšila odpověď a přežití s ​​TKI ve srovnání s případy L858R (10, 13, 14). To je v kontrastu s přirozenou anamnézou pacientů, kde se zdá, že pacienti s delecí exonu 19 mají kratší přežití než pacienti s L858R (8). Biologický rozdíl je stále neznámý a různé mutace mohou mít různé biochemické signalizační vlastnosti (15).

V této studii budeme shromažďovat pleurální výpotek od pacientů s rakovinou plic. Budeme charakterizovat stav EGFR nádorové buňky z maligního pleurálního výpotku a pokusíme se stanovit nádorové buněčné linie od těchto pacientů. Doufáme, že se nám podaří vytvořit několik buněčných linií s různými mutacemi a pak budeme moci porovnat rozdílné reakce a signální dráhy v těchto buněčných liniích. Můžeme také prozkoumat podrobný mechanismus rakovinných buněk reagujících na TKI a pokusit se vyvinout další činidlo pro posílení drah.