Wykrywanie mutacji EGFR w złośliwym wysięku opłucnowym u pacjentów z rakiem płuca i zakładanie linii komórek nowotworowych (EGFR)

Rak płuc jest główną przyczyną śmiertelności na świecie. Poprzednie badanie wykazało, że około 88% przypadków raka płuc należy do niedrobnokomórkowego raka płuca (NSCLC) na Tajwanie (1). Około 50~90% pacjentów z NSCLC miało ekspresję (lub opisaną jako nadekspresję) EGFR w raku (2,3). Chociaż celowanie w domenę kinazy EGFR za pomocą inhibitorów gefitynibu (Iressa) i erlotynibu (Tarceva) nie ma wpływu na guzy lite, osiąga imponującą odpowiedź w podgrupie NSCLC, zwłaszcza w azjatyckim pochodzeniu etnicznym, płci żeńskiej, braku historii palenia, oraz guz o histologicznych cechach gruczolakoraka (3,4,5). Badania molekularne przypadków wysoce responsywnych ujawniły wysoki odsetek mutacji somatycznych w obrębie kinazy tyrozynowej, domeny wiążącej ATP genu EGFR (6). Jednym z możliwych wyjaśnień tego zjawiska jest to, że komórki nowotworowe są „uzależnione” od przekazywania sygnału przez zmutowane EGFR i umierają, gdy zmutowana onkoproteina jest inaktywowana (7). Jednak specyficzne mechanizmy leżące u podstaw śmierci komórkowej indukowanej inhibitorem kinazy tyrozynowej naskórkowego czynnika wzrostu (EGFR-TKI) nie zostały dobrze określone (7).

Około 90% mutacji dotyczy kilku określonych aminokwasów. Delecje w ramce w eksonie 19 skupione na kodonach 756 do 750 stanowią 45-50% mutacji, a kolejne 35-45% składa się z mutacji zmiany sensu leucyny do argininy w kodonie 858 (L858R) w eksonie 21 (8, 9, 10). Potwierdzono związek między odpowiedzią EGFR-TKI a mutacjami EGFR, ale zwiększona częstość występowania mutacji u pacjentów z Azji (25% do 50%) w porównaniu z pacjentami z Ameryki Północnej i Europy Zachodniej (10%) jest obecnie niewyjaśniona (6,8-12 ). Wskaźnik odpowiedzi na leczenie TKI w przypadku mutacji dodatnich wynosi 77% (30% do 100% w przypadku większości serii >60%) w porównaniu z 10% w przypadkach mutacji ujemnych (6). Interesujące jest to, że delecja eksonu 19 zwiększyła odpowiedź i przeżycie przy TKI w porównaniu z przypadkami L858R (10, 13, 14). Kontrastuje to z naturalną historią pacjentów, gdzie pacjenci z delecjami eksonu 19 wydają się mieć krótsze przeżycie niż ci z L858R (8). Różnica biologiczna jest nadal nieznana, a różne mutacje mogą mieć różne biochemiczne właściwości sygnalizacyjne (15).

W tym badaniu będziemy zbierać wysięk opłucnowy od pacjentów z rakiem płuc. Scharakteryzujemy status EGFR komórki nowotworowej ze złośliwego wysięku opłucnowego i spróbujemy ustalić linie komórek nowotworowych od tych pacjentów. Mamy nadzieję, że ustalimy kilka linii komórkowych z różnymi mutacjami, a następnie będziemy mogli porównać różne odpowiedzi i szlaki sygnałowe w tych liniach komórkowych. Możemy również zbadać szczegółowy mechanizm komórek nowotworowych reagujących na TKI i spróbować opracować inny czynnik wzmacniający szlaki.