Rilevazione della mutazione EGFR nel versamento pleurico maligno di pazienti affetti da cancro del polmone e creazione di linee cellulari tumorali (EGFR)

Il cancro del polmone è la principale causa di mortalità nel mondo. Uno studio precedente ha dimostrato che circa l'88% dei casi di cancro al polmone appartiene al carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC) a Taiwan (1). Circa il 50~90% dei pazienti con NSCLC presentava espressione (o descritta come sovraespressione) di EGFR nel cancro (2,3). Sebbene il targeting del dominio della chinasi EGFR utilizzando gli inibitori gefitinib (Iressa) ed erlotinib (Tarceva) non abbia alcun effetto contro i tumori solidi, ottiene una risposta impressionante nel sottogruppo di NSCLC, specialmente in etnia asiatica, sesso femminile, assenza di una storia di fumo, e un tumore con caratteristiche istologiche di adenocarcinoma (3,4,5). Studi molecolari di casi altamente reattivi hanno rivelato un'alta percentuale di mutazioni somatiche all'interno della tirosina chinasi, dominio di legame dell'ATP del gene EGFR (6). Una possibile spiegazione di questo fenomeno è che le cellule tumorali sono "dipendenti" dalla segnalazione tramite gli EGFR mutati e muoiono quando l'oncoproteina mutante viene inattivata (7). Tuttavia, i meccanismi specifici alla base della morte cellulare indotta dall'inibitore della tirosina chinasi del fattore di crescita epidermico (EGFR-TKI) non sono stati ben delineati (7).

Circa il 90% delle mutazioni colpisce alcuni amminoacidi specifici. Le delezioni in-frame nell'esone 19 centrate sui codoni da 756 a 750 costituiscono il 45~50% delle mutazioni, e un altro 35~45% è costituito dalla mutazione missenso da leucina ad arginina al codone 858 (L858R) nell'esone 21 (8, 9, 10). Il legame tra la risposta EGFR-TKI e le mutazioni EGFR è stato confermato, ma l'aumento della prevalenza delle mutazioni nei pazienti asiatici (dal 25% al ​​50%) rispetto ai pazienti nordamericani ed europei occidentali (10%) è attualmente inspiegabile (6,8-12 ). Il tasso di risposta al trattamento con TKI nei casi positivi alle mutazioni è del 77% (dal 30% al 100% con la maggior parte delle serie >60%) rispetto al 10% nei casi negativi alle mutazioni (6). È interessante notare che la delezione dell'esone 19 ha aumentato la risposta e la sopravvivenza con i TKI rispetto ai casi L858R (10, 13, 14). Ciò è in contrasto con la storia naturale dei pazienti, in cui quelli con delezioni dell'esone 19 sembrano avere una sopravvivenza più breve rispetto a quelli con L858R (8). La differenza biologica è ancora sconosciuta e diverse mutazioni possono avere diverse proprietà di segnalazione biochimica (15).

In questo studio, raccoglieremo il versamento pleurico da pazienti affetti da cancro del polmone. Caratterizzeremo lo stato EGFR della cellula tumorale da versamento pleurico maligno e cercheremo di stabilire le linee cellulari tumorali di questi pazienti. Speriamo di stabilire diverse linee cellulari con diverse mutazioni e quindi possiamo confrontare le risposte diverse e le vie del segnale in queste linee cellulari. Possiamo anche esplorare il meccanismo dettagliato della cellula tumorale reattiva ai TKI e provare a sviluppare altri agenti per migliorare i percorsi.