Detecção de Mutação EGFR em Derrame Pleural Maligno de Pacientes com Câncer de Pulmão e Estabelecimento de Linhagens Celulares de Câncer (EGFR)

O câncer de pulmão é a principal causa de mortalidade no mundo. Um estudo anterior mostrou que cerca de 88% dos casos de câncer de pulmão pertencem ao câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC) em Taiwan (1). Aproximadamente 50~90% dos pacientes com NSCLC apresentaram expressão (ou descrita como superexpressão) de EGFR no câncer (2,3). Embora o direcionamento do domínio EGFR quinase usando os inibidores gefitinib (Iressa) e erlotinib (Tarceva) não tenha efeito contra tumores sólidos, ele atinge uma resposta impressionante no subgrupo de NSCLC, especialmente em etnia asiática, sexo feminino, ausência de história de tabagismo, e um tumor com característica histológica de adenocarcinoma (3,4,5). Estudos moleculares de casos altamente responsivos revelaram alta porcentagem de mutação somática dentro da tirosina quinase, domínio de ligação de ATP do gene EGFR (6). Uma possível explicação para esse fenômeno é que as células cancerígenas são "viciadas" na sinalização via EGFRs mutantes e morrem quando a oncoproteína mutante é inativada (7). No entanto, os mecanismos específicos subjacentes à morte celular induzida pelo inibidor do fator de crescimento epidérmico tirosina quinase (EGFR-TKI) não foram bem delineados (7).

Aproximadamente 90% das mutações afetam alguns aminoácidos específicos. As deleções no quadro no exon 19 centradas nos códons 756 a 750 compõem 45~50% das mutações, e outros 35~45% consistem na mutação sem sentido leucina para arginina no códon 858 (L858R) no exon 21 (8, 9, 10). A ligação entre a resposta EGFR-TKI e as mutações EGFR foi confirmada, mas o aumento da prevalência de mutações em asiáticos (25% a 50%) em comparação com pacientes norte-americanos e europeus ocidentais (10%) é atualmente inexplicado (6,8-12 ). A taxa de resposta ao tratamento com TKI em mutações positivas é de 77% (30% a 100% com a maioria das séries >60%) em comparação com 10% em casos de mutação negativa (6). É interessante que a deleção do exon 19 tenha aumentado a resposta e a sobrevida com TKIs em comparação com os casos L858R (10, 13, 14). Isso contrasta com a história natural dos pacientes, onde aqueles com deleções do exon 19 parecem ter sobrevida mais curta do que aqueles com L858R (8). A diferença biológica ainda é desconhecida e diferentes mutações podem ter diferentes propriedades de sinalização bioquímica (15).

Neste estudo, coletaremos o derrame pleural de pacientes com câncer de pulmão. Vamos caracterizar o estado EGFR da célula cancerosa de derrame pleural maligno e tentar estabelecer as linhagens de células cancerígenas desses pacientes. Esperamos estabelecer várias linhagens celulares com diferentes mutações e assim podermos comparar as diferenças de respostas e vias de sinalização nessas linhagens celulares. Também podemos explorar o mecanismo detalhado da célula cancerígena responsiva a TKI e tentar desenvolver outro agente para melhorar as vias.