Signální dráha JAK-STAT u familiárních myeloproliferativních poruch (SMP)

Myeloproliferativní poruchy (MPD) jsou vzácná maligní onemocnění kostní dřeně charakterizovaná proliferací diferencovaných krevních buněk po dlouhou dobu a možnou transformací v akutní leukémii.

Nedávná identifikace rekurentní aktivační tyrozinkinázové mutace V617F v genu JAK2 poskytuje průlom v porozumění molekulárním mechanismům těchto onemocnění. Nemůže však vysvětlit fenotypovou diverzitu MPD a výskyt familiárních agregací. Vyšetřovatelé ve skutečnosti prokázali, že mutace V617F je somatická, která se různě projevuje mezi pacienty ve stejné rodině. Tyto nesrovnalosti mohou vysvětlit další somatické mutace a dědičné faktory, které jsou dosud neznámé. Dráha JAK-STAT má zásadní roli u non-CML MPD, jak ukázaly funkční důsledky mutace V617F JAK2. Výzkumníci proto zaměří naši studii na geny kódující faktory zapojené do této signální dráhy. Budou použity dva genetické přístupy: 1-studium známých polymorfismů (SNP) těchto genů zapojených do dráhy JAK-STAT; 2-hledání vzácných mutací lokalizovaných ve specifických oblastech (vazebná doména…) kandidátských genů. Studie je národním multicentrickým výzkumem založeným na národní síti (55 center), kterou výzkumníci zorganizovali s pomocí Francouzské hematologické společnosti v 1998. Vyšetřovatelé navrhují zahrnout 120 rodin definovaných přítomností alespoň 2 případů non CML MPD (kritéria WHO a PVSG). Vyšetřovatelé již shromáždili 60 rodin (postižené případy a kontrolní subjekt); zbývajících 60 bude zahrnuto v příštích dvou letech. V každé rodině budou zahrnuti pouze dva pacienti s MPD a jedna kontrola (všechny subjekty starší 18 let). Každému subjektu budou odebrány vzorky periferní krve (35 ml) a bukální výtěry. Hematologové a ONKOGENETICI zahrnou rodiny, shromáždí všechna klinická a biologická data a provedou odběr biologického materiálu od každého subjektu zařazeného do studie podle schválených pravidel. Všechna data budou anonymně evidována na databázi Access. Hematologické studie budou prováděny v Imuno-hematologické laboratoři v Saint ANTOINE. Genetické studie budou prováděny na genetickém oddělení nemocnice Saint ANTOINE, která je nyní převedena do nemocnice Pitie-Salpetriere v Paříži. Genetická studie bude založena na analýze 120 nepříbuzných familiárních případů SMP (randomizovaných) a 120 kontrol. Řešitelé budou studovat 10 genů zapojených do dráhy JAK-STAT (cytokinové receptory, Janusovy kinázy, regulační faktory). Genotypizace SNP vybraných z databází HAPMAP a CGEMS bude provedena pomocí kvantitativní PCR. Výzkumníci plánují analyzovat 50 SNP na subjekt, tj. 24 000 genotypů (duplicitní body). Analýza bude založena na srovnání alelické frekvence ve dvou skupinách pomocí bilaterálního párového t-testu; 120 párů subjektů (kontrola případu) umožňuje detekovat standard odchylky 0,6 alelické frekvence mezi případy a kontrolami (alfa = 5 %, beta = 10 %). Hledání vzácných mutací bude provedeno genomickým sekvenováním konkrétních oblastí v kandidátských genech u 120 postižených případů.