Ścieżka sygnalizacyjna JAK-STAT w rodzinnych zaburzeniach mieloproliferacyjnych (SMP)

Zaburzenia mieloproliferacyjne (MPD) to rzadkie złośliwe choroby szpiku kostnego charakteryzujące się proliferacją zróżnicowanych krwinek w długim czasie i możliwą transformacją w ostrą białaczkę.

Niedawna identyfikacja nawracającej aktywującej mutacji kinazy tyrozynowej V617F w genie JAK2 stanowi przełom w zrozumieniu mechanizmów molekularnych tych chorób. Nie może to jednak wyjaśnić różnorodności fenotypowej MPD i występowania rodzinnych skupisk. Badacze faktycznie wykazali, że mutacja V617F jest mutacją somatyczną, która jest różnie wyrażana u pacjentów z tej samej rodziny. Inne mutacje somatyczne i czynniki dziedziczne, wciąż nieznane, mogą wyjaśniać te rozbieżności. Szlak JAK-STAT odgrywa zasadniczą rolę w MPD niezwiązanym z CML, jak wykazano na podstawie czynnościowych konsekwencji mutacji JAK2 V617F. Dlatego badacze skoncentrują nasze badania na genach kodujących czynniki zaangażowane w ten szlak sygnałowy. Zastosowane zostaną dwa podejścia genetyczne: 1-badanie znanych polimorfizmów (SNP) tych genów zaangażowanych w szlak JAK-STAT; 2-wyszukiwanie rzadkich mutacji zlokalizowanych w określonych regionach (domena wiążąca…) genów kandydujących. Badanie jest krajowym wieloośrodkowym badaniem opartym na krajowej sieci (55 ośrodków), którą badacze zorganizowali z pomocą Francuskiego Towarzystwa Hematologicznego w 1998. Badacze proponują włączenie 120 rodzin zdefiniowanych na podstawie obecności co najmniej 2 przypadków MPD innych niż CML (kryteria WHO i PVSG). Badacze zebrali już 60 rodzin (przypadki dotknięte chorobą i grupa kontrolna); pozostałe 60 zostanie uwzględnionych w ciągu najbliższych dwóch lat. W każdej rodzinie uwzględnionych zostanie tylko dwóch pacjentów z MPD i jedna grupa kontrolna (wszyscy pacjenci powyżej 18 roku życia). Od każdego pacjenta zostaną pobrane próbki krwi obwodowej (35 ml) i wymazy z jamy ustnej. Hematolodzy i ONKOGENETYCY będą włączać rodziny, zbierać wszystkie dane kliniczne i biologiczne oraz pobierać materiał biologiczny od każdego pacjenta objętego badaniem zgodnie z zatwierdzonymi zasadami. Wszystkie dane będą anonimowo rejestrowane w bazie danych Access. Badania hematologiczne będą wykonywane w Laboratorium Immuno-Hematologicznym w Saint ANTOINE. Badania genetyczne będą prowadzone na Oddziale Genetyki Szpitala św. ANTOINE przeniesionym obecnie do Szpitala Pitie-Salpetriere w Paryżu. Badanie genetyczne będzie oparte na analizie 120 niespokrewnionych rodzinnych przypadków SMP (randomizowanych) i 120 kontroli. Badacze będą badać 10 genów biorących udział w szlaku JAK-STAT (receptory cytokin, kinazy janusowe, czynniki regulatorowe). Genotypowanie SNP wybranych z baz HAPMAP i CGEMS zostanie przeprowadzone metodą ilościowego PCR. Badacze planują przeanalizować 50 SNP na osobę, tj. 24000 genotypów (duplikaty punktów). Analiza będzie oparta na porównaniu częstości alleli w dwóch grupach przy użyciu dwustronnego testu t dla par; 120 par osobników (kontrola przypadku) pozwala na wykrycie standardu odchylenia alleli 0,6 między przypadkami a kontrolami (alfa = 5%, beta = 10%). Poszukiwanie rzadkich mutacji zostanie przeprowadzone poprzez sekwencjonowanie genomowe poszczególnych regionów w genach kandydujących w 120 dotkniętych przypadkach.