Percorso di segnalazione JAK-STAT nei disturbi mieloproliferativi familiari (SMP)

Le malattie mieloproliferative (MPD) sono rare malattie maligne del midollo osseo caratterizzate da una proliferazione di cellule del sangue differenziate per lungo tempo e una possibile trasformazione in una leucemia acuta.

La recente identificazione di una mutazione attivante ricorrente della tirosina chinasi V617F nel gene JAK2 fornisce una svolta nella comprensione dei meccanismi molecolari di queste malattie. Non può tuttavia spiegare la diversità fenotipica della MPD e la presenza di aggregazioni familiari. I ricercatori hanno infatti dimostrato che la mutazione V617F è una mutazione somatica che si esprime in modo variabile tra i pazienti della stessa famiglia. Altre mutazioni somatiche e fattori ereditari, ancora sconosciuti, possono spiegare queste discrepanze. La via JAK-STAT ha un ruolo essenziale nella MPD non-LMC, come dimostrato dalle conseguenze funzionali della mutazione V617F JAK2. Pertanto, i ricercatori concentreranno il nostro studio sui geni che codificano i fattori implicati in questa via di segnalazione. Saranno utilizzati due approcci genetici: 1-studio dei polimorfismi noti (SNP) di questi geni coinvolti nel pathway JAK-STAT; 2-ricerca di mutazioni rare localizzate in regioni specifiche (dominio di legame...) di geni candidati. Lo studio è una ricerca multicentrica nazionale basata sulla rete nazionale (55 centri) che i ricercatori hanno organizzato con l'aiuto della Società francese di ematologia in 1998. Gli investigatori propongono di includere 120 famiglie definite dalla presenza di almeno 2 casi di MPD non LMC (criteri OMS e PVSG). Gli investigatori hanno già raccolto 60 famiglie (casi affetti e soggetto di controllo); gli altri 60 verranno inseriti nel prossimo biennio. In ogni famiglia saranno inclusi solo i due pazienti con MPD e un controllo (tutti i soggetti di età superiore ai 18 anni). Per ogni soggetto verranno raccolti campioni di sangue periferico (35 ml) e tamponi buccali. Gli ematologi e gli ONCOGENETICI includeranno le famiglie, raccoglieranno tutti i dati clinici e biologici ed eseguiranno la raccolta del materiale biologico da ciascun soggetto incluso nello studio secondo le regole approvate. Tutti i dati saranno registrati in forma anonima sul data base di Access. Gli studi ematologici saranno effettuati nel Laboratorio Immuno-Ematologico di Saint ANTOINE. Gli studi genetici saranno condotti nel dipartimento di genetica dell'ospedale Saint ANTOINE, ora trasferito all'ospedale Pitie-Salpetriere di Parigi. Lo studio genetico si baserà sull'analisi di 120 casi SMP familiari non correlati (randomizzati) e 120 controlli. I ricercatori studieranno 10 geni coinvolti nel pathway JAK-STAT (recettori delle citochine, Janus chinasi, fattori regolatori). La genotipizzazione degli SNP, selezionati dai database HAPMAP e CGEMS, sarà effettuata mediante PCR quantitativa. Gli investigatori prevedono di analizzare 50 SNP per soggetto, ovvero 24000 genotipi (punti duplicati). L'analisi si baserà sul confronto delle frequenze alleliche nei due gruppi utilizzando un t-test bilaterale accoppiato; 120 coppie di soggetti (caso controllo) consentono di rilevare una deviazione standard di frequenza allelica di 0,6 tra casi e controlli (alfa = 5%, beta = 10%). La ricerca di mutazioni rare sarà effettuata mediante sequenziamento genomico di particolari regioni nei geni candidati nei 120 casi affetti.