JAK-STAT-signalointireitti familiaalisissa myeloproliferatiivisissa häiriöissä (SMP)

Myeloproliferatiiviset häiriöt (MPD) ovat harvinaisia ​​pahanlaatuisia luuytimen sairauksia, joille on ominaista erilaistuneiden verisolujen lisääntyminen pitkän ajan kuluessa ja mahdollinen transformaatio akuutti leukemia.

Äskettäin havaittu toistuva aktivoiva tyrosiinikinaasimutaatio V617F JAK2-geenissä tarjoaa läpimurron näiden sairauksien molekyylimekanismien ymmärtämisessä. Se ei kuitenkaan voi selittää MPD:n fenotyyppistä monimuotoisuutta ja perheaggregaatioiden esiintymistä. Tutkijat ovat osoittaneet, että mutaatio V617F on somaattinen mutaatio, joka ilmentyy vaihtelevasti saman perheen potilailla. Muut somaattiset mutaatiot ja perinnölliset tekijät, joita ei vielä tunneta, voivat selittää nämä erot. JAK-STAT-reitillä on olennainen rooli ei-CML-MPD:ssä, kuten V617F JAK2-mutaation toiminnalliset seuraukset osoittivat. Siksi tutkijat keskittävät tutkimuksemme geeneihin, jotka koodaavat tekijöitä, jotka liittyvät tähän signalointireittiin. Käytetään kahta geneettistä lähestymistapaa: 1 - JAK-STAT-reittiin liittyvien näiden geenien tunnettujen polymorfismien (SNP) tutkimus; 2-haku harvinaisista mutaatioista, jotka sijaitsevat ehdokasgeenien tietyillä alueilla (sitoutumisalue…). Tutkimus on kansallinen monikeskustutkimus, joka perustuu kansalliseen verkostoon (55 keskusta), jonka tutkijat ovat järjestäneet Ranskan hematologiayhdistyksen avustuksella. 1998. Tutkijat ehdottavat, että mukaan otetaan 120 perhettä, jotka määritellään vähintään 2 muun kuin CML MPD -tapauksen mukaan (WHO- ja PVSG-kriteerit). Tutkijat ovat jo keränneet 60 perhettä (sairaat tapaukset ja kontrollihenkilö); loput 60 sisällytetään seuraavien kahden vuoden aikana. Jokaisessa perheessä otetaan mukaan vain kaksi MPD-potilasta ja yksi kontrolli (kaikki yli 18-vuotiaat). Jokaiselta koehenkilöltä otetaan perifeeriset verinäytteet (35 ml) ja poskipuikkoja. Hematologit ja ONKOGENETIKOT ottavat mukaan perheet, keräävät kaikki kliiniset ja biologiset tiedot ja suorittavat jokaiselta tutkimukseen osallistuvalta henkilöltä biologisen materiaalin keräämisen hyväksyttyjen sääntöjen mukaisesti. Kaikki tiedot rekisteröidään nimettömästi Access-tietokantaan. Hematologiset tutkimukset tehdään Immuno-Hematological Laboratoryssa Saint ANTOINEssa. Geenitutkimukset suoritetaan Saint ANTOINE -sairaalan geneettisellä osastolla, joka on nyt siirretty Pitie-Salpetrieren sairaalaan Pariisiin. Geneettinen tutkimus perustuu 120 riippumattoman suvun SMP-tapauksen (satunnaistettu) ja 120 kontrollin analyysiin. Tutkijat tutkivat 10 geeniä, jotka osallistuvat JAK-STAT-reittiin (sytokiinireseptorit, Janus-kinaasit, säätelytekijät). HAPMAP- ja CGEMS-tietokannoista valittujen SNP:iden genotyypitys suoritetaan kvantitatiivisella PCR:llä. Tutkijat suunnittelevat analysoivansa 50 SNP:tä henkilöä kohden eli 24 000 genotyyppiä (kaksoispisteitä). Analyysi perustuu alleelifrekvenssin vertailuun kahdessa ryhmässä käyttäen kahdenvälistä parillista t-testiä; 120 koeparia (tapauskontrolli) mahdollistaa alleelitaajuuden 0,6 poikkeamastandardin havaitsemisen tapausten ja kontrollien välillä (alfa = 5%, beeta = 10 %). Harvinaisten mutaatioiden etsiminen suoritetaan genomisella sekvensoimalla tiettyjä alueita ehdokasgeeneissä 120 sairastuneessa tapauksessa.