Via de sinalização JAK-STAT em distúrbios mieloproliferativos familiares (SMP)

As doenças mieloproliferativas (MPD) são doenças malignas raras da medula óssea caracterizadas por uma proliferação de células sanguíneas diferenciadas durante um longo período de tempo e uma possível transformação em uma leucemia aguda.

A recente identificação de uma mutação de ativação recorrente da tirosina quinase V617F no gene JAK2 fornece um avanço na compreensão dos mecanismos moleculares dessas doenças. Não pode explicar, no entanto, a diversidade fenotípica de MPD e a ocorrência de agregações familiares. Os investigadores mostraram, na verdade, que a mutação V617F é uma mutação somática que se expressa de forma variável entre pacientes da mesma família. Outras mutações somáticas e fatores hereditários, ainda desconhecidos, podem explicar essas discrepâncias. A via JAK-STAT tem um papel essencial na MPD não CML, conforme demonstrado pelas consequências funcionais da mutação V617F JAK2. Portanto, os pesquisadores focarão nosso estudo nos genes que codificam fatores implicados nesta via de sinalização. Duas abordagens genéticas serão utilizadas: 1-estudo de polimorfismos conhecidos (SNP) desses genes envolvidos na via JAK-STAT; 2-pesquisa de mutações raras localizadas em regiões específicas (domínio de ligação…) de genes candidatos. O estudo é uma pesquisa multicêntrica nacional baseada na rede nacional (55 centros) que os investigadores organizaram com a ajuda da Sociedade Francesa de Hematologia em 1998. Os investigadores propõem incluir 120 famílias definidas pela presença de pelo menos 2 casos de DPM não CML (critérios da OMS e PVSG). Os investigadores já coletaram 60 famílias (casos afetados e sujeitos de controle); os outros 60 serão incluídos nos próximos dois anos. Em cada família, serão incluídos apenas os dois pacientes com DPM e um controle (todos os indivíduos acima de 18 anos). Serão coletadas amostras de sangue periférico (35ml) e swabs bucais de cada sujeito. Hematologistas e ONCOGENETISTAS incluirão as famílias, coletarão todos os dados clínicos e biológicos e farão a coleta de material biológico de cada sujeito incluído no estudo de acordo com as normas aprovadas. Todos os dados serão anonimamente registrados no banco de dados Access. Os estudos hematológicos serão realizados no Laboratório Imuno-Hematológico de Saint ANTOINE. Os estudos genéticos serão conduzidos no Departamento de Genética do Hospital Saint ANTOINE agora transferido para o Hospital Pitie-Salpetriere em Paris. O estudo genético será baseado na análise de 120 casos de SMP familiar não relacionados (randomizados) e 120 controles. Os pesquisadores estudarão 10 genes envolvidos na via JAK-STAT (receptores de citocinas, Janus quinases, fatores regulatórios). A genotipagem dos SNPs, selecionados dos bancos de dados HAPMAP e CGEMS, será realizada por PCR quantitativo. Os investigadores planejam analisar 50 SNPs por sujeito, ou seja, 24.000 genótipos (pontos duplicados). A análise será baseada na comparação das frequências alélicas nos dois grupos por meio de um teste t pareado bilateral; 120 pares de indivíduos (controle de caso) permitem detectar um desvio padrão de 0,6 de frequência alélica entre casos e controles (alfa = 5%, beta = 10%). A busca por mutações raras será feita por sequenciamento genômico de regiões particulares em genes candidatos nos 120 casos afetados.