Biomarkery variability CYP2D6 a CYP3A4 v pediatrii

Tento návrh představuje pokračování předchozích a probíhajících longitudinálních studií k charakterizaci relativního příspěvku farmakogenetiky a ontogeneze k variabilitě aktivity CYP2D6 a CYP3A4 mezi narozením a adolescencí. Konkrétně je celkovým cílem výzkumného programu otestovat hypotézu, že primárním zdrojem variability v aktivitě CYP2D6 a CYP3A4 během dospívání je spíše genetická variabilita než ontogeneze. Tato studie rozšíří naši současnou sérii longitudinálních fenotypových studií a bude průřezovou studií u dětí ve věku 7-15 let, studovaná při sedmi příležitostech s odstupem 6 měsíců.

Děti se budou rekrutovat z nemocnic a klinik Children's Mercy, The Children's Mercy Hospital Northland Campus a The Children's Mercy South Campus.

Subjekty účastnící se této studie se bude skládat z celkem 220 dětí a dospívajících ve věku od 7 do 15 let s pohlavím a etnickým rozdělením reprezentujícím populaci pacientů obsluhovanou Children's Mercy Hospital (CMH; z reprezentativního období 12 měsíců) následovně : Bílá, 59,6 %; Afroameričan, 31,9 %; hispánský, 4,9 %; Asiaté, 0,6 %; Indián, 0,1 %; Ostatní, 2,9 %. Rozdělení pohlaví je 44,4 % žen a 55,6 % mužů. Bude přijat stejný počet dětských pacientů, kteří splňují kritéria DSM-IV pro primární diagnózu ADHD nebo ADD (~33 %), a kontrol odpovídající věku a pohlaví (~67 %). Pacienti představují populaci dětí, u kterých lze důvodně očekávat, že budou léčeni léky, jejichž eliminace z těla je primárně závislá na CYP2D6. Příkladem je atomoxetin, také známý jako Strattera®. Každý pacient bude požádán, aby pozval svého přítele, aby se s ním zúčastnil fenotypové studie, přičemž jako referenci poskytne populaci bez ADHD. Další fenotypové návštěvy budou probíhat každých šest měsíců (celkem 7 návštěv). Odůvodnění: Za předpokladu 10% míry opotřebení pro druhou návštěvu se očekává, že velikost vzorku poskytne přibližně 25 pacientů a 25 kontrol (celkem 50 subjektů) v každé počáteční dvouleté věkové skupině: 7,0 až 9,0 let, 9,1 až 11,0 let, 11,1 až 13,0 let a 13,1 až 15,0 let.

Subjekty budou zapsány na základě informovaného souhlasu/souhlasu a budou studovány jako ambulantní pacienti s využitím zdrojů poskytnutých oddělením pediatrického klinického výzkumu se sídlem v oddělení klinické farmakologie a lékařské toxikologie v nemocnici Children's Mercy Hospital. U skupiny ADHD bude umožněna účast pacientům léčeným atomoxetinem v době zařazení do studie. Ačkoli studie in vitro ukazují, že atomoxetin inhibuje aktivitu CYP2D6 o ~50 %, nezdá se, že by došlo k žádnému účinku in vivo, protože farmakokinetika jednorázové dávky substrátu CYP2D6, desipraminu, nebyla ovlivněna čtyřdenním podáváním atomoxetinu 60 mg b.i.d. Neočekáváme tedy žádný zásadní vliv na biotransformaci DM. Kromě toho, pokud jsou během šestiměsíčního intervalu mezi fenotypovými návštěvami pacientům s ADHD předepsány léky, které jsou známými inhibitory CYP2D6, bude jim umožněno pokračovat ve studii; bude zaznamenána dávka a datum zahájení těchto léků a bude stanoven účinek inhibitoru na fenotyp CYP2D6 (poměr metabolitů v moči a endogenní biomarker). Tyto datové body budou vyloučeny z ontogeneze a korelační analýzy genotyp-fenotyp

Předstudijní návštěva. (asi 1 hodina) Při screeningové návštěvě bude potenciálním subjektům (a jejich rodičům) poskytnut popis navrhované studie. Poté, co budou zodpovězeny všechny jejich otázky, dostanou kopii formuláře svolení/souhlasu k přezkoumání a podepsání Subjektům bude poté přezkoumána jejich anamnéza a užívání léků, včetně použití volně prodejných a bylinných přípravků. Všem subjektům bude poskytnuto kompletní fyzikální vyšetření lékařem, včetně vitálních funkcí (krevní tlak, srdeční frekvence, frekvence dýchání, teplota, výška a hmotnost) a posouzení pubertálního vývoje podle Tannerova stádia. Vývoj prsou bude posouzen vizuální kontrolou. Pubické ochlupení bude posouzeno vizuální kontrolou. Objem varlat bude měřen přímým srovnáním s kuličkami orchidometru. Tanner Staging bude posouzen lékařem vhodným pro pohlaví. Krev bude odebrána jehlou pro stanovení chemie séra, jaterních funkčních testů a hematologického panelu; část bude také uchována pro testování DNA (celkem přibližně 2 čajové lžičky krve). Moč bude odebírána pro analýzu moči pomocí Micro. Pro minimalizaci nepohodlí lze na místo aplikovat znecitlivující krém. U žen v plodném věku bude proveden těhotenský test z moči.

Testování DNA, označované jako „genotypování“, bude prováděno kombinací technologií navržených tak, aby detekovaly variace od úrovně jednoho nukleotidu (včetně polymorfismů, inzercí a delecí) po větší genové delece, přeuspořádání, hybridní struktury a variace počtu kopií za použití zavedených metod. v Laboratoři vývojové farmakologie a experimentální terapie. Jakmile se technologie sekvenování nové generace ustálí, stávající technologie budou nahrazeny sekvenováním nové generace, aby bylo možné hodnotit celou oblast genu spíše než na jednotlivých místech.

1. den studie (přibližně 5 hodin dlouhý) Během přibližně jednoho týdne předstudijní návštěvy budou subjekty přijaty do studijní jednotky. 2 hodiny před plánovanou návštěvou se dítě musí zdržet jídla. Před podáním dávky subjekty zcela vyprázdní svůj močový měchýř a poskytnou slepý vzorek moči. Každému subjektu bude poté podána jedna dávka 0,5 mg/kg DM jako Robitussin Cough (7,5 mg/5 ml; bez alkoholu, příchuť ovocný punč). Veškerá moč vytvořená během 4hodinové studie bude shromážděna. Moč bude zadržena pro analýzu DM a jeho tří metabolitů a pro metabolomické analýzy. Jednu hodinu po podání dávky bude subjektům poskytnuto malé jídlo, které si vyberou ze standardního nemocničního menu. Těhotenský test bude proveden u žen v plodném věku. Subjekty budou požádány, aby zajistily nádechy (inspirační a exspirační) po dobu deseti minut ručním nepřímým kalorimetrem (tj. MedGen/Body Gem: také známý jako "GEM") s klipem na nose. Měření získaná pro klidové metabolické rychlosti se provedou před podáním dávky a 4 hodiny po dávce.

Subjektů bude dotázáno, jak se cítí během studie a před odchodem domů.

Den studie 2-7 (dlouhé asi 5 hodin) Zbývající návštěvy se uskuteční každých 6 měsíců po 1. dnu studie; studijní sezení bude odloženo o 1-2 týdny, pokud subjekty trpí příznaky podobnými chřipce. 2 hodiny před plánovanou návštěvou se dítě musí zdržet jídla. U žen bude před podáním DM proveden těhotenský test s použitím vzorku moči před podáním dávky.

Subjektům bude poté přezkoumána jejich anamnéza a užívání léků, včetně použití volně prodejných a bylinných léků. Subjektům bude poskytnuto kompletní fyzikální vyšetření lékařem, včetně vitálních funkcí (krevní tlak, srdeční frekvence, frekvence dýchání, teplota, výška a hmotnost) a posouzení pubertálního vývoje podle Tannerova stádia. Vývoj prsou bude posouzen vizuální kontrolou. Pubické ochlupení bude posouzeno vizuální kontrolou. Objem varlat bude měřen přímým srovnáním s kuličkami orchidometru. Tanner Staging bude posouzen lékařem vhodným pro pohlaví.

Předměty budou přijímány do studijní jednotky. Před podáním dávky subjekty zcela vyprázdní svůj močový měchýř a poskytnou slepý vzorek moči. Každému subjektu bude poté podána jedna dávka 0,5 mg/kg DM jako Robitussin Cough (7,5 mg/5 ml; bez alkoholu, příchuť ovocný punč). Veškerá moč vytvořená během 4hodinové studie bude shromážděna. Moč bude zadržena pro analýzu DM a jeho tří metabolitů a pro metabolomické analýzy. Jednu hodinu po podání dávky bude subjektům poskytnuto malé jídlo, které si vyberou ze standardního nemocničního menu. Těhotenský test bude proveden u žen v plodném věku. Subjekty budou požádány, aby zajistily nádechy (inspirační a exspirační) po dobu deseti minut ručním nepřímým kalorimetrem (tj. MedGen/Body Gem: také známý jako "GEM" s klipem na nose. Měření získaná pro klidové metabolické rychlosti proběhnou před podáním dávky. Subjektů bude dotázáno, jak se cítí během studie a před odchodem domů.