CYP2D6:n ja CYP3A4:n vaihtelun biomarkkerit pediatriassa

Tämä ehdotus on jatkoa aiemmille ja meneillään oleville pitkittäistutkimuksille, joilla karakterisoidaan farmakogenetiikan ja ontogeenisuuden suhteellista vaikutusta CYP2D6- ja CYP3A4-aktiivisuuden vaihteluun syntymän ja nuoruuden välillä. Tarkemmin sanottuna tutkimusohjelman yleisenä tavoitteena on testata hypoteesia, jonka mukaan geneettinen vaihtelevuus ontogenian sijaan on CYP2D6- ja CYP3A4-aktiivisuuden ensisijainen vaihtelun lähde murrosiässä. Tämä tutkimus laajentaa nykyistä pitkittäisfenotyyppitutkimusten sarjaamme ja on poikkileikkaustutkimus 7–15-vuotiailla lapsilla, joita tutkitaan seitsemän kertaa 6 kuukauden välein.

Lapset rekrytoidaan Children's Mercy -sairaaloista ja -klinikoista, Children's Mercy Hospital Northland -kampuksesta ja Children's Mercy South Campuksesta.

Tähän tutkimukseen osallistuvat koehenkilöt koostuvat yhteensä 220:sta 7–15-vuotiaasta lapsesta ja nuoresta, joiden sukupuoli ja etninen jakautuminen edustaa Children's Mercy Hospitalin (CMH; edustavalta 12 kuukauden ajanjaksolta) potilaspopulaatiota seuraavasti: : valkoinen, 59,6 %; afroamerikkalainen, 31,9 %; latinalaisamerikkalainen, 4,9 %; aasialaiset, 0,6 %; intiaanit, 0,1 %; Muut, 2,9 %. Sukupuolijakauma on 44,4 % naisia ​​ja 55,6 % miehiä. Rekrytoidaan yhtä suuri määrä lapsipotilaita, jotka täyttävät ADHD:n tai ADD:n ensisijaisen diagnoosin DSM-IV-kriteerit (noin 33 %) sekä iän ja sukupuolen mukaiset kontrollit (~ 67 %). Potilaat edustavat lapsipopulaatiota, jonka voidaan kohtuudella odottaa saavansa hoitoa lääkkeellä, jonka eliminaatio elimistöstä on ensisijaisesti riippuvainen CYP2D6:sta. Esimerkki on atomoksetiini, joka tunnetaan myös nimellä Strattera®. Jokaista potilasta pyydetään kutsumaan ystävä osallistumaan fenotyyppitutkimukseen heidän kanssaan tarjoamalla referenssinä ei-ADHD-populaatio. Ylimääräisiä fenotyyppikäyntejä tehdään kuuden kuukauden välein (yhteensä 7 käyntiä). Perustelut: Olettaen 10 %:n poistumisasteeksi toisella käynnillä, otoskoon odotetaan sisältävän noin 25 potilasta ja 25 kontrollia (yhteensä 50 koehenkilöä) jokaisella ensimmäisellä 2 vuoden ikäryhmällä: 7,0 - 9,0 vuotta, 9,1 - 11,0 vuotta, 11,1-13,0 v ja 13,1-15,0 v.

Koehenkilöt rekisteröidään tietoon perustuvalla luvalla/suostuksella, ja heitä opiskellaan avohoidossa käyttämällä Lasten armosairaalan kliinisen farmakologian ja lääketieteellisen toksikologian osastossa sijaitsevan lasten kliinisen tutkimusyksikön tarjoamia resursseja. ADHD-ryhmässä potilaat, joita hoidetaan atomoksetiinilla tutkimukseen ilmoittautumisajankohtana, voivat osallistua. Vaikka in vitro -tutkimukset osoittavat, että atomoksetiini estää CYP2D6-aktiivisuutta noin 50 %:lla, sillä ei näytä olevan mitään vaikutusta in vivo, koska neljän päivän atomoksetiini 60 mg b.i.d ei vaikuttanut CYP2D6-substraatin, desipramiinin, kerta-annoksen farmakokinetiikkaan. Näin ollen emme odota mitään merkittävää vaikutusta DM-biotransformaatioon. Lisäksi, jos ADHD-potilaille määrätään kuuden kuukauden fenotyyppikäyntien välisenä aikana lääkkeitä, jotka ovat tunnettuja CYP2D6-estäjiä, heidän sallitaan jatkaa tutkimusta; näiden lääkkeiden annos ja aloituspäivä kirjataan ja estäjän vaikutus CYP2D6-fenotyyppiin (virtsan metaboliittisuhde ja endogeeninen biomarkkeri) määritetään. Nämä datapisteet jätetään pois ontogenia- ja genotyyppi-fenotyyppikorrelaatioanalyysistä

Esiopetuskäynti. (noin 1 tunti) Seulontakäynnillä mahdollisille koehenkilöille (ja heidän vanhemmilleen) annetaan kuvaus ehdotetusta tutkimuksesta. Kun kaikkiin kysymyksiin on vastattu, heille annetaan kopio luvasta/hyväksyntälomakkeesta tarkastelua ja allekirjoitusta varten. Tutkittavien sairaushistoria ja lääkkeiden käyttö, mukaan lukien reseptivapaiden lääkkeiden ja yrttilääkkeiden käyttö, tarkistetaan. Lääkäri suorittaa kaikille koehenkilöille täydellisen fyysisen tutkimuksen, joka sisältää elintärkeät merkit (verenpaine, syke, hengitysnopeus, lämpötila, pituus ja paino) sekä arvioinnin murrosiän kehityksestä Tanner-vaiheen mukaan. Rintojen kehitys arvioidaan silmämääräisellä tarkastuksella. Häpykarvat arvioidaan silmämääräisellä tarkastuksella. Kivesten tilavuus mitataan vertaamalla suoraan orkidometrihelmiin. Tanner Staging arvioi sukupuoleen sopiva lääkäri. Veri otetaan neulanpistolla seerumikemiaa, maksan toimintakokeita ja hematologiapaneelia varten; osa säilytetään myös DNA-testausta varten (noin 2 teelusikallista verta). Virtsa kerätään virtsaanalyysiä varten Microlla. Paikalle voidaan levittää puututtavaa voidetta epämukavuuden minimoimiseksi. Hedelmällisessä iässä oleville naisille tehdään virtsaraskaustesti.

DNA-testaus, josta käytetään nimitystä "genotyypitys", suoritetaan yhdistelmällä tekniikoita, jotka on suunniteltu havaitsemaan yhden nukleotidin vaihtelut (mukaan lukien polymorfismit, insertiot ja deleetiot) suurempiin geenideleetioihin, uudelleenjärjestelyihin, hybridirakenteisiin ja kopiomäärän vaihteluihin vakiintuneita menetelmiä käyttäen. kehitysfarmakologian ja kokeellisen terapian laboratoriossa. Kun seuraavan sukupolven sekvensointitekniikka vakiintuu, nykyiset tekniikat korvataan seuraavan sukupolven sekvensoinnilla, jotta se pystyy arvioimaan koko geenialueen yksittäisten paikkojen sijaan.

Opintopäivä 1 (pituus noin 5 tuntia) Noin viikon sisällä esiopetuskäynnistä otetaan koehenkilöt opintojaksoon. Lapsen on pidättäydyttävä syömästä 2 tuntia ennen suunniteltua käyntiä. Ennen annostelua koehenkilöt tyhjentävät rakkonsa kokonaan ja antavat tyhjän virtsanäytteen. Kullekin kohteelle annetaan sitten yksi 0,5 mg/kg annos DM:ää Robitussin Coughna (7,5 mg/5 ml; alkoholiton, hedelmäpunssin maku). Kaikki 4 tunnin tutkimusjakson aikana tuotettu virtsa kerätään. Virtsa säilytetään DM:n ja sen kolmen metaboliitin analysointia ja metabolomia analyysejä varten. Tunti annostelun jälkeen koehenkilöille tarjotaan pieni ateria, jonka he valitsevat sairaalan normaalivalikosta. Hedelmällisessä iässä oleville naisille tehdään raskaustesti. Koehenkilöitä pyydetään hengittämään (sisään- ja uloshengitystä) kymmenen minuutin ajan kädessä pidettävällä epäsuoralla kalorimetrillä (esim. MedGen/Body Gem: tunnetaan myös nimellä "GEM") ja klipsi nenässä. Lepotilassa saadut aineenvaihduntanopeudet mitataan ennen annostelua ja 4 tuntia annoksen jälkeen.

Koehenkilöiltä kysytään, miltä heistä tuntuu tutkimuksen aikana ja ennen kotiin lähtöä.

Tutkimuspäivä 2-7 (noin 5 tuntia pitkä) Loput käynnit tehdään 6 kuukauden välein tutkimuspäivän 1 jälkeen; tutkimusjaksot viivästyvät 1-2 viikkoa, jos koehenkilöillä on flunssan kaltaisia ​​oireita. Lapsen on pidättäydyttävä syömästä 2 tuntia ennen suunniteltua käyntiä. Naisille tehdään raskaustesti ennen annosta otetun virtsanäytteen avulla ennen DM-annostusta.

Tämän jälkeen koehenkilöiden sairaushistoria ja lääkkeiden käyttö tarkistetaan, mukaan lukien reseptivapaiden lääkkeiden ja yrttilääkkeiden käyttö. Lääkäri suorittaa koehenkilöille täydellisen fyysisen tutkimuksen, joka sisältää elintärkeät merkit (verenpaine, syke, hengitystaajuus, lämpötila, pituus ja paino) sekä arvioinnin murrosiän kehityksestä Tanner-vaiheen mukaan. Rintojen kehitys arvioidaan silmämääräisellä tarkastuksella. Häpykarvat arvioidaan silmämääräisellä tarkastuksella. Kivesten tilavuus mitataan vertaamalla suoraan orkidometrihelmiin. Tanner Staging arvioi sukupuoleen sopiva lääkäri.

Opintojaksoon otetaan aineita. Ennen annostelua koehenkilöt tyhjentävät rakkonsa kokonaan ja antavat tyhjän virtsanäytteen. Kullekin kohteelle annetaan sitten yksi 0,5 mg/kg annos DM:ää Robitussin Coughna (7,5 mg/5 ml; alkoholiton, hedelmäpunssin maku). Kaikki 4 tunnin tutkimusjakson aikana tuotettu virtsa kerätään. Virtsa säilytetään DM:n ja sen kolmen metaboliitin analysointia ja metabolomia analyysejä varten. Tunti annostelun jälkeen koehenkilöille tarjotaan pieni ateria, jonka he valitsevat sairaalan normaalivalikosta. Hedelmällisessä iässä oleville naisille tehdään raskaustesti. Koehenkilöitä pyydetään hengittämään (sisään- ja uloshengitystä) kymmenen minuutin ajan kädessä pidettävällä epäsuoralla kalorimetrillä (esim. MedGen/Body Gem: tunnetaan myös nimellä "GEM", jossa on klipsi nenässä. Lepotilassa saadut aineenvaihduntanopeudet mitataan ennen annostelua. Koehenkilöiltä kysytään, miltä heistä tuntuu tutkimuksen aikana ja ennen kotiin lähtöä.