Biomarkery zmienności CYP2D6 i CYP3A4 w pediatrii

Ta propozycja stanowi kontynuację wcześniejszych i trwających badań podłużnych w celu scharakteryzowania względnego udziału farmakogenetyki i ontogenezy w zmienności aktywności CYP2D6 i CYP3A4 między urodzeniem a okresem dojrzewania. Konkretnie, ogólnym celem programu badawczego jest przetestowanie hipotezy, że zmienność genetyczna, a nie ontogeneza, jest głównym źródłem zmienności aktywności CYP2D6 i CYP3A4 w okresie dojrzewania. To badanie rozszerzy naszą obecną serię podłużnych badań fenotypowania i będzie badaniem przekrojowym u dzieci w wieku 7-15 lat, badanych siedmiokrotnie w odstępie 6 miesięcy.

Dzieci będą rekrutowane ze szpitali i klinik Children's Mercy, kampusu Children's Mercy Hospital Northland i kampusu Children's Mercy South.

Pacjenci biorący udział w tym badaniu będą składać się łącznie z 220 dzieci i młodzieży w wieku od 7 do 15 lat, reprezentujących płeć i pochodzenie etniczne populacji pacjentów obsługiwanych przez Children's Mercy Hospital (CMH; z reprezentatywnego okresu 12 miesięcy) w następujący sposób : biały, 59,6%; Afroamerykanie, 31,9%; Hiszpanie, 4,9%; Azjaci, 0,6%; Rdzenni Amerykanie, 0,1%; Inne, 2,9%. Rozkład płci to 44,4% kobiet i 55,6% mężczyzn. Zrekrutowana zostanie taka sama liczba pacjentów pediatrycznych, którzy spełniają kryteria DSM-IV dla pierwotnego rozpoznania ADHD lub ADD (~33%) oraz grupa kontrolna dobrana pod względem wieku i płci (~67%). Pacjenci reprezentują populację dzieci, które mogą racjonalnie oczekiwać, że będą leczone lekiem, którego eliminacja z organizmu zależy przede wszystkim od CYP2D6. Przykładem jest atomoksetyna, znana również jako Strattera®. Każdy pacjent zostanie poproszony o zaproszenie znajomego do udziału w badaniu fenotypowym, podając jako punkt odniesienia populację bez ADHD. Dodatkowe wizyty w celu fenotypowania będą odbywać się co sześć miesięcy (łącznie 7 wizyt). Uzasadnienie: Zakładając 10% współczynnik ścierania dla drugiej wizyty, oczekuje się, że wielkość próby zapewni około 25 pacjentów i 25 kontroli (łącznie 50 osób) w każdym początkowym przedziale 2-letnim: 7,0 do 9,0 lat, 9,1 do 11,0 lat, 11,1 do 13,0 lat i 13,1 do 15,0 lat.

Pacjenci zostaną zapisani na podstawie świadomej zgody/zgody i będą badani jako pacjenci ambulatoryjni z wykorzystaniem zasobów zapewnianych przez Pediatryczną Jednostkę Badań Klinicznych zlokalizowaną w Oddziale Farmakologii Klinicznej i Toksykologii Medycznej Szpitala Dziecięcego Miłosierdzia. W przypadku grupy ADHD do udziału zostaną dopuszczeni pacjenci leczeni atomoksetyną w momencie włączenia do badania. Chociaż badania in vitro wskazują, że atomoksetyna hamuje aktywność CYP2D6 o około 50%, wydaje się, że in vivo nie ma żadnego wpływu, ponieważ farmakokinetyka pojedynczej dawki substratu CYP2D6, dezypraminy, nie uległa zmianie po czterech dniach przyjmowania atomoksetyny w dawce 60 mg dwa razy na dobę. Dlatego nie spodziewamy się żadnego istotnego wpływu na biotransformację DM. Ponadto, jeśli podczas sześciomiesięcznej przerwy między wizytami fenotypowania pacjentom z ADHD zostaną przepisane leki, które są znanymi inhibitorami CYP2D6, będą mogli kontynuować badanie; odnotowana zostanie dawka i data rozpoczęcia przyjmowania tych leków oraz zostanie określony wpływ inhibitora na fenotyp CYP2D6 (stosunek metabolitów w moczu i endogenny biomarker). Te punkty danych zostaną wykluczone z analizy ontogenezy i korelacji genotyp-fenotyp

Wizyta przed nauką. (ok. 1 godziny) Podczas wizyty przesiewowej potencjalnym badanym (oraz ich rodzicom) zostanie przedstawiony opis proponowanego badania. Po udzieleniu odpowiedzi na wszystkie pytania, otrzymają kopię formularza pozwolenia/zgody do przejrzenia i podpisania. Następnie zostanie przeanalizowana ich historia medyczna i stosowanie leków, w tym stosowanie leków dostępnych bez recepty i leków ziołowych. Wszyscy uczestnicy zostaną poddani kompletnemu badaniu fizykalnemu przez lekarza, w tym parametrom życiowym (ciśnienie krwi, częstość akcji serca, częstość oddechów, temperatura, wzrost i waga) oraz ocenie dojrzewania płciowego według stadium Tannera. Rozwój piersi zostanie oceniony na podstawie oględzin. Włosy łonowe zostaną ocenione poprzez oględziny. Objętość jądra zostanie zmierzona poprzez bezpośrednie porównanie z kulkami orchidometru. Stopień zaawansowania Tannera zostanie oceniony przez lekarza odpowiedniego pod względem płci. Krew zostanie pobrana igłą do badań biochemicznych surowicy, testów czynnościowych wątroby i panelu hematologicznego; część zostanie również zatrzymana do badań DNA (łącznie około 2 łyżeczek krwi). Mocz zostanie pobrany do analizy moczu za pomocą mikro. Aby zminimalizować dyskomfort, na miejsce można nałożyć krem ​​znieczulający. U kobiet w wieku rozrodczym zostanie wykonany test ciążowy z moczu.

Testy DNA, określane jako „genotypowanie”, będą przeprowadzane za pomocą kombinacji technologii zaprojektowanych w celu wykrywania zmian na poziomie pojedynczych nukleotydów (w tym polimorfizmów, insercji i delecji) do delecji większych genów, rearanżacji, struktur hybrydowych i zmian liczby kopii przy użyciu ustalonych metod w Pracowni Farmakologii Rozwojowej i Terapii Doświadczalnej. Gdy technologia sekwencjonowania nowej generacji zostanie ustanowiona, istniejące technologie zostaną zastąpione przez sekwencjonowanie nowej generacji ze względu na jego zdolność do oceny całego regionu genu, a nie w poszczególnych lokalizacjach.

Dzień 1 badania (około 5 godzin) W ciągu około tygodnia od wizyty poprzedzającej badanie, badani zostaną przyjęci do jednostki badawczej. Dziecko musi powstrzymać się od jedzenia na 2 godziny przed planowaną wizytą. Przed dawkowaniem pacjenci całkowicie opróżniają swoje pęcherze i dostarczają ślepą próbkę moczu. Każdy pacjent otrzyma następnie pojedynczą dawkę 0,5 mg/kg DM w postaci Robitussin na kaszel (7,5 mg/5 ml; bezalkoholowy, o smaku ponczu owocowego). Cały mocz wyprodukowany w ciągu 4-godzinnego okresu badania zostanie zebrany. Mocz zostanie zatrzymany do analizy DM i jej trzech metabolitów oraz do analiz metabolomicznych. Godzinę po podaniu pacjentom zapewniony zostanie mały posiłek, który wybiorą ze standardowego menu szpitalnego. U kobiet w wieku rozrodczym zostanie wykonany test ciążowy. Badani zostaną poproszeni o wykonanie oddechów (wdechowych i wydechowych) przez dziesięć minut za pomocą ręcznego kalorymetru pośredniego (tj. MedGen/Body Gem: znany również jako „GEM”) z klipsem na nosie. Pomiary spoczynkowego tempa metabolizmu zostaną wykonane przed podaniem dawki i 4 godziny po podaniu dawki.

Pacjenci zostaną zapytani, jak się czują podczas badania i przed powrotem do domu.

Dzień nauki 2-7 (około 5 godzin) Pozostałe wizyty będą odbywać się co 6 miesięcy po pierwszym dniu nauki; sesje badawcze zostaną opóźnione o 1-2 tygodnie, jeśli badani cierpią na objawy grypopodobne. Dziecko musi powstrzymać się od jedzenia na 2 godziny przed planowaną wizytą. W przypadku kobiet test ciążowy zostanie przeprowadzony z użyciem próbki moczu przed podaniem dawki przed podaniem dawki DM.

Pacjenci zostaną następnie poddani przeglądowi historii medycznej i stosowania leków, w tym stosowania leków dostępnych bez recepty i leków ziołowych. Pacjenci zostaną poddani kompletnemu badaniu fizykalnemu przez lekarza, w tym oznakom życia (ciśnienie krwi, częstość akcji serca, częstość oddechów, temperatura, wzrost i waga) oraz ocenie dojrzewania płciowego według stadium Tannera. Rozwój piersi zostanie oceniony na podstawie oględzin. Włosy łonowe zostaną ocenione poprzez oględziny. Objętość jądra zostanie zmierzona poprzez bezpośrednie porównanie z kulkami orchidometru. Stopień zaawansowania Tannera zostanie oceniony przez lekarza odpowiedniego pod względem płci.

Pacjenci zostaną przyjęci do jednostki badawczej. Przed dawkowaniem pacjenci całkowicie opróżniają swoje pęcherze i dostarczają ślepą próbkę moczu. Każdy pacjent otrzyma następnie pojedynczą dawkę 0,5 mg/kg DM w postaci Robitussin na kaszel (7,5 mg/5 ml; bezalkoholowy, o smaku ponczu owocowego). Cały mocz wyprodukowany w ciągu 4-godzinnego okresu badania zostanie zebrany. Mocz zostanie zatrzymany do analizy DM i jej trzech metabolitów oraz do analiz metabolomicznych. Godzinę po podaniu pacjentom zapewniony zostanie mały posiłek, który wybiorą ze standardowego menu szpitalnego. U kobiet w wieku rozrodczym zostanie wykonany test ciążowy. Badani zostaną poproszeni o wykonanie oddechów (wdechowych i wydechowych) przez dziesięć minut za pomocą ręcznego kalorymetru pośredniego (tj. MedGen/Body Gem: znany również jako „GEM” z klipsem na nosie. Pomiary spoczynkowej przemiany materii zostaną wykonane przed podaniem dawki. Pacjenci zostaną zapytani, jak się czują podczas badania i przed powrotem do domu.