Životnost 4°C versus Optisol v médiu pro ukládání rohovky

1. Účel/ Specifické cíle

   Účelem této studie je porovnat úspěšnost uložení rohovky dárce v Optisol GS, současném standardním řešení, ve kterém je rohovka dárce uložena před operací, s uložením rohovky dárce v Life 4°C, novějším řešení. Laboratorní testy, které vedly k nedávnému schválení tohoto nového skladovacího řešení Food and Drug Administration, naznačují, že toto řešení může podporovat zdraví endoteliálních buněk lépe než Optisol GS. Přestože existují rozsáhlé údaje in vitro a ex vivo týkající se Life 4°C a jeho transportní komory, neexistují žádné krátkodobé nebo dlouhodobé studie in vivo, které by klinicky zkoumaly jeho účinnost a vztah mezi výkonem a Optisol GS a jeho transportní komoře. Tato studie byla navržena tak, aby tyto otázky prozkoumala.

   1.1 CÍLE STUDIE Primární cíl: Zjistit, zda je ztráta endoteliálních buněk po EK srovnatelná 6 měsíců po operaci pro rohovky dárce konzervované v Life 4°C vs. média pro uchovávání rohovky Optisol GS

   Sekundární cíl: Zjistit, zda je jasnost štěpu po EK srovnatelná 6 měsíců po operaci pro rohovky dárce konzervované v Life 4°C oproti médiu pro uchovávání rohovky Optisol GS

2. Pozadí a význam

V současné době odhaduje Americká asociace oční banky (EBAA), že 3500 až 5000 Američanů čeká v průměru 1-2 měsíce, než podstoupí penetrující nebo endoteliální keratoplastiku. Celosvětová situace je podstatně složitější a dostupnost tkáně je mnohem omezenější. S ohledem na tento nedostatek tkáně bylo provedeno mnoho výzkumů s cílem prodloužit dobu skladování dárce a přesto zachovat životaschopný endotel, který je zásadní pro úspěšnou transplantaci. Prodloužená doba uchování proměnila transplantaci rohovky na elektivní zákrok a usnadnila dostupnost dostupné dárcovské tkáně. Uchování rohovky však zahrnuje mnoho dalších faktorů kromě pouhého prodloužení doby skladování dárce.

Funkční stav endotelu, epitelu a trvalá deturgescence rohovky po zachování rohovky mají velký klinický význam a přispívají především k úspěchu chirurgického výsledku. Další oblasti zájmu, které je třeba řešit při vývoji kompletního média pro konzervaci rohovky, zahrnují zlepšení hojení ran rohovky a snížení nebo odstranění normální progresivní ztráty endoteliálních buněk po keratoplastice. Zachování existujících endoteliálních buněk během konzervace rohovky je důležité, protože endoteliální buňky se po penetrující keratoplastice nadále ztrácejí rychleji než normální stárnutí1. K obnovení zrakové ostrosti je nutné včasné a dostatečné zhojení tkání rohovky.

Současným „zlatým standardem“ v médiu pro konzervaci rohovky 4 °C je Optisol GS (Bausch & Lomb Surgical, Inc.). Toto je vylepšená formulace Optisol 2 (Chiron Vision, Irvine, CA, U.S.A.) modifikovaná přidáním 200 ug/ml streptomycin sulfátu. Optisol chránil endotel rohovky stejně jako DexSol (Chiron Vision, Irvine, CA, USA), předchozí široce používané médium pro konzervaci rohovky, a byl lepší v prevenci stromálního otoku během skladování 2-5. Přidání streptomycinu ke gentamicinu v médiu pro konzervaci rohovky bylo účinné proti rezistentním kmenům bakterií6. Optisol GS vykazoval zlepšenou antibakteriální aktivitu bez jakékoli zvýšené toxicity pro endotel7-8. In vitro studie lidských rohovek uchovávaných v Optisol GS dospěly k závěru, že doba skladování při 4 °C je omezena neschopností zachovat epitel rohovky delší než 1 týden, ačkoli 84 % endotelu bylo považováno za životaschopné po třech týdnech skladování 9,10. Klinická studie zjistila, že pravděpodobnost epiteliálního defektu 1 den po penetrující keratoplastice se zvyšuje s delší dobou skladování v Optisol GS11.

Optisol GS je médium obsahující chondroitin sulfát doplněné o dextran, další antioxidanty, zdroje energie a výživné substráty12. Tyto složky řeší pochopení, že rohovka je stále metabolicky aktivní při nízkých skladovacích teplotách. Složení syntetických médií musí řešit zvýšenou hydrataci stromatu, ke které dochází při delší době konzervace a snížených teplotách. Při progresi střednědobého vývoje média pro konzervaci rohovky byl přidán dextran, osmotické činidlo, ve snaze snížit intraoperační otok spojený s médiem obsahujícím chondroitin sulfát. Chondroitin sulfát a dextran pomáhají při prevenci stromální hydratace zvýšením koloidního osmotického tlaku ve vodném prostředí obklopujícím uloženou rohovku. Trvalá deturescence rohovky během a po konzervaci rohovky má velký klinický význam, snižuje problémy s manipulací a sešíváním, s nimiž se transplantační chirurg setká, a snižuje tak riziko selhání štěpu

Vynikající médium pro konzervaci rohovky by udrželo buněčnou životaschopnost a zároveň prodloužilo současné doby skladování pro účinnější využití dárcovské tkáně, zabránilo by stromálnímu otoku, aby se usnadnila keratoplastika, a eliminovalo nebo potlačilo mikrobiologický růst, aby se zabránilo vzácné, ale katastrofické endoftalmitidě.

2.1 VYŠETŘOVACÍ PROSTŘEDEK Life 4°C je nové pokročilé médium pro konzervaci rohovky schválené FDA (30 ml) pro skladování lidských rohovek vhodné pro keratoplastiku po dobu až 14 dnů v chladničce (2-8°C). Life 4°C je sterilní, nepyrogenní, pokročilé pufrované médium pro konzervaci rohovky, které je doplněno chondroitin sulfátem (stabilizátor membrány), rekombinantním lidským inzulínem (urychlovač buněčného metabolismu), Dextranem (osmotická látka), glutathionem (antioxidant, lapač volných radikálů). , enzymový kofaktor), stabilizovaný L-glutamin, prekurzory ATP, doplňky živin pro buňky, aminokyseliny, vitamíny, stopové prvky, gentamycin, streptomycin a fenolová červeň (ukazatel pH). Life 4°C byl formulován tak, aby byl použit v plném rozsahu po dobu skladování rohovky, a to prevencí stromálního otoku, zachováním epitelu rohovky a zajištěním optimální ochrany endoteliálních buněk.

TRANSEND je navíc nový systém pro ukládání, prohlížení a transport rohovky. Byl navržen pro výkon, aby splnil požadavky na rozšířené skladování, zrcadlovou mikroskopii a přepravu. Prohlížecí komora TRANSEND je navržena tak, aby vyhovovala větším sklerálním okrajům potřebným pro nejnovější chirurgické zákroky. Větší objem média (30 ml) a větší průtok tekutiny do rohovky snižuje hromadění metabolického odpadu, který je důležitý pro zdraví buněk. Zvýšený objem média má za následek vynikající zachování rohovky s minimálním otokem rohovky během skladování. Prohlížecí komora TRANSEND využívá jak horní těsnění, tak boční těsnění O-kroužkem pro zajištění nepropustnosti. Rohovka je bezpečně držena během skladování, zrcadlové mikroskopie a přepravy. Pozorovací komora je ozářena gama zářením, proto zde nejsou žádné zbytky ETO. Použití nových tamper těsnění eliminuje použití vysokoteplotních tepelných těsnění. Vnější přepravní kontejner umožňuje, aby se vnitřní zobrazovací komora dostala k chirurgovi suchá a bezpečná.