Élettartam 4°C szemben az Optisollal a szaruhártya-tároló közegben

1. Cél/specifikus célok

   Ennek a tanulmánynak az a célja, hogy összehasonlítsa a donor szaruhártya tárolásának sikerességét az Optisol GS-ben, a jelenlegi standard megoldásban, amelyben a donor szaruhártyát a műtét előtt tárolják, és a donor szaruhártya tárolásának sikerességét Life 4°C-on, egy újabb megoldással. A laboratóriumi vizsgálatok, amelyek az új tárolási megoldásnak a Food and Drug Administration által a közelmúltban történő jóváhagyásához vezettek, azt sugallták, hogy ez a megoldás jobban támogatja az endothelsejtek egészségét, mint az Optisol GS. Noha kiterjedt in vitro és ex vivo adatok állnak rendelkezésre a Life 4°C-ról és annak szállítókamrájáról, nincsenek rövid vagy hosszú távú in vivo vizsgálatok annak klinikai teljesítőképességének, illetve az Optisol GS-hez és a szállítókamrájához való viszonyának vizsgálatára. Ez a tanulmány ezeknek a kérdéseknek a vizsgálatára készült.

   1.1 A VIZSGÁLAT CÉLKITŰZÉSEI Elsődleges cél: Annak meghatározása, hogy az EK-t követő endothelsejt-veszteség összehasonlítható-e a műtét után 6 hónappal a 4°C-on megőrzött donor szaruhártya és az Optisol GS szaruhártyatároló tápközeg esetében.

   Másodlagos célkitűzés: Annak meghatározása, hogy az EK utáni graft tisztasága összehasonlítható-e a műtét utáni 6 hónappal a 4°C-on megőrzött donor szaruhártya esetében az Optisol GS szaruhártya-tároló táptal szemben.

2. Háttér és jelentősége

Jelenleg az Eye Bank Association of America (EBAA) becslései szerint 3500-5000 amerikai vár átlagosan 1-2 hónapot a penetráló vagy endothel keratoplasztikára. A helyzet világszerte lényegesen összetettebb, a szövetek elérhetősége pedig sokkal korlátozottabb. Tekintettel erre a szövethiányra, sok kutatást végeztek a donor tárolási idejének meghosszabbítása és az életképes endotélium fenntartása érdekében, ami elengedhetetlen a sikeres transzplantációhoz. A meghosszabbított megőrzési idő a szaruhártya-transzplantációs műtétet elektív eljárássá változtatta, és megkönnyítette a rendelkezésre álló donorszövetek hozzáférhetőségét. A szaruhártya megőrzése azonban számos más tényezőt is magában foglal amellett, hogy egyszerűen növeli a donor tárolási idejét.

Az endotélium, hám funkcionális állapota és a szaruhártya tartósítása utáni tartós deturgeszcencia nagy klinikai jelentőséggel bír, és elsősorban a műtéti eredmény sikeréhez járul hozzá. A teljes szaruhártya konzerváló tápközeg kifejlesztése során további aggodalomra okot adó területek közé tartozik a szaruhártya sebgyógyulásának fokozása, valamint az endothelsejtek keratoplasztika utáni normális, progresszív elvesztésének csökkentése vagy megszüntetése. A meglévő endoteliális sejtek megőrzése a szaruhártya megőrzése során azért fontos, mert a keratoplasztikán való behatolás után az endothelsejtek a normál öregedésnél gyorsabban vesznek el1. A látásélesség helyreállításához a szaruhártya szöveteinek időben történő és megfelelő gyógyulása szükséges.

A 4°C-os szaruhártya konzerváló közeg jelenlegi "arany standardja" az Optisol GS (Bausch & Lomb Surgical, Inc.). Ez az Optisol 2 (Chiron Vision, Irvine, CA, U.S.A.) továbbfejlesztett készítménye, amelyet 200 µg/ml sztreptomicin-szulfát hozzáadásával módosítottak. Az Optisol megőrizte a szaruhártya endotéliumát, valamint a DexSol-t (Chiron Vision, Irvine, CA, U.S.A.), a korábbi széles körben használt szaruhártya-megőrző közeget, és jobban megelőzte a stromaduzzanatot a tárolás során 2-5. A szaruhártya tartósító tápközegben lévő gentamicinhez sztreptomicin hozzáadása hatékony volt a rezisztens baktériumtörzsek ellen6. Az Optisol GS javított antibakteriális aktivitást mutatott, anélkül, hogy megnövekedett volna az endotélium toxicitása7-8. Az Optisol GS-ben tárolt humán szaruhártya in vitro vizsgálatai arra a következtetésre jutottak, hogy a 4 °C-on történő tárolási időt korlátozza, hogy a szaruhártya epitélium nem képes 1 hétnél hosszabb ideig megőrizni, bár az endotélium 84%-a életképesnek bizonyult három hét tárolás után 9,10. Egy klinikai vizsgálat megállapította, hogy a keratoplasztika behatolása után 1 nappal az epiteliális defektus valószínűsége nőtt az Optisol GS11 tárolási idejének növekedésével.

Az Optisol GS egy kondroitin-szulfátot tartalmazó táptalaj, kiegészítve dextránnal, további antioxidánsokkal, energiaforrásokkal és tápanyagokkal12. Ezek az összetevők annak megértését célozzák, hogy a szaruhártya alacsony tárolási hőmérsékleten is metabolikusan aktív. A szintetikus közeg összetételének foglalkoznia kell a megnövekedett stromális hidratációval, amely megnövekedett tartósítási idővel és csökkentett hőmérséklettel lép fel. A köztes szaruhártya tartósító tápközeg fejlődésének előrehaladása során dextránt, egy ozmotikus szert adtunk hozzá, hogy csökkentsék a kondroitin-szulfátot tartalmazó tápközeggel összefüggő intraoperatív visszapattanó duzzanatot. A kondroitin-szulfát és a dextrán segít megelőzni a stromális hidratációt azáltal, hogy növeli a kolloid ozmotikus nyomást a tárolt szaruhártya körüli vizes környezetben. A szaruhártya tartósítása alatt és után a szaruhártya tartósítása nagy klinikai jelentőséggel bír, csökkenti a transzplantációs sebész kezelési és varrási problémáit, ezáltal csökkenti a graft elégtelenségének kockázatát

Egy kiváló szaruhártya-megtartó közeg fenntartja a sejt életképességét, miközben meghosszabbítja a jelenlegi tárolási időt a donorszövet hatékonyabb felhasználása érdekében, megakadályozza a stroma duzzadását a keratoplasztika megkönnyítése érdekében, és megszünteti vagy elnyomja a mikrobiológiai növekedést a ritka, de katasztrofális endoftalmitis megelőzésére.

2.1 VIZSGÁLATI SZER A Life 4°C egy FDA által jóváhagyott, új, korszerű szaruhártya konzerváló tápközeg (30 ml) keratoplasztikára alkalmas emberi szaruhártya tárolására legfeljebb 14 napig hűtve (2-8°C). A Life 4°C steril, nem pirogén, fejlett pufferolt szaruhártya konzerváló tápközeg, amely kondroitin-szulfáttal (membránstabilizátor), rekombináns humán inzulinnal (sejtanyagcsere fokozó), dextránnal (ozmotikus szer), glutationnal (antioxidáns, szabadgyökfogó) van kiegészítve. , enzimkofaktor), stabilizált L-glutamin, ATP prekurzorok, tápanyag-sejt-kiegészítők, aminosavak, vitaminok, nyomelemek, gentamicin, sztreptomicin és fenolvörös (pH indikátor). A Life 4°C-ot úgy alakították ki, hogy a szaruhártya tárolási idejének teljes időtartama alatt használható legyen, megelőzve a stroma duzzanatát, fenntartva a szaruhártya epitéliumát és optimális endothelsejtek megőrzést biztosítva.

Ezenkívül a TRANSEND egy új szaruhártya tárolási, megtekintési és szállítási rendszer. Úgy tervezték, hogy megfeleljen a hosszabb tárolás, a tükörmikroszkópos vizsgálat és a szállítás kihívásainak. A TRANSEND nézőkamrát úgy tervezték, hogy a legújabb sebészeti eljárásokhoz szükséges nagyobb scleralis peremeket is befogadja. A megnövekedett tápközeg térfogat (30 ml) és a szaruhártya nagyobb folyadékáramlása csökkenti a sejtek egészsége szempontjából fontos anyagcsere-hulladék felhalmozódását. A megnövelt közeg térfogata kiváló szaruhártya megőrzést eredményez, minimális szaruhártyaduzzadással a tárolás során. A TRANSEND nézőkamra felső tömítést és O-gyűrűs oldalsó tömítést is használ a szivárgásmentes teljesítmény érdekében. A szaruhártyát biztonságosan tartják a tárolás, a tükörmikroszkópos vizsgálat és a szállítás során. A nézőtér gamma-besugárzású, ezért nincsenek ETO maradékok. Az új szabotázszárak használata kiküszöböli a magas hőmérsékletű hőzárak használatát. A külső szállítótartály lehetővé teszi, hogy a belső nézőkamra szárazon és biztonságosan megérkezzen a sebészhez.