Leukine (Sargramostim) pro Parkinsonovu chorobu

Parkinsonova nemoc (PD) je progresivní a invalidizující neurologická porucha zahrnující nigrostriatum, pro kterou není znám žádný lék. Důkazy naznačují, že zánět významně přispívá k příčině a/nebo progresi onemocnění. Studie na posmrtném lidském mozku, zvířecích modelech a lidské periferní krvi podporují myšlenku, že frekvence a funkce konkrétních podskupin cirkulujících T buněk jsou abnormální a zhoršují se s progresí onemocnění. Tato abnormalita je specificky spojena se zvýšením počtu T efektorových neurodestruktivních buněk (Teff) a dysfunkcí regulačních T buněk (Treg), které kontrolují Teff. Tato nerovnováha nastavuje homeostatickou rovnováhu na prozánětlivý profil s omezenou kontrolou. Nicméně, zda jsou takové deficity T buněk příčinou PD nebo reakcí na ni, zůstává neznámé. Pokud jsou tyto deficity kauzální nebo exacerbativní, pak by náprava deficitu mohla mít významné pozitivní účinky na progresi onemocnění a mohla by zlepšit nigrostriatální degeneraci nebo její následky. Faktor stimulující kolonie granulocytů a makrofágů (GM-CSF) je potenciální imunomodulační terapeutikum pro PD pro zvýšení počtu nebo funkce Treg a snížení nebo transformaci prozánětlivých reakcí Teff, což vede k neuroprotekci nigrostriata a zlepšeným klinickým výsledkům onemocnění. Rekombinantní lidský GM-CSF (sargramostim) je dostupný jako Leukine®. Účelem této studie je zjistit, zda lze leukin (sargramostim) bezpečně podávat pacientům s Parkinsonovou nemocí po delší časové období (56 dní).

V předchozí studii provedené na University of Nebraska Medical Center (UNMC) s použitím vzorků plné krve vykazovali pacienti s PD rozdíly od kontrol pečovatele podle výsledků z kompletního krevního obrazu (CBC) s diferenciálem bílých krvinek (WBC), aktivovaný fluorescencí. analýza buněčného třídění (FACS) pro markery T buněk a funkční testy Treg. Tyto imunitní aberace korelovaly s motorickou dysfunkcí, jak bylo stanoveno hodnotící stupnicí Parkinsonovy nemoci (UPDRS) části III. V této pilotní studii bude sledován účinek léčby leukinem na imunitní deficit u pacientů s PD. Analýzy imunitních buněk plné krve, motorická hodnocení a fyzikální vyšetření a analýzy krve pro bezpečnost budou prováděny před, během a po léčbě leukinem nebo placebem u pacientů s PD a za použití zdravých kontrol během sběru výchozích dat před léčbou léky. Zpočátku bude přijato 16 pacientů s PD a 16 kontrol. Předměty budou vylosovány z předchozího studia. Zápis bude podle potřeby doplněn o pacienty od neurologických konzultantů z Nebrasky-PC, UNMC Neurological Sciences nebo o nábor prostřednictvím Americké asociace Parkinsonovy choroby. Zápis bude rozložen a podle potřeby budou nabráni další subjekty, které nahradí případné odstupující účastníky, přičemž cílem studie bude 32 subjektů, 16 pacientů s PD a 16 kontrol.

Při zařazení a opětovném opakování ve dvou 4týdenních intervalech bude perkutánně odebrána plná krev od pacientů s PD a kontrol pomocí standardních sterilních technik. CBC s diferenciálem WBC, FACS analýza pro T buněčné markery a funkční testy Treg budou provedeny a použity k výpočtu profilů imunitní odpovědi jako základní linie pro srovnání po léčbě léčivem. Bude analyzována chemie krve včetně jaterních enzymů, elektrolytů, dusíku močoviny v krvi, kreatininu, hladin celkového proteinu, albuminu a bilirubinu a u pacientů s PD budou hodnoceny protilátky proti GM-CSF. Pacienti s PD budou hodnoceni fyzikálními a klinickými vyšetřeními, včetně hodnocení UPDRS části III pro hodnocení motorických funkcí.

Pacienti s PD budou poté randomizováni do dvou skupin, placebo (n=8) a leukin (n=8), a účast kontrol skončí. Pacienti zařazení do studie nebudou mít žádné známé přidružené choroby včetně infekce, zánětlivých nebo rakovinných onemocnění a nebudou užívat imunostimulační nebo imunosupresivní léky. Pacienti budou nadále užívat léky předepsané pro obecnou léčbu PD, včetně, ale bez omezení, dopaminu nebo agonistů dopaminu. Nebude žádná historie předchozích operací spojených s léčbou PD. Pacienti absolvují školení o samoinjekci a léčebná skupina si bude sama podávat leukin (6 ug/kg) subkutánní injekcí denně po dobu osmi týdnů. Skupina s placebem si sama aplikuje fyziologický roztok jako placebo. Každé dva týdny po zahájení léčby a znovu 4 týdny po ukončení podávání budou všichni pacienti s PD, kteří dostávají lék nebo placebo, hodnoceni fyzikálními a klinickými vyšetřeními, včetně hodnocení UPDRS části III. Každé 2 týdny během léčby leukinem a znovu 4 týdny po vysazení léku bude perkutánně odebírána plná krev od pacientů s PD za použití standardních sterilních technik. V týdnech 2, 4 a 8 budou výsledky z CBC s diferenciálem WBC, analýza FACS pro T buněčné markery a funkční testy Treg použity k výpočtu profilů imunitní odpovědi a porovnány se základními hodnotami. CBC s diferenciálem WBC, celkový počet T buněk a chemické složení krve budou analyzovány každé 2 týdny na důkaz potenciální toxicity, stejně jako 4 týdny po ukončení léčby leukinem. Hladiny anti-GM-CSF protilátek budou hodnoceny u pacientů s PD při zařazení do studie a ve 4týdenních intervalech během medikamentózní léčby a 4 týdny po ukončení. Volitelné videozáznamy budou pořizovány na začátku, na konci léčby léky/placebem a při následném sledování.

Další součástí studie je vývoj magnetoencefalografie (MEG) jako nástroje pro monitorování PD. MEG poskytuje neinvazivní metodu pro studium mozkové aktivity. V současné době neexistují adekvátní hodnotící nástroje pro sledování progrese onemocnění ani léčebné protokoly u PD. V předběžných experimentech na pacientech s PD a jejich pečovatelích data MEG naznačovala silnou beta synchronizaci během klidu u PD a mírnější beta desynchronizaci během pohybové přípravy ve srovnání s kontrolami odpovídajícími věku a pohlaví. V této studii bude sledována amplituda této patologické beta synchronizace/desynchronizace za účelem vyhodnocení zlepšení kortikální mozkové funkce pacientů s PD léčených leukinem. MEG bude prováděna u pacientů s PD a kontrol na začátku léčby léky a u pacientů s PD na konci období léčby léky a 4 týdny po ukončení léčby.

Mezi prvními 8 pacienty zařazenými do studie jsme u poloviny testovaných pacientů pozorovali neočekávané a statisticky významné změny v klinických hodnoceních motorických funkcí jednotné PD hodnotící škály část III (UPDRS část III). Tento test je však vnímán jako subjektivní. Aby bylo možné objektivněji a analyticky hodnotit motorické funkce, bude u zbývajících osmi pacientů s PD léčených leukinem nebo placebem provedeno biomechanické hodnocení pohyblivosti subjektu, posturální rovnováhy, kontroly motoriky horních končetin a třesu v klidovém stavu. K těmto hodnocením dojde na začátku, mezi 7. a 8. týdnem léčby léčivem a 4-5 týdnů po ukončení léčby léčivem. Testy motorických funkcí jsou navrženy tak, aby poskytovaly objektivní, počítačem generované skóre měřené výkonem pacienta v každém testu. K prozkoumání možného mechanismu změn motorických funkcí pozorovaných během dvou týdnů terapie bude provedeno testování na plazmatické/sérové ​​neurotransmitery zahrnující glutamát, glutamin, serotonin, acetylcholin, kyselinu gama-aminomáselnou (GABA), norepinefrin a adrenalin. Tato měření budou provedena na poslední kohortě pacientů s PD studie před zahájením léčby, 8 týdnů po zahájení léčby a 4 týdny po ukončení léčby léky. Testy budou vyhodnoceny pomocí ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) nebo ultravýkonné kapalinové chromatografie (UPLC). Rozhodnutí o tom, který test bude proveden pro který neurotransmiter, bude založeno na citlivosti a měření standardní křivky. Budou stanoveny vztahy mezi hladinami neurotransmiterů a motorickou funkcí. Tyto testy doplňují aktuální probíhající a schválené laboratorní testy. Požadavky na způsobilost se oproti těm, které jsou v současnosti ukládány, nezměnily. Měření motorických funkcí a sérových/plazmatických koncentrací neurotransmiterů bude také dokončeno 4-5 týdnů po ukončení léčby. Pojem zkoumání neurotransmiterů v této studii je založen na úloze v motorických funkcích, které zahrnují únavu, střevní, sexuální dysfunkci a změny nálady, které jsou také pozorovány u PD, a také to, že bylo prokázáno, že GM-CSF ovlivňuje hladiny neurotransmiterů (96). Tento rozsah uvedených neurotransmiterů nebyl zkoumán v první části této studie a bude vyžadovat omezené dodatečné zdroje krve a testů pro poslední část výzkumu.