Leukiini (Sargramostim) Parkinsonin taudin hoitoon

Parkinsonin tauti (PD) on etenevä ja vammauttava neurologinen häiriö, johon liittyy nigrostriatum ja johon ei tunneta parannuskeinoa. Todisteet viittaavat siihen, että tulehdus edistää merkittävästi taudin syytä ja/tai etenemistä. Tutkimukset kuoleman jälkeisillä ihmisaivoilla, eläinmalleilla ja ihmisen ääreisverellä tukevat ajatusta, että tiettyjen kiertävien T-solujen alaryhmien esiintymistiheys ja toiminta ovat epänormaaleja ja pahenevat sairauden edetessä. Tämä poikkeavuus liittyy spesifisesti T-effektorihermosoluja tuhoavien solujen (Teff) määrän kasvuun ja Teffiä säätelevien T-solujen (Treg) toimintahäiriöön. Tämä epätasapaino kääntää homeostaattisen tasapainon tulehdusta edistävään profiiliin, jossa on rajoitettu hallinta. Siitä huolimatta, ovatko tällaiset T-soluvajeet PD:n syy tai reaktio siihen, ei tiedetä. Jos nämä puutteet ovat kausaalisia tai pahentavia, alijäämän korjaamisella voi olla merkittäviä positiivisia vaikutuksia taudin etenemiseen ja se voi parantaa nigrostriataalista rappeutumista tai sen seurauksia. Granulosyyttimakrofagipesäkkeitä stimuloiva tekijä (GM-CSF) on potentiaalinen immunomodulatorinen lääke PD:lle Treg-lukujen tai -toiminnan lisäämiseksi ja proinflammatoristen Teff-vasteiden vähentämiseksi tai muuntamiseksi, mikä johtaa nigrostriatumin hermosuojaukseen ja sairauden kliinisten tulosten paranemiseen. Rekombinantti ihmisen GM-CSF (sargramostiimi) on saatavana nimellä Leukine®. Tämän tutkimuksen tarkoituksena on määrittää, voidaanko leukiinia (sargramostiimia) antaa turvallisesti Parkinsonin tautia sairastaville potilaille pidemmän aikaa (56 päivää).

Aiemmassa tutkimuksessa, joka tehtiin Nebraskan yliopiston lääketieteellisessä keskuksessa (UNMC), jossa käytettiin kokoverinäytteitä, PD-potilaat osoittivat eroja hoitajien verrokkeihin verrattuna täydellisen verenkuvan (CBC) tulosten ja valkosolujen (WBC) differentiaalisen fluoresenssiaktivoidun tulosten mukaan. solulajittelu (FACS) -analyysi T-solumarkkereille ja Treg-funktionaaliset määritykset. Nämä immuunipoikkeamat korreloivat motoristen toimintahäiriöiden kanssa Parkinsonin taudin arviointiasteikon (UPDRS) osan III arvioiden mukaan määritettynä. Tässä pilottitutkimuksessa seurataan leukiinihoidon vaikutusta PD-potilaiden immuunivajeisiin. Kokoveren immuunisoluanalyysit, motoriset arvioinnit sekä fyysiset tutkimukset ja verikokeet turvallisuuden vuoksi tehdään ennen PD-potilaiden leukiini- tai lumelääkitystä, sen aikana ja sen jälkeen sekä terveitä kontrolleja perustietojen keruun aikana ennen lääkehoitoa. Aluksi rekrytoidaan 16 PD-potilasta ja 16 kontrollia. Aiheet valitaan edellisestä tutkimuksesta. Ilmoittautumista täydennetään tarvittaessa potilailla Neurology Consultants of Nebraska-PC:stä, UNMC Neurological Sciencesista tai rekrytoinnista American Parkinson's Disease Associationin kautta. Ilmoittautuminen porrastetaan, ja lisää koehenkilöitä rekrytoidaan tarpeen mukaan korvaamaan kaikki vetäytyneet osallistujat. Tavoitteena on, että tutkimus saatetaan päätökseen 32 koehenkilöä, 16 PD-potilasta ja 16 kontrollia.

Ilmoittautuessa ja toistettaessa uudelleen kahden 4 viikon välein kokoveri PD-potilailta ja kontrolleilta otetaan perkutaanisesti käyttäen tavanomaisia ​​steriilejä tekniikoita. CBC WBC-differentiaalilla, FACS-analyysi T-solumarkkereille ja Treg-funktionaaliset määritykset suoritetaan ja niitä käytetään immuunivasteprofiilien laskemiseen vertailun perustana lääkehoidon jälkeen. Veren kemiat analysoidaan, mukaan lukien maksaentsyymit, elektrolyytit, veren ureatyppi, kreatiniini, kokonaisproteiini-, albumiini- ja bilirubiinitasot sekä anti-GM-CSF-vasta-aineet PD-potilailla. PD-potilaat arvioidaan fyysisillä ja kliinisillä tutkimuksilla, mukaan lukien UPDRS-osan III arvioinnit motoristen toimintojen arvioimiseksi.

Sen jälkeen PD-potilaat satunnaistetaan kahteen ryhmään, lumelääkkeeseen (n=8) ja leukiiniin (n=8), ja kontrollien osallistuminen päättyy. Tutkimukseen osallistuvilla potilailla ei ole havaittuja samanaikaisia ​​sairauksia, kuten infektioita, tulehduksellisia tai syöpäsairauksia, eivätkä he käytä immunostimuloivia tai immunosuppressiivisia lääkkeitä. Potilaat jatkavat PD:n yleiseen hoitoon määrättyjen lääkkeiden käyttöä, mukaan lukien, mutta niihin rajoittumatta, dopamiini tai dopamiiniagonistit. Aiempia PD-hoitoon liittyviä leikkauksia ei ole historiassa. Potilaat saavat koulutusta itseruiskeen antamiseen, ja hoitoryhmä antaa itse Leukinea (6 µg/kg) ihonalaisella injektiolla päivittäin kahdeksan viikon ajan. Lumeryhmä antaa itse suolaliuosta lumelääkkeenä. Joka toinen viikko hoidon aloittamisen jälkeen ja uudelleen 4 viikkoa annon lopettamisen jälkeen kaikki PD-potilaat, jotka saavat lääkettä tai lumelääkettä, arvioidaan fysikaalisilla ja kliinisillä tutkimuksilla, mukaan lukien UPDRS-osan III arvioinnit. Joka 2. viikko Leukine-hoidon aikana ja jälleen 4 viikkoa lääkkeen käytön lopettamisen jälkeen PD-potilaiden kokoverta otetaan perkutaanisesti käyttäen tavallisia steriilejä tekniikoita. Viikoilla 2, 4 ja 8 tuloksia CBC:stä WBC-differentiaalilla, FACS-analyysillä T-solumarkkereille ja Treg-funktionaalisia määrityksiä käytetään immuunivasteprofiilien laskemiseen ja niitä verrataan perusarvoihin. CBC ja valkosolujen erotus, T-solujen kokonaismäärä ja veren kemiat analysoidaan 2 viikon välein mahdollisten toksisuuksien varalta, sekä 4 viikkoa leukiinihoidon lopettamisen jälkeen. Anti-GM-CSF-vasta-aineiden tasot arvioidaan PD-potilaille ilmoittautumisen yhteydessä ja 4 viikon välein lääkehoidon aikana ja 4 viikon kuluttua lopettamisesta. Valinnaisia ​​videotallenteita tehdään lähtötilanteessa, lääke/plasebohoidon lopussa ja seurannassa.

Tutkimuksen lisäosaan kuuluu magnetoenkefalografian (MEG) kehittäminen PD:n seurantatyökaluksi. MEG tarjoaa ei-invasiivisen menetelmän aivojen toiminnan tutkimiseen. Tällä hetkellä ei ole olemassa riittäviä arviointityökaluja taudin etenemisen tai PD-hoitoprotokollien seuraamiseksi. Alustavissa kokeissa PD-potilailla ja heidän omaishoitajillaan MEG-tiedot ovat osoittaneet voimakasta beeta-synkronointia levon aikana PD:ssä ja lievempää beetasynkronointia liikkeen valmistelun aikana verrattuna iän ja sukupuolen mukaan vastaaviin kontrolleihin. Tässä tutkimuksessa seurataan tämän patologisen beetasynkronoinnin/desynkronoinnin amplitudia, jotta voidaan arvioida Leukine-hoitoa saaneiden PD-potilaiden aivokuoren toiminnan paranemista. MEG tehdään PD-potilaille ja kontrolleille lääkehoidon alussa ja PD-potilaille lääkehoitojakson lopussa ja 4 viikkoa lääkkeen käytön lopettamisen jälkeen.

Ensimmäisen 8 tutkimukseen osallistuneen potilaan joukossa olemme havainneet odottamattomia ja tilastollisesti merkittäviä muutoksia yhtenäisen PD-luokitusasteikon osan III (UPDRS osa III) kliinisissä motoristen toimintojen arvioinneissa puolella testatuista potilaista. Tätä testiä pidetään kuitenkin subjektiivisena. Motoristen toimintojen objektiivisemmaksi ja analyyttisemmäksi arvioimiseksi suoritetaan biomekaaniset arvioinnit potilaan liikkuvuudesta, asennon tasapainosta, yläraajojen motoriikasta ja lepotilan vapinasta kahdeksalle PD-potilaalle, jotka saavat leukiinia tai lumelääkettä. Nämä arvioinnit tapahtuvat lähtötilanteessa, 7–8 viikon lääkehoidon jälkeen ja 4–5 viikon kuluttua lääkehoidon lopettamisesta. Motoriset toimintatestit on suunniteltu antamaan objektiivinen, tietokoneella luotu pistemäärä, joka mitataan potilaan suorituskyvyn perusteella kussakin testissä. Kahden viikon kuluessa hoidosta havaittujen motoristen toimintojen muutosten mahdollisen mekanismin tutkimiseksi plasman/seerumin välittäjäaineiden testaus suoritetaan sisältäen glutamaattia, glutamiinia, serotoniinia, asetyylikoliinia, gamma-aminovoihappoa (GABA), norepinefriiniä ja epinefriiniä. Nämä toimenpiteet suoritetaan tutkimuksen viimeiselle PD-potilaiden kohortille ennen hoidon aloittamista, 8 viikkoa hoidon aloittamisen jälkeen ja 4 viikkoa lääkehoidon lopettamisen jälkeen. Testit arvioidaan entsyymi-immunosorbenttimäärityksellä (ELISA) tai ultra-performance-nestekromatografialla (UPLC). Päätös siitä, mikä määritys millekin välittäjäaineelle tehdään, perustuu herkkyyteen ja standardikäyrämittauksiin. Välittäjäaineiden tasojen ja motorisen toiminnan väliset suhteet määritetään. Nämä testit täydentävät nykyisiä käynnissä olevia ja hyväksyttyjä laboratoriotestejä. Kelpoisuusvaatimukset ovat ennallaan nykyisestä. Myös motoristen toimintojen ja seerumin/plasman välittäjäainepitoisuuksien mittaukset suoritetaan 4-5 viikon kuluttua hoidon lopettamisesta. Ajatus välittäjäaineiden tutkimisesta tässä tutkimuksessa perustuu rooliin motorisissa toiminnoissa, jotka sisältävät väsymystä, suolistoa, seksuaalisia toimintahäiriöitä ja mielialan muutoksia, joita havaitaan myös PD:ssä, sekä siihen, että GM-CSF:n on osoitettu vaikuttavan välittäjäaineiden tasoihin (96). Tätä lueteltujen välittäjäaineiden valikoimaa ei tutkittu tämän tutkimuksen ensimmäisessä osassa, ja se vaatii rajoitetusti lisäveri- ja määritysresursseja tutkimuksen viimeistä osaa varten.