Leukine (Sargramostim) per il morbo di Parkinson

La malattia di Parkinson (MdP) è un disturbo neurologico progressivo e invalidante che coinvolge il nigrostriato e per il quale non è nota alcuna cura. L'evidenza suggerisce che l'infiammazione contribuisce, in modo significativo, alla causa e/o alla progressione della malattia. Gli studi sul cervello umano post mortem, sui modelli animali e sul sangue periferico umano supportano l'idea che la frequenza e la funzione di particolari sottoinsiemi di cellule T circolanti siano anormali e peggiorino con il progredire della malattia. Questa anomalia è legata specificamente all'aumento del numero di cellule neurodistruttive effettrici T (Teff) e alla disfunzione delle cellule T regolatorie (Treg) che controllano il Teff. Questo squilibrio sposta l'equilibrio omeostatico verso un profilo pro-infiammatorio con un controllo limitato. Tuttavia, rimane sconosciuto se tali deficit di cellule T siano una causa del PD o una reazione ad esso. Se questi deficit sono causali o esacerbanti, la correzione del deficit potrebbe avere effetti positivi significativi sulla progressione della malattia e potrebbe migliorare la degenerazione nigrostriatale o le sue sequele. Il fattore stimolante le colonie di granulociti macrofagi (GM-CSF) è un potenziale terapeutico immunomodulatore per il PD per aumentare i numeri o la funzione di Treg e ridurre o trasformare le risposte proinfiammatorie di Teff, portando alla neuroprotezione del nigrostriato e a migliori esiti clinici per la malattia. Il GM-CSF umano ricombinante (sargramostim) è disponibile come Leukine®. Lo scopo di questo studio è determinare se Leukine (sargramostim) può essere somministrato in modo sicuro ai pazienti con malattia di Parkinson per un periodo di tempo prolungato (56 giorni).

In uno studio precedente condotto presso il Centro medico dell'Università del Nebraska (UNMC) utilizzando campioni di sangue intero, i pazienti con PD hanno mostrato differenze rispetto ai controlli del caregiver in base ai risultati dell'emocromo completo (CBC) con differenziale di globuli bianchi (WBC), attivato dalla fluorescenza analisi di selezione cellulare (FACS) per marcatori di cellule T e saggi funzionali Treg. Queste aberrazioni immunitarie erano correlate con la disfunzione motoria come determinato dalle valutazioni della parte III della scala di valutazione della malattia di Parkinson (UPDRS). In questo studio pilota, verrà monitorato l'effetto del trattamento con Leukine sui deficit immunitari nei pazienti con PD. Le analisi delle cellule immunitarie del sangue intero, le valutazioni motorie, gli esami fisici e le analisi del sangue per la sicurezza saranno condotte prima, durante e dopo il trattamento con Leukine o placebo dei pazienti con PD e utilizzando controlli sani durante la raccolta dei dati di base prima del trattamento farmacologico. Inizialmente verranno reclutati 16 pazienti con PD e 16 controlli. I soggetti saranno tratti dallo studio precedente. L'arruolamento sarà integrato, se necessario, con pazienti di Neurology Consultants of Nebraska-PC, UNMC Neurological Sciences o reclutamento tramite l'American Parkinson's Disease Association. L'arruolamento sarà scaglionato e verranno reclutati ulteriori soggetti secondo necessità per sostituire eventuali partecipanti che si ritirano, con l'obiettivo di 32 soggetti, 16 pazienti con PD e 16 controlli, completando lo studio.

Al momento dell'arruolamento e ripetendo nuovamente a intervalli di due settimane, il sangue intero da pazienti con PD e controlli sarà ottenuto per via percutanea utilizzando tecniche sterili standard. L'emocromo con differenziale leucocitaro, l'analisi FACS per i marcatori delle cellule T e i saggi funzionali Treg saranno eseguiti e utilizzati per calcolare i profili di risposta immunitaria come riferimento per il confronto dopo il trattamento farmacologico. Saranno analizzati i parametri ematici inclusi gli enzimi epatici, gli elettroliti, l'azoto ureico nel sangue, la creatinina, le proteine ​​totali, i livelli di albumina e bilirubina e gli anticorpi anti-GM-CSF saranno valutati nei pazienti con PD. I pazienti con PD saranno valutati mediante esami fisici e clinici, comprese le valutazioni UPDRS parte III per la valutazione della funzione motoria.

I pazienti con PD verranno poi randomizzati in due gruppi, placebo (n=8) e Leukine (n=8), e terminerà la partecipazione dei controlli. I pazienti inseriti nello studio non presenteranno alcuna condizione di comorbilità nota tra cui infezioni, malattie infiammatorie o cancerose e non assumeranno farmaci immunostimolanti o immunosoppressori. I pazienti continueranno ad assumere i medicinali prescritti per il trattamento generale della malattia di Parkinson, inclusi, ma non limitati a, dopamina o agonisti della dopamina. Non ci sarà storia di precedenti interventi chirurgici legati al trattamento PD. I pazienti riceveranno una formazione per l'autoiniezione e il gruppo di trattamento autoamministrerà Leukine (6 µg/kg) mediante iniezione sottocutanea ogni giorno per otto settimane. Il gruppo placebo autoamministrerà la soluzione salina come placebo. Ogni due settimane dopo l'inizio del trattamento e di nuovo 4 settimane dopo la cessazione della somministrazione, tutti i pazienti con PD, che ricevono farmaci o placebo, saranno valutati mediante esami fisici e clinici, comprese le valutazioni UPDRS parte III. Ogni 2 settimane durante il trattamento con Leukine e di nuovo 4 settimane dopo la cessazione del farmaco, verrà prelevato sangue intero da pazienti con PD per via percutanea utilizzando tecniche sterili standard. Alle settimane 2, 4 e 8, i risultati dell'emocromo con differenziale leucocitario, l'analisi FACS per i marcatori delle cellule T e i saggi funzionali Treg verranno utilizzati per calcolare i profili di risposta immunitaria e confrontati con i valori basali. L'emocromo con differenziale di globuli bianchi, conta totale delle cellule T e analisi chimiche del sangue saranno analizzati ogni 2 settimane per l'evidenza di potenziali tossicità, nonché 4 settimane dopo la fine del trattamento con Leukine. I livelli di anticorpi anti-GM-CSF saranno valutati per i pazienti con PD all'arruolamento e ad intervalli di 4 settimane durante il trattamento farmacologico e 4 settimane dopo la conclusione. Verranno effettuate registrazioni video facoltative al basale, alla fine del trattamento farmacologico/placebo e al follow-up.

Un componente aggiuntivo dello studio include lo sviluppo della magnetoencefalografia (MEG) come strumento di monitoraggio per il morbo di Parkinson. MEG fornisce un metodo non invasivo per studiare l'attività cerebrale. Attualmente, non esistono strumenti di valutazione adeguati per monitorare la progressione della malattia o protocolli di trattamento nel PD. In esperimenti preliminari su pazienti PD e loro caregiver, i dati MEG hanno indicato una forte sincronizzazione beta durante il riposo in PD e una desincronizzazione beta più lieve durante la preparazione del movimento rispetto ai controlli abbinati per età e sesso. In questo studio, l'ampiezza di questa sincronizzazione/desincronizzazione beta patologica sarà monitorata per valutare i miglioramenti nella funzione cerebrale corticale dei pazienti PD trattati con Leukine. Il MEG verrà eseguito su pazienti con PD e controlli all'inizio del trattamento farmacologico e su pazienti con PD alla fine del periodo di trattamento farmacologico e 4 settimane dopo l'interruzione del farmaco.

Tra i primi 8 pazienti arruolati nello studio, abbiamo osservato cambiamenti inaspettati e statisticamente significativi nelle valutazioni cliniche della scala di valutazione unificata PD parte III (UPDRS parte III) per la funzione motoria nella metà dei pazienti testati. Questo test, tuttavia, è visto come soggettivo. Per valutare in modo più oggettivo e analitico le funzioni motorie, saranno eseguite valutazioni biomeccaniche della mobilità del soggetto, equilibrio posturale, controllo motorio degli arti superiori e tremore dello stato di riposo sui restanti otto pazienti con PD trattati con Leukine o placebo. Queste valutazioni avverranno al basale, tra 7 e 8 settimane di trattamento farmacologico, e a 4-5 settimane dopo la cessazione del trattamento farmacologico. I test di funzionalità motoria sono progettati per fornire un punteggio oggettivo, generato dal computer, misurato dalle prestazioni del paziente in ciascun test. Per studiare un possibile meccanismo per i cambiamenti nella funzione motoria osservati entro due settimane dalla terapia, verranno eseguiti test per i neurotrasmettitori plasmatici / sierici per includere glutammato, glutammina, serotonina, acetilcolina, acido gamma-aminobutirrico (GABA), norepinefrina ed epinefrina. Queste misure saranno eseguite sull'ultima coorte di pazienti con PD dello studio prima dell'inizio del trattamento, 8 settimane dopo l'inizio del trattamento e 4 settimane dopo l'interruzione del trattamento farmacologico. I test saranno valutati mediante saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) o mediante cromatografia liquida ultra-prestazionale (UPLC). Una decisione su quale analisi verrà eseguita per quale neurotrasmettitore si baserà sulla sensibilità e sulle misure della curva standard. Saranno determinate le relazioni tra i livelli dei neurotrasmettitori e la funzione motoria. Questi test si aggiungono agli attuali test di laboratorio in corso e approvati. I requisiti di ammissibilità sono invariati rispetto a quelli attualmente imposti. Anche le misurazioni della funzione motoria e delle concentrazioni di neurotrasmettitori sierici/plasmatici saranno completate 4-5 settimane dopo l'interruzione del trattamento. L'idea di esplorare i neurotrasmettitori in questo studio si basa sul ruolo nella funzione motoria che include affaticamento, intestino, disfunzione sessuale e cambiamenti dell'umore che si osservano anche nel morbo di Parkinson, così come è stato dimostrato che il GM-CSF influenza i livelli dei neurotrasmettitori (96). Questa gamma di neurotrasmettitori elencati non è stata studiata nella prima parte di questo studio e richiederà limitate risorse aggiuntive di sangue e analisi per l'ultima parte dell'indagine.