Glioblastom: Validace a srovnání mezi primárním nádorem a jeho myším modelem (XENOGBM)

Předkládaný projekt se zaměří na hodnocení multimodálního přístupu srovnávajícího lidský GBM s párovými vzorky ortotopických xenoimplantátů pomocí MRI a MRS s vysokým rozlišením a multidimenzionálního molekulárního profilování.

Před neurochirurgickou resekcí bude v CHUV identifikováno 20 pacientů s vysokou pravděpodobností nově diagnostikované GBM na základě MRI skenu (3 Tesla (3T) MRI, T1, T2, T1 gadolinium, DWI a MRI spektroskopie). Pacienti podstoupí rozsáhlé experimentální radiologické vyšetření za použití specifických MRI sekvencí na 7 Tesla (7T) MRI k identifikaci specifických metabolických drah (viz níže, část o zobrazování). Poté pacienti podstoupí maximálně bezpečnou neurochirurgickou resekci svých nádorů. Část nádoru, která není použita pro diagnostické účely, bude okamžitě odebrána pro další použití (viz níže, část o molekulárních hodnoceních). Po resekci pacienti podstoupí standardní léčbu [obvykle kombinovanou radiochemoterapii nebo jim bude nabídnuta účast v klinické studii. Budou shromážděny klinické parametry, včetně histopatologických znaků a evoluce a vzoru růstu reziduálního nádoru (pokud je přítomen), nebo se vývoj recidiv poté porovná s parametry a evolucí xenograftových modelů.

Při vysoké intenzitě magnetického pole (7T), vysoký poměr signálu k šumu a zvýšená spektrální disperze umožňují spolehlivější měření velkého počtu metabolitů pomocí magnetické rezonanční spektroskopie ve srovnání s klinicky dostupnými intenzitami pole (3T a nižší). Kromě toho autoři vyvinuli sekvenci plně senzitivní krátké echo-časové single voxel spektroskopie (SVS) „semi-adiabatická SPECIAL“(2), která byla implementována, validována při 7T a umožňuje kvantifikaci 15 metabolitů s vysokou přesností včetně N -acetylaspartát (NAA), glutamin (Gln), glutamát (Glu), myo-inositol (Ins), fosforylethanolamin (PE), celkový cholin (tCho), kreatin, fosfokreatin, N-acetylaspartylglutamát (NAAG), laktát (Lac), glutathion (GSH), aspartát (Asp), taurin (Tau), scyllo-inositol a kyselina y-aminomáselná (GABA). Tato lokalizační technika byla dále rozšířena na techniku ​​MR spektroskopického zobrazování (MRSI) na 7T, která umožňuje mapování prostorových distribucí cerebrálních metabolitů. Kromě toho je glycin možným markerem nádorové malignity a jeho detekce in vivo byla stanovena v naší předchozí studii pomocí TE=30 ms se SPECIÁLNÍ sekvencí na 7T. Proto budou v této studii použity výše uvedené techniky k získání neurochemické informace a její prostorové distribuce v glioblastomu pacientů. Tato data budou dále porovnána s neurochemickými informacemi získanými v ortotopických xenoimplantátech v myším mozku odvozenými od příslušného pacienta s glioblastomem.

Všechna měření MRS u pacientů s glioblastomem budou prováděna na MR skeneru 7T s hlavovou cívkou CP Transmit / 32 kanálů. Na základě T1-vážených snímků s vysokým rozlišením získaných pomocí sekvence MP2RAGE bude objem zájmu (VOI) pro spektroskopii umístěn podle umístění glioblastomu. Celková doba pořízení MRS bude do 30 minut. In vivo MRS spektra budou následně zpracována a koncentrace metabolitů budou kvantifikovány za účelem vytvoření metabolitových map.

Molekulární a funkční vyšetření párových vzorků primárního glioblastomu a příslušných ortotopických xenoimplantátů u myši

Cílem této studie je určit molekulární, histopatologické a funkční vlastnosti, včetně vzorců růstu, jako je invazivita, původního GBM a příslušných odvozených ortotopických xenoimplantátů u myši a spojit je se zobrazovacími/metabolickými parametry získanými vysokou rozlišení MRI.

Vzorky GBM od pacientů odebrané při operaci budou rozděleny na 2 části, (i) bleskově zmrazené pro molekulární analýzy a (ii) kultivované za podmínek kmenových buněk pro následnou stereotaktickou transplantaci samcům myší s oslabenou imunitou a vytvoření sférických linií.