Glioblastoma: walidacja i porównanie między pierwotnym guzem a jego mysim modelem (XENOGBM)

Prezentowany projekt skupi się na ocenie multimodalnego podejścia porównującego ludzkie GBM z parą próbek ortotopowych ksenoprzeszczepów przy użyciu MRI i MRS o wysokiej rozdzielczości oraz wielowymiarowego profilowania molekularnego.

20 pacjentów z wysokim prawdopodobieństwem nowo zdiagnozowanego GBM na podstawie badania MRI (MRI 3 Tesle (3T), T1, T2, T1 gadolin, spektroskopia DWI i MRI) zostanie zidentyfikowanych w CHUV przed poddaniem się resekcji neurochirurgicznej. Pacjenci zostaną poddani szeroko zakrojonemu eksperymentalnemu badaniu radiologicznemu przy użyciu określonych sekwencji MRI na MRI 7 Tesli (7T) w celu zidentyfikowania określonych szlaków metabolicznych (patrz poniżej, sekcja dotycząca obrazowania). Następnie pacjenci zostaną poddani maksymalnie bezpiecznej neurochirurgicznej resekcji guzów. Część guza, która nie zostanie wykorzystana do celów diagnostycznych, zostanie natychmiast pobrana do dalszego wykorzystania (patrz poniżej, sekcja dotycząca ocen molekularnych). Po resekcji pacjenci będą poddani standardowemu leczeniu [najczęściej skojarzonej radio-chemioterapii lub zostaną zaproponowani udział w badaniu klinicznym. Zostaną zebrane parametry kliniczne, w tym cechy histopatologiczne oraz ewolucja i wzorzec wzrostu resztkowego guza (jeśli występuje), lub rozwój nawrotów zostanie następnie porównany z parametrami i ewolucją modeli ksenoprzeszczepu.

Przy dużym natężeniu pola magnetycznego (7 T), wysoki stosunek sygnału do szumu i zwiększona dyspersja widmowa umożliwiają bardziej wiarygodne pomiary dużej liczby metabolitów za pomocą spektroskopii rezonansu magnetycznego w porównaniu z dostępnymi klinicznie natężeniami pola (3 T i poniżej). Ponadto autorzy opracowali sekwencję „semiadiabatic SPECIAL” (SVS) o pełnej czułości z krótkim czasem echa i spektroskopii pojedynczego woksela (2), która została wdrożona, zwalidowana przy 7T i umożliwia ilościowe oznaczenie 15 metabolitów z dużą precyzją, w tym N -acetyloasparaginian (NAA), glutamina (Gln), glutaminian (Glu), mio-inozytol (Ins), fosforyloetanoloamina (PE), cholina całkowita (tCho), kreatyna, fosfokreatyna, N-acetylaspartyloglutaminian (NAAG), mleczan (Lac), glutation (GSH), asparaginian (Asp), tauryna (Tau), scyllo-inozytol i kwas γ-aminomasłowy (GABA). Ta technika lokalizacji została dodatkowo rozszerzona na technikę obrazowania spektroskopowego MR (MRSI) przy 7T, która umożliwia mapowanie przestrzennego rozkładu metabolitów mózgowych. Ponadto glicyna jest możliwym markerem złośliwości nowotworu, a jej wykrywanie in vivo zostało ustalone w naszym poprzednim badaniu przy użyciu TE = 30 ms z sekwencją SPECIAL w 7T. Dlatego w tym badaniu wyżej wymienione techniki zostaną wykorzystane do uzyskania informacji neurochemicznej i jej przestrzennego rozmieszczenia w glejaku pacjentów. Dane te będą dalej porównywane z informacjami neurochemicznymi uzyskanymi w ortotopowych ksenoprzeszczepach w mózgu myszy, pochodzących od odpowiedniego pacjenta z glejakiem.

Wszystkie pomiary MRS pacjentów z glejakiem wielopostaciowym będą przeprowadzane na skanerze MR 7T z cewką nadawczą CP / 32-kanałową cewką odbiorczą. W oparciu o obrazy T1-zależne o wysokiej rozdzielczości uzyskane przy użyciu sekwencji MP2RAGE, objętość zainteresowania (VOI) do spektroskopii zostanie umieszczona zgodnie z lokalizacją glejaka wielopostaciowego. Całkowity czas akwizycji MRS będzie mieścił się w granicach 30 min. Widma MRS in vivo zostaną poddane obróbce końcowej, a stężenia metabolitów zostaną określone ilościowo w celu stworzenia map metabolitów.

Badania molekularne i funkcjonalne sparowanych próbek pierwotnego glejaka wielopostaciowego i odpowiednich ortotopowych ksenoprzeszczepów u myszy

Celem niniejszego badania jest określenie właściwości molekularnych, histopatologicznych i funkcjonalnych, w tym wzorców wzrostu, takich jak inwazyjność, pierwotnego GBM i odpowiednich pochodnych heteroprzeszczepów ortotopowych u myszy i powiązanie ich z parametrami obrazowania / metabolizmu uzyskanymi za pomocą wysokiej rozdzielczość MRI.

Próbki GBM od pacjentów pobrane podczas operacji zostaną podzielone na 2 części, (i) szybko zamrożone do analiz molekularnych oraz (ii) hodowane w warunkach komórek macierzystych w celu późniejszego przeszczepu stereotaktycznego samcom myszy z obniżoną odpornością i ustanowienia linii sferycznych.