Glioblastoma: validación y comparación entre el tumor primario y su modelo murino (XENOGBM)

El proyecto presentado se centrará en la evaluación de un enfoque multimodal que compare el GBM humano con muestras emparejadas de xenoinjertos ortotópicos utilizando MRI y MRS de alta resolución y perfiles moleculares multidimensionales.

20 pacientes con una alta probabilidad de GBM recién diagnosticado según la resonancia magnética (3 Tesla (3T) MRI, T1, T2, T1 gadolinio, DWI y espectroscopia de MRI) se identificarán en el CHUV antes de someterse a una resección neuroquirúrgica. Los pacientes se someterán a un extenso examen radiológico experimental utilizando secuencias de resonancia magnética específicas en la resonancia magnética de 7 Tesla (7T) para identificar vías metabólicas específicas (consulte la sección sobre imágenes a continuación). A partir de entonces, los pacientes se someterán a una resección neuroquirúrgica segura máxima de sus tumores. La porción del tumor que no se usa con fines de diagnóstico se recolectará de inmediato para su uso posterior (consulte la sección sobre evaluaciones moleculares a continuación). Después de la resección, los pacientes se someterán a un tratamiento estándar [por lo general, radioquimioterapia combinada, o se les ofrecerá participar en un ensayo clínico. Se recopilarán los parámetros clínicos, incluidas las características histopatológicas y la evolución y el patrón de crecimiento del tumor residual (si está presente), o se comparará posteriormente el desarrollo de recurrencias con los parámetros y la evolución de los modelos de xenoinjerto.

Con una fuerza de campo magnético alta (7T), una relación señal/ruido alta y una dispersión espectral aumentada permiten una medición más confiable de una gran cantidad de metabolitos mediante espectroscopía de resonancia magnética en comparación con las fuerzas de campo clínicas disponibles (3T e inferiores). Además, los autores han desarrollado una secuencia de espectroscopia de vóxel único (SVS) de tiempo de eco corto de sensibilidad completa "Semi-adiabatic SPECIAL"(2) que se implementó, validó a 7T y permite la cuantificación de 15 metabolitos con alta precisión, incluido N -acetilaspartato (NAA), glutamina (Gln), glutamato (Glu), mioinositol (Ins), fosforiletanolamina (PE), colina total (tCho), creatina, fosfocreatina, N-acetilaspartilglutamato (NAAG), lactato (Lac), glutatión (GSH), aspartato (Asp), taurina (Tau), escilo-inositol y ácido γ-aminobutírico (GABA). Esta técnica de localización se amplió aún más a una técnica de imagen espectroscópica MR (MRSI) en 7T, que permite mapear las distribuciones espaciales de los metabolitos cerebrales. Además, la glicina es un posible marcador de malignidad tumoral y su detección in vivo se ha establecido en nuestro estudio previo utilizando TE=30ms con secuencia SPECIAL a 7T. Por tanto, en este estudio se utilizarán las técnicas antes mencionadas para obtener la información neuroquímica y su distribución espacial en el glioblastoma de los pacientes. Estos datos se compararán además con la información neuroquímica obtenida en los xenoinjertos ortotópicos en el cerebro de ratón derivados del paciente con glioblastoma respectivo.

Todas las mediciones de MRS de pacientes con glioblastoma se realizarán en un escáner de RM de 7T con una bobina principal de matriz de recepción de 32 canales/transmisión CP. En función de las imágenes ponderadas en T1 de alta resolución obtenidas mediante la secuencia MP2RAGE, el volumen de interés (VOI) para la espectroscopia se colocará de acuerdo con la ubicación del glioblastoma. El tiempo total de adquisición de MRS será de 30 min. Los espectros MRS in vivo se procesarán posteriormente y las concentraciones de metabolitos se cuantificarán para crear mapas de metabolitos.

Investigaciones moleculares y funcionales de muestras pareadas de glioblastoma primario y xenoinjertos ortotópicos respectivos en el ratón

El objetivo del presente estudio es determinar las propiedades moleculares, histopatológicas y funcionales, incluidos los patrones de crecimiento, como la invasividad, del GBM original y los xenoinjertos ortotópicos derivados respectivos en el ratón, y vincularlos con parámetros metabólicos/de imagen obtenidos por alta resolución. RM de resolución.

Las muestras de GBM de pacientes recolectadas en la cirugía se dividirán en 2 partes, (i) se congelarán instantáneamente para análisis moleculares y (ii) se cultivarán en condiciones de células madre para el posterior trasplante estereotáctico en ratones macho inmunocomprometidos y el establecimiento de líneas esféricas.