Sledování mononukleárních buněk periferní krve pomocí fluorové MRI (TRACK)

Pozadí: V Kanadě není schváleno žádné z aktuálně dostupných činidel pro značení buněk MRI na úrovni správné výrobní praxe (GMP). Existuje jeden přípravek nanočástic oxidu železitého v kvalitě GMP, který je komerčně dostupný, ale není vhodný pro značení populací imunitních buněk, o jejichž sledování in vivo mají výzkumníci zájem. Výzkumníci se místo toho rozhodli vyvinout komerčně dostupný perfluorovaný uhlovodík na bázi 19F třídy GMP, známý jako Cell Sense, pro účely sledování vakcinačních terapií na bázi imunitních buněk in vivo. Toto činidlo bylo úspěšně použito ve fázi I klinického hodnocení ve Spojených státech a je schváleno pro druhý zkušební současný nábor pod dohledem FDA.

Činidlo pro sledování buněk Cell Sense (CS-1000) je inertní, nemetabolizovatelný indikátor. Vzhledem k tomu, že CS-1000 je přijímán a začleňován do buněk, tradiční farmakodynamické a farmakokinetické analýzy u zvířat a lidí nejsou vhodné, protože adsorpce a biodistribuce se budou lišit podle typu buňky, a proto nebyly provedeny. In vitro studie toxicity vůči různým typům buněk nepřinesly důkazy o nepříznivých účincích na různé buněčné funkce. Bylo také prokázáno, že Cell Sense není mutagenní pomocí Ames a Forward thymidinkinázových (TK) testů. Určité omezené podráždění kůže bylo pozorováno, když bylo intradermálně injikováno potkanům > 2 500krát více Cell Sense, než se očekávalo pro maximální injekci do lidí.

Příklady značek pro sledování buněk MRI zahrnují superparamagnetické nanočástice oxidu železa a sloučeniny obsahující 19F, jako jsou perfluorované uhlovodíky. Výhodou použití buněčné MRI ke sledování buněk je, že se používá neradioaktivní indikátor, který je vhodný pro longitudinální studie. MRI nabízí 3D zobrazení s vynikajícím kontrastem měkkých tkání. Další výhodou použití 19F oproti činidlům na bázi železa je to, že 19F je pozitivní, snadno kvantifikovatelné činidlo pro značení kontrastních buněk. Navíc u lidí neexistuje žádný signál MRI na pozadí 19F, zatímco MRI zahrnující železo může být zkresleno různými zobrazovacími artefakty a jde o negativní kontrastní látku, kterou je obtížné přesně kvantifikovat. Vyšetřovatelé se zvláště zajímají o to, zda imunitní buňky přicházejí do sekundárních lymfoidních orgánů, jako jsou lymfatické uzliny.

Studovat design:

Otevřená studie fáze I, s eskalací dávek, s jedním centrem, která bude zahrnovat (a) 6 zdravých dospělých a (b) 6 pacientů s rakovinou prostaty.

Do první kohorty budou zařazeni tři zdraví dospělí a tři pacienti s rakovinou prostaty. Plná krev (150 ml) bude odebrána venepunkcí. Po zpracování krve k získání mononukleárních buněk periferní krve (PBMC) bude polovina PBMC ošetřena Cell Sense po dobu 8-24 hodin. Vzhledem k robustnosti našich dat s použitím 5 dárců během suchých testů výzkumníci nenavrhují porovnávat značené a neznačené buňky jako kritéria uvolňování. Vyšetřovatelé však budou tato data shromažďovat pro informační a výzkumné účely. Subjektům z kohorty 1 budou intradermálně podány tři miliony (3 x 106) autologních PBMC značených Cell Sense. Souběžně budou testováni tři zdraví dospělí a 3 subjekty s rakovinou prostaty.

Pokud u 1. kohorty nejsou pozorovány žádné nežádoucí příhody 2. nebo vyššího stupně, bude pokračovat souběžný nábor pro nábor druhého souboru 3 zdravých dospělých subjektů a druhého souboru 3 pacientů s rakovinou prostaty. Druhá skupina subjektů bude podrobena stejnému designu, ale s eskalací dávky na 2-3 x 107 autologních PBMC značených Cell Sense podávaných intradermálně.

Koncové body:

Primární koncové body:

Určete proveditelnost použití Cell Sense k detekci a monitorování migrace PBMC u lidí

Sekundární koncové body:

• Potvrďte a dále optimalizujte parametry detekce 19F Cell Sense a anatomické zobrazovací parametry Hydrogen-1 (1H) pro zobrazování pomocí duální cívky 19F/1H.
• Zjistěte, zda lze detekovat migraci PBMC značených Cell Sense do drenážní lymfatické uzliny.
• Zjistěte, zda lymfatické uzliny v zobrazované oblasti změnily velikost na straně injekce ve srovnání s kontralaterální stranou.
• Kvantifikujte počet detekovaných PBMC značených Cell Sense.
• Vyhodnoťte bezpečnostní parametry (toxicitu) podle definice:
• nežádoucí příhody.
• závažné nežádoucí příhody.
• změny v laboratorním stanovení a parametrech vitálních funkcí hodnocené anamnézou, fyzikálním vyšetřením a klinickými laboratorními testy.

Ke klasifikaci jakýchkoli nežádoucích příhod budou použity následující kategorie:

• Stupeň 1: nenarušuje každodenní činnost,
• Stupeň 2: narušuje denní aktivitu, není nutná žádná léčba, kromě paracetamolu,
• Stupeň 3: brání každodenní aktivitě nebo vyžaduje léčbu.
• Stupeň 4: Život ohrožující

K určení závažnosti nežádoucích účinků budou použity pokyny NIH a FDA (nebo CTCAE v 4.0).