Seguimiento de células mononucleares de sangre periférica con resonancia magnética con flúor (TRACK)

Antecedentes: Ninguno de los agentes de etiquetado de células de MRI de grado de Buenas Prácticas de Fabricación (GMP) actualmente disponibles está aprobado para su uso en Canadá. Existe una preparación de grado GMP de nanopartículas de óxido de hierro que está disponible comercialmente, pero no es adecuada para marcar las poblaciones de células inmunes que los investigadores están interesados ​​en rastrear in vivo. En cambio, los investigadores han optado por desarrollar el perfluorocarbono a base de 19F de grado GMP disponible comercialmente, conocido como Cell Sense, con el fin de rastrear terapias de vacunas basadas en células inmunitarias in vivo. Este agente se ha utilizado con éxito en un ensayo clínico de fase I en Estados Unidos y está aprobado para un segundo ensayo de reclutamiento actual, bajo la supervisión de la FDA.

El agente de seguimiento celular Cell Sense (CS-1000) es un trazador inerte y no metabolizable. Como el CS-1000 se absorbe e incorpora a la célula, los análisis farmacodinámicos y farmacocinéticos tradicionales en animales y humanos no son apropiados, ya que la adsorción y la biodistribución variarán según el tipo de célula y, por lo tanto, no se han realizado. Los estudios in vitro de toxicidad hacia diversos tipos de células no arrojaron evidencia de efectos adversos sobre diversas funciones celulares. También se demostró que Cell Sense no es mutagénico utilizando los ensayos de timidina quinasa (TK) de Ames y Forward. Se observó cierta irritación limitada de la piel cuando se inyectó por vía intradérmica a ratas >2500 veces más Cell Sense de lo esperado para ser inyectado al máximo en humanos.

Ejemplos de etiquetas de seguimiento de células por resonancia magnética incluyen nanopartículas superparamagnéticas de óxido de hierro y compuestos que contienen 19F, como los perfluorocarbonos. La ventaja de utilizar la resonancia magnética celular para rastrear células es que se utiliza un marcador no radiactivo que es adecuado para estudios longitudinales. La resonancia magnética ofrece imágenes en 3D con un contraste exquisito de los tejidos blandos. La ventaja adicional de utilizar 19F sobre los agentes a base de hierro es que el 19F es un agente marcador de células de contraste positivo y fácilmente cuantificable. Además, no existe una señal de fondo de 19F en la resonancia magnética en humanos, mientras que la resonancia magnética que involucra hierro puede verse confundida por diferentes artefactos de imagen y es un agente de contraste negativo que es difícil de cuantificar con precisión. Los investigadores están particularmente interesados ​​en saber si las células inmunitarias llegan a los órganos linfoides secundarios, como los ganglios linfáticos.

Diseño del estudio:

Estudio de fase I abierto, de aumento de dosis, de un solo centro, que incluirá (a) 6 adultos sanos y (b) 6 pacientes con cáncer de próstata.

En la primera cohorte se inscribirán tres adultos sanos y tres pacientes con cáncer de próstata. La sangre completa (150 ml) se obtendrá mediante punción venosa. Después del procesamiento de la sangre para obtener células mononucleares de sangre periférica (PBMC), la mitad de las PBMC se tratarán con Cell Sense durante 8 a 24 horas. Dada la solidez de nuestros datos utilizando 5 donantes durante los ensayos, los investigadores no proponen comparar células marcadas con células no marcadas como criterio de liberación. Sin embargo, los investigadores recopilarán estos datos con fines informativos y de investigación. Se administrarán por vía intradérmica tres millones (3 x 106) de PBMC autólogas marcadas con Cell Sense a los sujetos de la cohorte 1. Los tres adultos sanos y los 3 sujetos con cáncer de próstata serán evaluados simultáneamente.

Si no se observan eventos adversos de grado 2 o superior con la 1.ª cohorte, la inscripción simultánea procederá a reclutar un segundo grupo de 3 sujetos adultos sanos y el segundo grupo de 3 pacientes con cáncer de próstata. La segunda cohorte de sujetos se someterá al mismo diseño pero con un aumento de la dosis a 2-3 x 107 PBMC autólogas marcadas con Cell Sense administradas por vía intradérmica.

Puntos finales:

Criterios de valoración principales:

Determinar la viabilidad de utilizar Cell Sense para detectar y monitorear la migración de PBMC en humanos

Criterios de valoración secundarios:

• Confirme y optimice aún más la detección de Cell Sense 19F y los parámetros de imágenes anatómicas de Hidrógeno-1 (1H) para obtener imágenes utilizando la bobina doble 19F/1H.
• Determine si se puede detectar la migración de PBMC marcadas con Cell Sense al ganglio linfático de drenaje.
• Determine si los ganglios linfáticos en el área de interés de la imagen cambian de tamaño en el lado inyectado en comparación con el lado contralateral.
• Cuantificar el número de PBMC marcadas con Cell Sense detectadas.
• Evaluar los parámetros de seguridad (toxicidad) definidos por:
• eventos adversos.
• eventos adversos graves.
• cambios en las determinaciones de laboratorio y parámetros de signos vitales evaluados por el historial médico, el examen físico y las pruebas de laboratorio clínico.

Se utilizarán las siguientes categorías para calificar cualquier evento adverso:

• Grado 1: no interfiere con la actividad diaria,
• Grado 2: interfiere con la actividad diaria, no requiere tratamiento, excepto paracetamol,
• Grado 3: impide la actividad diaria o requiere tratamiento.
• Grado 4: potencialmente mortal

Se utilizarán las pautas de los NIH y la FDA (o CTCAE v 4.0) para determinar la gravedad de los eventos adversos.