Śledzenie komórek jednojądrzastych krwi obwodowej za pomocą rezonansu magnetycznego z fluorem (TRACK)

Tło: Żaden z obecnie dostępnych środków do znakowania komórek MRI zgodnych z dobrą praktyką produkcyjną (GMP) nie jest zatwierdzony do stosowania w Kanadzie. Istnieje jeden preparat klasy GMP nanocząstek tlenku żelaza, który jest dostępny na rynku, ale nie nadaje się do znakowania populacji komórek odpornościowych, których śledzenie in vivo chcą badacze. Zamiast tego badacze zdecydowali się opracować dostępny na rynku perfluorowęglowodór 19F klasy GMP, znany jako Cell Sense, do celów śledzenia terapii szczepionkami opartymi na komórkach odpornościowych in vivo. Środek ten z powodzeniem zastosowano w I fazie badania klinicznego w Stanach Zjednoczonych i został dopuszczony do obecnie prowadzonej rekrutacji do drugiego badania, pod nadzorem FDA.

Środek do śledzenia komórek Cell Sense (CS-1000) jest obojętnym, niemetabolizowanym znacznikiem. Ponieważ CS-1000 jest pobierany i włączany do komórki, tradycyjne analizy farmakodynamiczne i farmakokinetyczne na zwierzętach i ludziach nie są odpowiednie, ponieważ adsorpcja i biodystrybucja będą się różnić w zależności od typu komórki i dlatego nie zostały przeprowadzone. Badania toksyczności in vitro wobec różnych typów komórek nie dostarczyły dowodów na niekorzystny wpływ na różne funkcje komórek. Wykazano także, że Cell Sense nie jest mutagenny, stosując testy Amesa i Forwarda na kinazę tymidynową (TK). Zaobserwowano pewne ograniczone podrażnienie skóry, gdy śródskórnie szczurom wstrzyknięto śródskórnie szczurom > 2500 razy więcej preparatu Cell Sense niż oczekiwano w przypadku maksymalnego wstrzyknięcia ludziom.

Przykłady znaczników do śledzenia komórek MRI obejmują superparamagnetyczne nanocząstki tlenku żelaza i związki zawierające 19F, takie jak perfluorowęglowodory. Zaletą stosowania komórkowego MRI do śledzenia komórek jest to, że wykorzystuje się nieradioaktywny znacznik, który nadaje się do badań podłużnych. MRI umożliwia obrazowanie 3D z wyjątkowym kontrastem tkanek miękkich. Dodatkową zaletą stosowania 19F w porównaniu ze środkami na bazie żelaza jest to, że 19F jest pozytywnym, łatwo oznaczalnym środkiem kontrastowym znakującym komórki. Co więcej, u ludzi nie ma sygnału MRI w tle 19F, podczas gdy MRI z udziałem żelaza może zostać zakłócone przez różne artefakty obrazowania, a ponadto jest to negatywny środek kontrastowy, który jest trudny do dokładnego określenia ilościowego. Badaczy szczególnie interesuje to, czy komórki odpornościowe docierają do wtórnych narządów limfatycznych, takich jak węzły chłonne.

Projekt badania:

Otwarte badanie fazy I ze zwiększaniem dawki, jednoośrodkowe, w którym weźmie udział (a) 6 zdrowych dorosłych i (b) 6 pacjentów z rakiem prostaty.

Do pierwszej kohorty zostanie włączonych trzech zdrowych dorosłych i trzech pacjentów z rakiem prostaty. Krew pełną (150 ml) zostanie pobrana poprzez wkłucie żyły. Po przetworzeniu krwi w celu uzyskania jednojądrzastych komórek krwi obwodowej (PBMC), połowa PBMC zostanie poddana działaniu Cell Sense przez 8–24 godzin. Biorąc pod uwagę solidność naszych danych uzyskanych na podstawie testów od 5 dawców podczas prób, badacze nie proponują porównywania komórek znakowanych i nieznakowanych jako kryteriów uwalniania. Jednakże badacze będą gromadzić te dane w celach informacyjnych i badawczych. Trzy miliony (3 x 106) autologicznych PBMC znakowanych Cell Sense zostanie podanych śródskórnie pacjentom z kohorty 1. Trzej zdrowi dorośli i 3 pacjenci z rakiem prostaty zostaną przebadani jednocześnie.

Jeżeli w pierwszej kohorcie nie zostaną zaobserwowane żadne zdarzenia niepożądane stopnia 2. lub wyższego, rozpocznie się jednoczesne włączenie do badania drugiej grupy 3 zdrowych dorosłych osób i drugiej grupy 3 pacjentów z rakiem prostaty. Druga grupa pacjentów zostanie poddana temu samemu schematowi, ale ze zwiększeniem dawki do 2-3 x 107 autologicznych PBMC znakowanych Cell Sense, podawanych śródskórnie.

Punkty końcowe:

Podstawowe punkty końcowe:

Określenie wykonalności wykorzystania funkcji Cell Sense do wykrywania i monitorowania migracji PBMC u ludzi

Drugorzędowe punkty końcowe:

• Potwierdzenie i dalsza optymalizacja parametrów obrazowania anatomicznego wykrywania 19F Cell Sense i wodoru-1 (1H) do obrazowania przy użyciu podwójnej cewki 19F/1H.
• Ustalić, czy można wykryć migrację PBMC znakowanych Cell Sense do drenującego węzła chłonnego.
• Określ, czy węzły chłonne w obrazowanym obszarze zmieniają się pod względem wielkości po stronie, w którą wstrzyknięto, w porównaniu do strony przeciwnej.
• Określić liczbę wykrytych PBMC znakowanych metodą Cell Sense.
• Ocenić parametry bezpieczeństwa (toksyczność) określone przez:
• zdarzenia niepożądane.
• poważne zdarzenia niepożądane.
• zmiany wyników badań laboratoryjnych i parametrów życiowych oceniane na podstawie wywiadu, badania fizykalnego i klinicznych testów laboratoryjnych.

Do oceny wszelkich zdarzeń niepożądanych zostaną wykorzystane następujące kategorie:

• Stopień 1: nie zakłóca codziennej aktywności,
• Stopień 2: utrudnia codzienną aktywność, nie wymaga leczenia, z wyjątkiem paracetamolu,
• Stopień 3: uniemożliwia codzienną aktywność lub wymaga leczenia.
• Stopień 4: Zagrażający życiu

Do określenia ciężkości zdarzeń niepożądanych zostaną wykorzystane wytyczne NIH i FDA (lub CTCAE wersja 4.0).